Le NHS-SS-Biotine Thermo Scientific EZ-Link permet une biotinylation simple et efficace des anticorps, des protéines et d’autres molécules contenant des amines primaires, ainsi qu’un marquage intracellulaire.

Caractéristiques du NHS-SS-Biotine EZ-Link :

• Marquage des protéines : anticorps biotinylés ou autres protéines pour la détection ou la purification à l’aide de résines ou de sondes de streptavidine
• Perméabilité membranaire : peut être utilisé pour marquer les cellules internes (intracellulaire)
• Amino-réactif : réagit avec les amines primaires (-NH2), comme les chaînes latérales de la lysine (K) ou les terminaisons amino des polypeptides
• Clivable : la liaison de disulfure dans le bras espaceur permet d’éliminer le marqueur de biotine à l’aide d’agents de réduction tels que le DTT ; seul un petit groupe sulfhydrile reste fixé à la molécule
• Solubilité : doit être dissous dans le DMSO ou le DMF avant une dilution ultérieure dans des tampons aqueux
• Longueur moyenne : le bras espaceur (longueur totale ajoutée à la cible) est de 24,3 angströms ; il se compose du groupe acide valérique de la biotine native étendu par une chaîne de 7 atomes

Le NHS-SS-Biotine est succinimidyl 2-(biotinamido)-éthyl-1,3' -dithiopropionate, un composé qui permet une biotinylation simple et efficace des anticorps, des protéines et d’autres molécules à teneur en amines primaires. Le bras espaceur étendu (24,3 angströms) de ce réactif réduit l’encombrement stérique associé à la liaison à l’avidine ou à d’autres protéines liant la biotine et intègre une liaison disulfure clivable par agent réducteur (-S-S-) dans l’espaceur, offrant ainsi une plus grande polyvalence au réactif.

Nous fabriquons les réactifs de biotine de manière que leur intégrité, homogénéité et performances soient les plus élevées possible, en fonction des applications de recherche ciblées.

Les esters N-N -Hydroxysulfosuccinimide (NHS) de la biotine sont les réactifs de biotinylation les plus répandus. Les biotines activées par NHS réagissent efficacement avec les groupes amines primaires (-NH2) des tampons alcalins pour former des liaisons amides stables. Les protéines (par ex., anticorps) possèdent plusieurs amines primaires qui sont disponibles sous forme de cibles pour le marquage, notamment la chaîne latérale des résidus de lysine (K) et les extrémités N-terminale de chaque polypeptide.

Grande variété de biotines Les réactifs d’ester NHS diffèrent en longueur, solubilité, perméabilité cellulaire et clivabilité. Les réactifs NHS-biotine non sulfonatés sont perméables aux cellules, mais doivent être dissous dans un solvant organique comme le DMSO ou le DMF. Les sulfo-NHS biotine (et ceux avec les espaceurs pégylés) sont directement solubles dans l’eau mais pas perméables aux membranes. Les variétés contenant des ponts disulfures peuvent être clivées à l’aide d’agents de réduction ; il est alors possible de déconnecter le groupe biotine de la protéine marquée.