Pierce™ GST Protein Interaction Pull-Down Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ GST Protein Interaction Pull-Down Kit

Les kits d’extraction de l’interaction des protéines à marquage GST Thermo Fisher Scientific Pierce contiennent les composants nécessaires pour capturerAfficher plus
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RéférenceQuantité
215161 kit
Référence 21516
Prix (EUR)
602,00
Each
Quantité:
1 kit
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
602,00
Each
Les kits d’extraction de l’interaction des protéines à marquage GST Thermo Fisher Scientific Pierce contiennent les composants nécessaires pour capturer et purifier les protéines qui interagissent avec les protéines de fusion marquées par GST.

Caractéristiques du Kit d’extraction de l’interaction des protéines à marquage GST :

Extraction GST (produit n°21516) : purifie délicatement les interactions protéiques de toute protéine de fusion marquée au GST sans les dénaturer
Kits complets : fournissent tous les composants et le protocole détaillé pour la purification des interactions protéines:protéines
Aucun équipement spécial nécessaire : utilisez un équipement de laboratoire et des réactifs communs (par exemple, une microcentrifugeuse)
Pratique : les colonnes de centrifugation pour microcentrifugeuses permettent une manipulation simple et efficace des billes d’agarose, y compris le traitement simple d’échantillons multiples
Flexible : les instructions comprennent des protocoles d’utilisation avec des appâts et des protéines de proie provenant de nombreuses sources différentes
Liaison : lie environ 8 mg de protéines de fusion marquées GST par ml de résine

Applications :
• Découvrez une nouvelle interaction protéine – protéine à partir d’un lysat cellulaire
• Confirmez une interaction putative à partir d’un lysat cellulaire ou d’une protéine précédemment purifiée
• Extrayez les informations d’interaction protéine – protéine à partir de lysats de transcription / traduction in vitro

Vous fournissez la protéine de fusion marquée comme “appât” et les cellules exprimant la cible d’interaction protéique présumée (“proie”), et les Kits d’extraction fournissent tout le reste : tampon de lyse cellulaire, colonnes de centrifugation pour microcentrifugeuse, résine d’affinité spécifique au marquage (perles d’agarose) et tampons et protocole optimisés. Les kits d’extraction sont conçus pour enseigner la méthode aux premiers utilisateurs et pour améliorer la simplicité d’utilisation, la commodité et la reproductibilité pour les chercheurs expérimentés.

Produits associés
™ Kit d’extraction de l’interaction des protéines His Pierce
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

La technique d’extraction est une technique de purification d’affinité à petite échelle similaire à l’immunoprécipitation (IP), sauf que la fonction d’anticorps est remplacée par un autre système d’affinité. Dans ce cas, le système d’affinité est une protéine marquée à la GST pouvant être capturée par des billes d’agarose de glutathion. La protéine de fusion marquée sert d’appât pour capturer un partenaire de liaison putatif (c’est-à-dire la proie). Lors d’un dosage d’extraction typique, la protéine-appât immobilisée est incubée avec un lysat cellulaire. Une fois les étapes de lavage prescrites, les interacteurs sont élués de manière sélective pour l’analyse sur gel ou par transfert Western.

Spécifications
DoserPurification par affinité
Volume du lit750 μL
À utiliser avec (application)Extraction (avec marquage)
À utiliser avec (équipement)Microcentrifugeuse
FormatKit
FormuleSlurry: 50 %
Quantité1 kit
Suffisant pour25 réactions
CibleNon spécifique à la cible
Capacité (métrique)1.5 mL
Gamme de produitsPierce
TypeKit de co-précipitation
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour : Au moins 25 réactions d’extraction, chacune utilisant 25 µl de résine
• Agarose glutathion, 750 µl
• Tampon de lyse d’extraction, 250 ml
• Glutathion, 1 g
• Boîte de TBS (donne 500 ml), 1 boîte
• Colonnes de centrifugation et accessoires Pierce, 27 colonnes
• Tubes de prélèvement pour microcentrifugeuse, 100 tubes

Dès réception, stockez le Tampon de lyse Pierce à température ambiante. Conserver les composants de kit restants à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

If my protein is endogenously expressed, which Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit should I choose?

We recommend the biotin kit for endogenously expressed proteins. The reason for this is the wide variety of biotinylation reagents that can be used to label the detection protein of the binding pair. For help choosing a biotinylation reagent, refer to the Biotinylation Selection Guide available at our website.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How is the tagged protein detected on the membrane using the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

The biotin kit utilizes streptavidin-HRP to detect the biotinylated protein bound to the prey protein on the membrane. The GST kit utilizes a polyclonal goat anti-GST antibody for detection of the glutathione-S-transferase tagged fusion protein bound to another protein on a membrane.

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How many reactions can be performed using one Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit?

The Thermo Scientific Pull-Down Protein:Protein Interaction Kits contain a complete, validated set of reagents specifically developed for performing pull-down assays.The kits contain sufficient materials for conducting 25 pull-down assays.

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Are all of the conditions for binding the prey protein to the bait protein described in the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

No. Every protein pair will require unique conditions in order to bind with one another. Factors to consider are pH, ionic strength of the buffer, need for cofactors, whether the interaction is long term or transient, etc. The researcher is recommended to perform a literature search or try several different conditions in order to determine what conditions are best for the binding of their proteins of interest. The kit includes a “universal“ wash buffer formed by diluting the lysis buffer 1:1 in TBS.

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With the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits, what methods can be used to detect the prey protein?

The prey protein can be detected following transfer on a membrane. The membrane procedures uses 1:100,000 - 1:500,000 dilution of the anti-GST antibody.

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