Pierce™ SMCC

Thermo Scientific Pierce SMCC est un composant réticulé hétéro-bifonctionnel contenant des groupes à base d’esters de N-hydroxysuccinimide (NHS) et de maléimide qui permettent de conjuguer de manière covalente les molécules contenant de l’amine et du sulfhydryle. Les esters de NHS réagissent aux amines primaires à un pH entre 7 et 9 afin de former des liaisons d’amide, tandis que les maléimides réagissent aux groupes sulfhydryles à un pH entre 6,5 et 7,5 pour former des liaisons thioéther stables. Dans les solutions aqueuses, la dégradation hydrolytique de l’ester de NHS est une réaction concurrente dont la vitesse augmente avec le pH. Le groupe maléimide est plus stable que le groupe de l’ester NHS, mais son hydrolyse est lente et perd en spécificité de réaction aux sulfhydryles à un pH > 7,5. Pour ces raisons, les conjugaisons avec ces composants réticulés sont généralement effectuées à un pH entre 7,2 et 7,5, et voient l’ester de NHS (ciblé par les amines) réagir avant ou en même temps que la réaction au maléimide (ciblée par le sulfhydryle).

L’anneau cyclohexane du bras espaceur de ce réactif entraîne une diminution du taux d’hydrolyse du groupe maléimide par rapport aux réactifs similaires qui ne contiennent pas cet anneau. Cette caractéristique permet aux protéines activées par le maléimide avec SMCC d’être lyophilisées et stockées à des fins de conjugaison ultérieure avec une molécule contenant du sulfhydryle. Les produits protéiques activés par le maléimide sont nombreux à être conçus de cette manière.

Les produits Thermo Scientific No-Weigh sont des réactifs spéciaux fournis dans un format pré-aliquoté. L’emballage pré-pesé évite la perte de réactivité et de contamination des réactifs au fil du temps en évitant l’ouverture et la fermeture répétitives du flacon. Ce format permet d’utiliser un flacon de réactif frais à chaque fois, éliminant ainsi les tracas liés à la pesée de petites quantités de réactifs et réduisant les préoccupations concernant la stabilité des réactifs.

Caractéristiques du SMCC :

• Groupes réactifs : Ester de NHS et maléimide
• Réactif vers : groupes amino et sulfhydryles
• Non clivable
• Insoluble dans l’eau (dissoudre d’abord dans du DMF ou du DMSO) ; comparé au Sulfo-SMCC
• Réactif cristallin de haute pureté utilisable pour créer des dérivés de haute pureté activés par maléimide
•. Le pont de cyclohexane confère une stabilité accrue au groupe maléimide, qui fait du SMCC un agent de réticulation idéal pour activer le maléimide des protéines. Les groupes maléimides sont stables pendant 64 heures dans un tampon à base de phosphate de sodium de 0,1 M, à un pH 7 et à 4°C.

Succinimidyl-4-(N-maléimidométhyl)cyclohexane-1-carboxylate (SMCC) est un composant réticulé non clivable perméable à la membrane. Il contient un ester de N-hydroxysuccinimide réactif à l’amine et un groupe maléimide réactif au sulfhydryle. Les esters NHS réagissent avec les amines primaires à un pH de 7 à 9 pour former des liaisons d’amide stables. Les maléimides réagissent avec les groupes sulfhydryle à un pH de 6,5 à 7,5 pour former des liaisons thioéther stables. Les groupes maléimides du SMCC et de Sulfo-SMCC sont exceptionnellement stables jusqu’à un pH de 7,5 en raison du pont cyclohexane du bras espaceur.

Applications :
• Marquage enzymatique des anticorps - la spécificité de l’enzyme et de l’anticorps peut être conservée
• Créer des bioconjugués spécifiques par le biais de réactions de réticulation en une ou deux étapes
• Créer des protéines porteuses réactives au sulfhydryle et activées par le maléimide pour le couplage des haptènes

Spécifications :
Nous fabriquons du SMCC selon les spécifications les plus élevées pour produire les bioconjugués et les protéines activées par le maléimide les plus spécifiques, assurer l’intégrité de vos données et vous fournir le plus haut degré d’homogénéité de réticulation. Chaque lot de SMCC est testé pour remplir les conditions minimales suivantes :

• Identité : Le balayage IR montre uniquement des pics caractéristiques de la structure et des groupes fonctionnels d’agent de réticulation SMCC
• Pureté : ≥ 92 % par RMN

Références produit :
Guide d’application de la réticulation : recherche de références bibliographiques récentes pour ce produit