Réactif du dosage Pierce™ Coomassie Plus (Bradford)

Le dosage protéique Pierce Coomassie Plus (Bradford) est un réactif de dosage de Bradford amélioré, compatible avec les agents de réduction et prêt à l’emploi. Il permet de mesurer rapidement une concentration protéique totale par rapport à un étalon protéique. Le réactif de dosage Pierce Coomassie Plus fournit une linéarité accrue et la moitié de la variabilité protéine-protéine d’autres formulations commerciales de dosage de Bradford.

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Caractéristiques du dosage protéique Coomassie Plus :
• Colorimétrique : mesurez avec un spectrophotomètre étalon ou un lecteur de plaque à 595 nm
• Facile à utiliser : réactif unique ; aucune préparation de réactif de travail nécessaire
• Rapide : développement de la couleur quasi immédiat ; ajouter, mélanger et lire les résultats
• Plage de dosage : détecte une concentration de protéines comprise entre 1 et 1 500 µg / ml
• Amélioration : meilleure linéarité et uniformité de la réponse par rapport aux formulations traditionnelles de Bradford
• Flexible : protocoles de microplaques et de cuvettes fournis et adaptables à plusieurs gammes de travail cibles

Le réactif de dosage Pierce Coomassie Plus est une solution unique et prête à l’emploi pour mesurer la concentration protéique. Il vous suffit d’ajouter le réactif à des échantillons et des étalons de même volume, de les mélanger et d’en mesurer l’absorbance à 595 nm. Le dosage peut être réalisé dans un tube à essai ou sur une microplaque. Le dosage protéique est compatible avec la plupart des sels, solvants, tampons, thiols, substances réductrices et agents chélateurs des métaux rencontrés dans les échantillons de protéines.

Comment le dosage Coomassie Plus (Bradford) détecte les protéines
En 1976, le Dr. Marion Bradford a été le premier à décrire le recours au colorant G-250 Coomassie dans un réactif colorimétrique pour détecter et quantifier toutes les protéines. Dans l’environnement acide du réactif, la protéine se lie au colorant Coomassie. Cela donne lieu à une variation spectrale à partir de la forme rouge / violette du colorant (maximum d’absorbance à 465 nm) à la forme bleue du colorant (maximum d’absorbance à 610 nm). La différence entre les deux formes du colorant est à son apogée à 595 nm, elle représente donc la longueur d’onde optimale pour mesurer la couleur bleue du complexe colorant-protéine Coomassie. Si vous le souhaitez, la couleur bleue peut être mesurée à une longueur d’onde quelconque entre 575 nm et 615 nm. Aux deux extrêmes (575 nm et 615 nm), il y a une perte d’environ 10 % de la quantité de couleur mesurée (absorbance) par rapport à celle obtenue à 595 nm.

Le développement de la couleur dans les dosages protéiques à base de colorant Coomassie (Bradford) a été associé à la présence de certains acides aminés de base (principalement l’arginine, la lysine et l’histidine) dans la protéine. Les forces Van der Waals et les interactions hydrophobes participent également à la liaison du colorant par protéine. Le nombre de ligands du colorant Coomassie liés à chaque molécule de protéine est à peu près proportionnel au nombre de charges positives sur la protéine. Les acides aminés libres, les peptides et les protéines au poids moléculaire faible ne génèrent pas de couleur avec les réactifs de colorant Coomassie. En général, la masse d’un peptide ou d’une protéine doit être d’au moins 3 000 daltons pour pouvoir être dosée avec ce réactif.

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