Pierce™ Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes

Le kit de coloration réversible des protéines Thermo Scientific Pierce pour les membranes en PVDF est une alternative rapide et sensible à la coloration Ponceau S pour la détection des protéines sur membranes en PVDF après un transfert à partir de gels de polyacrylamide.

Caractéristiques du kit de coloration réversible des protéines pour membranes en PVDF :

• Meilleure que la coloration Ponceau S : plus sensible, plus facile à documenter, permanente jusqu’à l’inversion (ne s’estompe pas)
• Sensible : haute avidité, coloration totale des protéines ; limite inférieure de détection égale à 25 à 50 ng par bande
• Précise : ne détecte que les protéines ; ne se lie pas et n’interagit pas avec d’autres composants d’électrophorèse ou d’échantillon
• Rapide : colore en moins de 30 minutes ; effacement complet et coloration inverse en moins de 15 minutes
• Stable : les composants sont stables à température ambiante, ce qui permet d’économiser de l’espace au réfrigérateur et d’éliminer les étapes d’équilibrage

Ce kit de coloration membranaire utilise une méthode non destructive, réversible, fiable et sensible pour colorer et détecter les protéines sur les membranes en PVDF. Ce kit est une alternative supérieure aux colorations Ponceau S pour évaluer l’efficacité du transfert de protéines après SDS-PAGE et avant un immunotransfert. La limite inférieure de détection avec cette méthode est de 25 à 50 ng par bande (au moins cinq fois plus sensible que la coloration Ponceau S traditionnelle). Le protocole de coloration est simple, rapide et se traduit par des bandes bleu turquoise qui ne s’estompent pas et sont facilement photographiées pour référence ultérieure. La coloration peut être facilement inversée en moins de 15 minutes. La détection ultérieure de transfert Western n’est pas affectée car la coloration est complètement éliminée et ne modifie pas la protéine.

Le kit de coloration réversible des protéines Pierce pour membranes en PVDF présente une excellente avidité pour une large gamme de protéines : la variabilité protéine-protéine est faible et la plupart des protéines sont détectées à des niveaux très faibles (25 à 50 ng par bande). La coloration de membrane Pierce est plus efficace que les autres colorants protéiques disponibles pour les membranes en PVDF. Par exemple, Ponceau S est moins sensible et donne des bandes rouges qui s’estompent facilement et sont difficiles à photographier. Le colorant Coomassie est un colorant sensible, mais il se lie en permanence aux protéines et peut interférer avec le transfert Western.

Le kit utilise un colorant ayant une affinité élevée pour les protéines mais ne se lie pas de façon permanente. La coloration présente un minimum d’interactions non spécifiques avec la surface de la membrane et les réactifs de transfert de protéines, et la technique est compatible avec les systèmes de transfert Western généraux. La membrane traitée n’interfère pas avec la détection par chimiluminescence ou chromogénie conventionnelle en utilisant des substrats de HRP et de phosphatase alcaline. De plus, la coloration est compatible avec l’analyse de séquences à extrémité N-terminale des protéines excisées et éluées à partir de la membrane.

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