Kit d’analyse quantitative de la biotine Pierce™
Thermo Scientific™

Kit d’analyse quantitative de la biotine Pierce™

Le kit de quantification de la biotine Thermo Scientific Pierce comprend des aliquotes de réactif HABA et de protéine biotinyléeAfficher plus
Have Questions?
RéférenceQuantité
2800512 tests
Référence 28005
Prix (EUR)
331,00
Each
Quantité:
12 tests
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
331,00
Each
Le kit de quantification de la biotine Thermo Scientific Pierce comprend des aliquotes de réactif HABA et de protéine biotinylée pour une détermination colorimétrique pratique des niveaux de biotinylation dans les anticorps marqués et d’autres protéines.

Caractéristiques du kit de quantification de la biotine :

Colorimétrique : nécessite un lecteur de plaque ou un spectrophotomètre réglé pour mesurer à 500 nm
Fiable : méthode éprouvée et bien caractérisée pour la détermination des niveaux de biotinylation
Pratique : le kit fournit les réactifs et les étalons essentiels pour réaliser facilement le dosage
Flexible : adaptable aux cuvettes de spectrophotomètre ou aux lecteurs de plaques standard avec microplaques à 96 puits
Options : calculez les résultats directement à partir des valeurs d’absorbance basées sur les coefficients d’extinction en utilisant la procédure décrite dans les instructions
Robuste : le complexe HABA-avidine fourni peut être utilisé sur une large gamme de pH et de concentrations en sel

Le colorant HABA (acide 4’-hydroxyazobenzène-2-carboxylique) est un réactif qui permet d’estimer rapidement le rapport molaire de la biotine à la protéine dans une solution. Le kit de quantification de la biotine Pierce contient un pré-mélange de HABA et d’avidine et un contrôle positif de la peroxydase de raifort biotinylée (HRP). Le pré-mélange HABA-avidine est fourni dans un emballage pratique de microtubes Thermo Scientific No-Weigh, ce qui élimine les difficultés associées à la pesée de petites quantités de réactif.

Pour quantifier la biotinylation, une solution contenant la protéine biotinylée est ajoutée à un mélange de HABA et d’avidine. En raison de sa plus grande affinité pour l’avidine, la biotine déplace le HABA et l’absorbance à 500 nm diminue profractionnellement. Par cette méthode, une quantité inconnue de biotine présente dans une solution peut être quantifiée dans une seule cuve en mesurant l’absorbance de la solution HABA-avidine avant et après l’ajout de l’échantillon contenant de la biotine. Le changement d’absorbance se rapporte à la quantité de biotine dans l’échantillon par le coefficient d’extinction du complexe HABA-avidine. Consulter la calculatrice HABA en ligne.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Gamme de produitsPierce
Type de produitKit de quantification de biotine
Quantité12 tests
Labeling TargetAnticorps, Protéines
Marqueur ou colorantBiotine
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Suffisant pour : Test de la biotinylation de 12 échantillons protéiques
• Pré-mélange HABA-avidine, 24 tubes
• Peroxydase de raifort biotinylée, 5 mg

Stocker à 4°C.

Foire aux questions (FAQ)

How can I determine the amount of biotinylation on my ligand?

An assay with HABA dye (Cat. No. 28010 or 28005) can be used to determine the molarity of biotin in solution.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can you provide the shelf life for Pierce Biotin Quantitation Kit (28005)?

Pierce Biotin Quantitation Kit is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended (4 degrees C). Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How can I determine the degree of protein labeling?

To quantitate biotin, we offer two kits as follows:

  • Biotin Quantitation Kit (Cat. No. 28005): With this kit, a solution containing the biotinylated protein is added to a mixture of HABA reagent (4’-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid and avidin. Because of its higher affinity for avidin, biotin displaces the HABA and the absorbance at 500nm decreases proportionally. 
  • Fluorescence Biotin Quantitation kit (Cat. No. 46610): This microplate-based biotin assay is easy to perform by adding the supplied fluorescent reporter to the biotinylated samples and diluted biocytin standards. The avidin fluoresces when the weakly interacting HABA (4’-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid) is displaced by the biotin. The amount of biotin is determined by comparing the sample's fluorescence to the biocytin standard curve. This assay requires must less sample volume than the microplate colorimetric HABA assay and is much more sensitive

  • To determine the dye-to-protein ratio after fluorophore conjugation, absorbance readings of the protein:dye conjugate are taken and the molar ratio can then be calculated. Please go to this Tech Tip (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/brochures/TR0031-Calc-FP-ratios.pdf")for more information

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

    Citations et références (10)

    Citations et références
    Abstract
    Buoyancy-activated cell sorting using targeted biotinylated albumin microbubbles.
    Authors:Liou YR, Wang YH, Lee CY, Li PC
    Journal:
    PubMed ID:25993512
    'Cell analysis often requires the isolation of certain cell types. Various isolation methods have been applied to cell sorting, including fluorescence-activated cell sorting and magnetic-activated cell sorting. However, these conventional approaches involve exerting mechanical forces on the cells, thus risking cell damage. In this study we applied a novel isolation ... More
    A general protocol for the generation of Nanobodies for structural biology.
    Authors:Pardon E, Laeremans T, Triest S, Rasmussen SG, Wohlkönig A, Ruf A, Muyldermans S, Hol WG, Kobilka BK, Steyaert J
    Journal:
    PubMed ID:24577359
    There is growing interest in using antibodies as auxiliary tools to crystallize proteins. Here we describe a general protocol for the generation of Nanobodies to be used as crystallization chaperones for the structural investigation of diverse conformational states of flexible (membrane) proteins and complexes thereof. Our technology has a competitive ... More
    Development of a novel, guinea pig-specific IFN-? ELISPOT assay and characterization of guinea pig cytomegalovirus GP83-specific cellular immune responses following immunization with a modified vaccinia virus Ankara (MVA)-vectored GP83 vaccine.
    Authors:Gillis PA, Hernandez-Alvarado N, Gnanandarajah JS, Wussow F, Diamond DJ, Schleiss MR
    Journal:
    PubMed ID:24856783
    The guinea pig (Cavia porcellus) provides a useful animal model for studying the pathogenesis of many infectious diseases, and for preclinical evaluation of vaccines. However, guinea pig models are limited by the lack of immunological reagents required for characterization and quantification of antigen-specific T cell responses. To address this deficiency, ... More
    Engineering selective competitors for the discrimination of highly conserved protein-protein interaction modules.
    Authors:Rimbault C, Maruthi K, Breillat C, Genuer C, Crespillo S, Puente-Muñoz V, Chamma I, Gauthereau I, Antoine S, Thibaut C, Tai FWJ, Dartigues B, Grillo-Bosch D, Claverol S, Poujol C, Choquet D, Mackereth CD, Sainlos M
    Journal:Nat Commun
    PubMed ID:31586061
    'Designing highly specific modulators of protein-protein interactions (PPIs) is especially challenging in the context of multiple paralogs and conserved interaction surfaces. In this case, direct generation of selective and competitive inhibitors is hindered by high similarity within the evolutionary-related protein interfaces. We report here a strategy that uses a semi-rational ... More
    A Monoclonal-Monoclonal Antibody Based Capture ELISA for Abrin.
    Authors:Tam CC, Cheng LW, He X, Merrill P, Hodge D, Stanker LH
    Journal:Toxins (Basel)
    PubMed ID:29057799
    Abrin, one of the most highly potent toxins in the world, is derived from the plant,