Le système de CQ RNaseAlert™ v2 détecte l’activité RNase dans un dosage fluorimétrique pratique et sensible offrant des résultats en temps réel. Cette version contient un substrat environ 60 % plus sensible que la version précédente. Le kit contient suffisamment de réactifs pour 5 x 96 (480) dosages à haut rendement.

Caractéristiques du système de CD RnaseAlrt™ v2 :

• Peut détecter des quantités aussi faibles qu’environ 0,3 pg de RNase A avec un fluoromètre
• Dosage simple de 30 minutes
• Conçu pour surveiller l’activité de la RNase dans les fractions de colonne pendant la purification des protéines
• Pour une utilisation avec le système de CQ DNaseAlert™ pour détecter quantitativement la RNase et la DNase dans le même échantillon

Le système de CQ RNaseAlert™ v2 utilise un nouveau substrat d’ARN plus sensible et marqué avec une molécule rapporteur fluorescent (fluor) à une extrémité et un extincteur de l’autre. En l’absence de RNases, la proximité physique de l’extincteur réduit la fluorescence du fluor à des niveaux extrêmement faibles. Cependant, lorsque des RNases sont présentes, le substrat d’ARN est clivé et le fluor et l’extincteur sont séparés spatialement dans la solution. Ainsi, une fois le fluor excité par la lumière de la longueur d’onde adaptée, ce dernier émettra un signal vert.

La fluorescence peut être facilement observée avec un fluoromètre à filtres ou à monochromateurs. Étant donné que la fluorescence du substrat RNaseAlert™ augmente avec le temps lorsqu’une activité RNase est présente, les résultats observés au fluoromètre peuvent être évalués cinétiquement. La séquence du substrat RNaseAlert™ a été soigneusement optimisée pour détecter plusieurs RNases, notamment la RNase A, la RNase T1, la RNase I, la nucléase micrococcale, la nucléase S1, la nucléase de haricot mungo et Benzonase™.

Protocole rapide et pratique
La procédure RNaseAlert™ ne nécessite que quelques minutes pour être configurée. Le substrat fluorescent et lyophilisé est reconstitué dans le tube fourni et incubé avec la solution d’essai pendant quelques minutes. Les résultats sont ensuite lus avec un fluoromètre. Les échantillons qui rayonnent nettement en comparaison du contrôle négatif sont contaminés et ne doivent pas être utilisés avec l’ARN. L’eau exempte de nucléase et la RNase A sont fournies à des fins de contrôle.

Produit accessoire
Le système de CQ RNaseAlert™ v2 est entièrement compatible avec le système de CQ DNaseAlert™. Étant donné que le substrat DNaseAlert™ contient une étiquette fluorescente distincte sur le plan spectral du substrat RNaseAlert™, les deux kits peuvent être utilisés simultanément pour les analyses quantitatives en temps réel de la RNase et de la DNase dans un seul échantillon.