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Thermo Scientific™
Pierce™ Monomeric Avidin UltraLink™ Resin
La résine d’avidine monomérique UltraLink Thermo Scientific Pierce est idéale pour la purification par affinité des protéines, peptides et d’autresAfficher plus
| Référence | Quantité |
|---|---|
| 53146 | 5 ml |
Référence 53146
Prix (EUR)
752,00
Each
Quantité:
5 ml
Prix (EUR)
752,00
Each
La résine d’avidine monomérique UltraLink Thermo Scientific Pierce est idéale pour la purification par affinité des protéines, peptides et d’autres molécules biotinylées. L’immobilisation des monomères d’avidine résulte en une résine de purification avec une affinité de liaison à la biotine beaucoup plus faible que l’avidine tétramérique native, permettant ainsi la récupération de molécules biotinylées en utilisant des conditions d’élution douces.
La protéine d’avidine monomérique immobilisée se lie à la biotine avec une haute spécificité et une affinité modérée, permettant ainsi de laver les molécules non biotine, puis d’éluer les molécules marquées à la biotine et liées de manière compétitive à l’aide de 2 mM de biotine dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS). Cette technique fournit les conditions d’élution les plus douces pour la purification des protéines biotinylées et évite la contamination et d’autres problèmes associés aux méthodes traditionnelles basées sur l’avidine et la streptavidine. La colonne d’avidine monomère peut ensuite être régénérée en utilisant 0,1 M de glycine pour débarrasser la colonne de la biotine résiduelle liée sans perdre la capacité de lier un autre échantillon biotinylé.
Avec l’avidine ou la streptavidine typiques, l’affinité de liaison à la biotine (Kd = 10-15 M) est si grande que la purification avec ces milieux traditionnels nécessite des conditions dénaturantes pour l’élution, comme 8 M de chlorhydrate de guanidine à pH 1,5 ou l’ébullition dans un tampon de chargement d’échantillon SDS-PAGE réducteur. En plus de leurs effets néfastes sur la protéine biotinylée d’intérêt, ces conditions d’élution sévères amènent en général des protéines étrangères (c.-à-d. les sous-unités avidine ou streptavidine) à se détacher de la résine et à produire une co-élution avec le produit de purification souhaité. Par contre, lorsque l’avidine est couplée à une résine (p. ex., l’agarose en microbille réticulée ou la résine UltraLink) comme monomère de la sous-unité, sa spécificité pour la biotine est retenue, mais son affinité de liaison à la biotine diminue jusqu’à un niveau (Kd = 10-8 M) qui est propice à l’élution ultérieure.
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La protéine d’avidine monomérique immobilisée se lie à la biotine avec une haute spécificité et une affinité modérée, permettant ainsi de laver les molécules non biotine, puis d’éluer les molécules marquées à la biotine et liées de manière compétitive à l’aide de 2 mM de biotine dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS). Cette technique fournit les conditions d’élution les plus douces pour la purification des protéines biotinylées et évite la contamination et d’autres problèmes associés aux méthodes traditionnelles basées sur l’avidine et la streptavidine. La colonne d’avidine monomère peut ensuite être régénérée en utilisant 0,1 M de glycine pour débarrasser la colonne de la biotine résiduelle liée sans perdre la capacité de lier un autre échantillon biotinylé.
Avec l’avidine ou la streptavidine typiques, l’affinité de liaison à la biotine (Kd = 10-15 M) est si grande que la purification avec ces milieux traditionnels nécessite des conditions dénaturantes pour l’élution, comme 8 M de chlorhydrate de guanidine à pH 1,5 ou l’ébullition dans un tampon de chargement d’échantillon SDS-PAGE réducteur. En plus de leurs effets néfastes sur la protéine biotinylée d’intérêt, ces conditions d’élution sévères amènent en général des protéines étrangères (c.-à-d. les sous-unités avidine ou streptavidine) à se détacher de la résine et à produire une co-élution avec le produit de purification souhaité. Par contre, lorsque l’avidine est couplée à une résine (p. ex., l’agarose en microbille réticulée ou la résine UltraLink) comme monomère de la sous-unité, sa spécificité pour la biotine est retenue, mais son affinité de liaison à la biotine diminue jusqu’à un niveau (Kd = 10-8 M) qui est propice à l’élution ultérieure.
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Type de colonneAffinité, résine UltraLink™
DescriptionRésine d’avidine monomérique UltraLink Pierce
FormatFlacon
Quantité5 ml
Phase stationnaireAvidine
CibleMolécule marquée à la biotine
Gamme de produitsPierce, UltraLink
TypeRésine
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Dès réception, stocker à 4°C.