Réactif Syn-PER™ pour l’extraction de protéines synaptiques

Le réactif Syn-PER pour l’extraction de protéines synaptiques Thermo Scientific est un réactif exclusif de lyse cellulaire pour l’isolement efficace des synaptosomes contenant des protéines synaptiques fonctionnelles à partir de tissus neuronaux et de neurones primaires cultivés.

Caractéristiques du réactif Syn-PER pour l’extraction de protéines synaptiques :

• Extraction efficace des synapses — permet d’obtenir jusqu’à 10 µg de protéines synaptiques par milligramme de tissu neuronal ou 4 µg de protéines synaptiques par boîte de 35 mm de neurones primaires cultivés (10⁶ cellules)
• Formulation non agressive — permet d’isoler les synaptosomes viables, puis de lyser ces synapses pour extraire les protéines synaptiques natives et préserver l’intégrité des phosphoprotéines
• Procédure rapide — permet d’obtenir une suspension synaptosomale des synapses intactes en moins d’une heure
• Protocole simple — ne nécessite aucune étape d’ultracentrifugation

Applications du réactif Syn-PER pour l’extraction de protéines synaptiques :
• Isoler les synaptosomes fonctionnels pour étudier la libération des neurotransmetteurs
• Extraire les protéines pré et post-synaptiques pour identifier les changements dans la composition et la fonction des protéines dans les synapses
• Préserver et étudier les événements de phosphorylation des protéines labiles ou transitoires associés aux synapses

Le réactif Syn-PER est utilisé pour préparer des synaptosomes contenant des protéines pré et post-synaptiques biologiquement actives (c’est-à-dire des membranes intactes et des complexes protéiques de synapses). Lorsqu’ils sont utilisés avec des tissus neuronaux frais ou des neurones primaires en culture, les synaptosomes préparés avec le réactif Syn-PER peuvent être utilisés pour étudier la transmission synaptique. Les protéines synaptosomales contenues dans ces extraits peuvent également être utilisées pour des applications en aval telles que le transfert Western, l’immunoprécipitation, les essais d’activité enzymatique et les études d’interaction entre les protéines. Le réactif Syn-PER pour l’extraction de protéines synaptiques minimise la dégradation des phosphoprotéines et est idéal pour les études nécessitant la préservation de l’intégrité des phosphoprotéines.

Le réactif Syn-PER pour l’extraction de protéines synaptiques enrichit efficacement les protéines pré et post-synaptiques dans les synaptosomes avec un rendement élevé. Le réactif de lyse cellulaire non dénaturant est compatible avec plusieurs applications en aval : dosages de libération de neurotransmetteurs, dosages enzymatiques (p. ex., phosphatase, kinases), immunodosages, procédures de chromatographie et électrophorèse. De plus, le réactif Syn-PER préserve mieux l’intégrité des phosphoprotéines que la plupart des tampons d’extraction commercialisés, même en l’absence d’inhibiteurs de phosphatase. Le réactif Syn-PER est exempt d’inhibiteurs de protéase ou de phosphatase. Cependant, des inhibiteurs tels que les inhibiteurs de protéase et / ou de phosphatase Halt Thermo Scientific peuvent être ajoutés juste avant utilisation pour éviter la protéolyse ou offrir une protection accrue contre l’activité phosphatase élevée normalement présente dans les tissus cérébraux.

Les synaptosomes sont des terminaisons nerveuses isolées qui sont générées lors de l’homogénéisation des tissus nerveux. Les préparations de synaptosomes sont utiles pour l’extraction de protéines pré- et post-synaptiques car elles contiennent l’extrémité présynaptique complète, dont les mitochondries et vésicules synaptiques, la membrane post-synaptique et la densité post-synaptique. Les synaptosomes permettent d’étudier la fonction synaptique : ils contiennent des canaux ioniques fonctionnels, des récepteurs, des enzymes et des vésicules synaptiques intactes, qui peuvent absorber et libérer des neurotransmetteurs. La préparation du synaptosome implique plusieurs étapes d’ultracentrifugation et des gradients de densité pour séparer cette fraction cellulaire des autres organites.

Plus de données sur le produit
• Méthode d’isolement des synaptosomes fonctionnels

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