N-PER™ Extraktions-Reagenz für Neuronalprotein

Das Thermo Scientific N-PER neuronale Protein-Extraktionsreagenz ist ein (urheberrechtlich) geschütztes Zelllysereagenz, das für die effiziente Extraktion von Proteinen aus allen Zellkompartimenten von neuronalem Gewebe und primären kultivierten Neuronen optimiert ist.

Merkmale des Thermo Scientific N-PER neuronale Protein-Extraktionsreagenzes:

• Optimiert—effiziente Extraktion des gesamten neuronalen Proteins, einschließlich Membranproteinen, aus Gewebe oder primären Zellkulturen
• Schonend—bewahrt die Proteinfunktion, ohne die Ausbeute zu beeinträchtigen
• Vielseitig—Proteasehemmer, Reduktionsmittel, Chelatbildner oder erforderliche Kofaktoren können zugesetzt werden
• Kompatibel—die Extrakte eignen sich für die Verwendung mit Gesamtprotein-, enzymatischen und immunologischen Assays und Proteinaufreinigungsmethoden

Neuronzelllysate, wie z. B. Hirngewebeextrakte, die mit dem N-PER-Reagenz angesetzt werden, eignen sich für enzymatische Aktivierungsassays (z. B. Phosphatase, Kinase, ATPase Assays), Immunassays (z. B. Western Blots, ELISAs, RIAs) und Proteinaufreinigung. Das N-PER Lysereagenz ermöglicht die Proteinextraktion in weniger als 30 Minuten und erfordert einen mechanischen Aufbruch des Gewebes (z. B. Dounce-Homogenisierung, Polytron). Die typische Ausbeute neuronaler Proteine liegt bei 70 bis 90 µg Protein pro mg Gehirngewebe oder bei 300 µg Gesamtprotein aus 10⁶ primären neuronalen Zellen.

Anwendungen:
• Isolieren Sie funktionelle Proteine aus neuronalen Geweben oder primären neuronalen Zellen
• Studieren Sie enzymatische Aktivitätsassays speziell für neuronales Gewebe
• Erzeugen Sie Lysate aus neuronalen Geweben für die Biomarker-Analyse

Typische Neuronstrukturen umfassen den Zellkörper (Soma), Dendriten und ein Axon. Die einzigartige Morphologie und die hohe Sphingolipid- und Cholesterinzusammensetzung von neuronalen Zellmembranen stellen eine Herausforderung bei der Präparation neuronaler Proteinextrakte dar. Das N-PER Neuronalprotein-Extraktionsreagenz wurde speziell entwickelt, um die Herausforderungen bei der Extraktion von funktionellen nativen Proteinen aus dem Gehirn oder anderen neuronalen Geweben und primären kultivierten Neuronen zu meistern, während die Proteinausbeute im Vergleich zu anderen Extraktionsmethoden gesteigert wird.

Die milde Formulierung des N-PER Zelllysereagenz ist ideal für nachgeschaltete Anwendungen geeignet, die aktive neuronale Proteine erfordern. Darüber hinaus ist das N-PER Reagenz mit vielen Anwendungen kompatibel, einschließlich Enzym-Assays (z. B. Phosphatase, Kinase), Immunassays, verschiedenen Chromatographie-Verfahren und Elektrophorese. Der Thermo Scientific Halt Protease-Inhibitor-Cocktail oder Phosphatase-Inhibitor-Cocktail kann kurz vor der Anwendung hinzugefügt werden, um einer Proteolyse vorzubeugen oder um zusätzlichen Schutz vor der hohen Phosphataseaktivität zu bieten, die normalerweise im Gehirngewebe vorhanden ist.

Für jede Extraktion wird ein Verhältnis von 1 g Gewebe auf 10 ml N-PER-Reagenz oder 0,5-1 ml N-PER-Reagenz pro 10 cm Petrischale primärer Kulturzellen empfohlen.

Weitere Produktdaten
• Optimiertes Proteinextraktionsreagenz für neuronales Gewebe und primäre Zellen

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