Nucléase universelle Pierce™ pour lyse cellulaire
Nucléase universelle Pierce™ pour lyse cellulaire
Le produit réel peut varier
Thermo Scientific™

Nucléase universelle Pierce™ pour lyse cellulaire

La nucléase universelle Thermo Scientific Pierce pour la lyse cellulaire est idéale pour une grande variété d’applications où une digestionAfficher plus
Have Questions?
Modifier l'affichagebuttonViewtableView
RéférenceQuantité
8870125 kU
887005 kU
88702100 kU
Référence 88701
Prix (EUR)
297,65
Online Exclusive
346,00
Économisez 48,35 (14%)
Each
Ajouter au panier
Quantité:
25 kU
Grand volume ou format personnalisé
Prix (EUR)
297,65
Online Exclusive
346,00
Économisez 48,35 (14%)
Each
Ajouter au panier
La nucléase universelle Thermo Scientific Pierce pour la lyse cellulaire est idéale pour une grande variété d’applications où une digestion complète des acides nucléiques est nécessaire lors de la préparation de lysats cellulaires.

Caractéristiques de la nucléase universelle pour la lyse cellulaire :

Large spectre : dégrade toutes les formes d’ADN et d’ARN
Enzyme de la plus haute qualité : la nucléase est à ≥99 % pure, comme testé par SDS-PAGE
Activité robuste : 100 fois supérieure à l’activité spécifique de la DNase I
Polyvalente : peut être utilisée avec une grande variété de réactifs de lyse cellulaire

La nucléase universelle Pierce pour la lyse cellulaire est une endonucléase génétiquement modifiée de Serratia marcescens. L’enzyme est produite et purifiée à partir d’E. coli et se compose de deux sous-unités identiques de 30-kDa avec deux ponts de dissulfure critiques. Cette endonucléase indifférenciée dégrade l’ADN et l’ARN simple brin, double brin, linéaire et circulaire et est efficace à des températures et à des pH très variables. Cette enzyme possède une activité spécifique élevée (100 fois supérieure à celle de la DNase I) et une stabilité thermique supérieure aux autres nucléases. La nucléase universelle Pierce est une enzyme pure à ≥99 %, exempte de toute activité protéasique mesurable et appliquée à 250 U/µl. La nucléase Pierce Universal utilisée pour la lyse cellulaire est identique en termes de performances à la nucléase Benzonase™ (EMD Merck).

Applications :
•À utiliser avec B-PER, Y-PER ou d’autres réactifs de lyse cellulaire commerciaux ou faits maison et/ou perturbations mécaniques pour réduire la viscosité dans les extraits de protéines
• Retirez l’ADN et l’ARN des préparations de protéines recombinantes avant le traitement en aval

La nucléase universelle Pierce pour la lyse cellulaire est couramment utilisée pour réduire la viscosité des extraits de protéines bactériennes et de mammifères pour les applications en aval en retirant les acides nucléiques des préparations de protéines. L’enzyme digère complètement les acides nucléiques en oligonucléotides dont la longueur est inférieure à 5 bases. La nucléase universelle Pierce pour lyse cellulaire contribue à améliorer la séparation du culot de lysat du surnageant, améliore la filtration du lysat traité, améliore le temps de traitement de la chromatographie et augmente le rendement global des protéines. Il a également été démontré que l’endonucléase améliore la compatibilité des extraits protéiques pour l’électrophorèse sur gel en 2D. Une unité correspond à la quantité d’enzymes nécessaire pour produire un changement de 1,0 dans l’absorbance à 260 nm de l’ADN du Hareng sonicé en 30 minutes à 37°C, tel que déterminé à l’aide de la nucléase standard du dosage de l’activité volumétrique du Serratia marcescens de Merck™.

Produits associés
Solution de nucléase micrococcale (≥ 1 unité/µl)
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
TamponTampon de lyse
EnzymesNucléase
Quantité25 kU
Type de réactifEnzyme pour lyse cellulaire
FormeLiquide
Gamme de produitsPierce
Type de produitNucléase universelle
Unit SizeEach
Contenu et stockage
À conserver dans un endroit frais, sec et bien ventilé, à l’abri de la lumière directe du soleil.

Foire aux questions (FAQ)

After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Mass Spectrometry Support Center.

Can you explain how the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent lyses cells?

The B-PER Reagent solution contains a proprietary, mild, non-ionic detergent in 20 mM Tris-HCl, pH 7.5. It effectively disrupts cells and solubilizes native or recombinant proteins without denaturation. The reagent creates holes in the cell membrane that will leak out cytosolic proteins. The sample may become very viscous when the bacterial chromosome is released. We recommend adding DNAse I (Cat. No. 90083) to the reagent to reduce viscosity. For better lysis efficiency and if there are inclusion bodies, we recommend adding Lysozyme (Cat. No. 90082) to the reagent. Alternatively, you may purchase the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent with Enzymes Kit (Cat. No. 90078 or 90079) that includes the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent, DNase I, and Lysozyme.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

Citations et références (5)

Citations et références
Abstract
Validation of an IFN-gamma ELISpot assay to measure cellular immune responses against viral antigens in non-human primates.
Authors:Yang F,Patton K,Kasprzyk T,Long B,Gupta S,Zoog SJ,Tracy K,Vettermann C
Journal:Gene therapy
PubMed ID:33432123
Adeno-Associated Virus (AAV)-based gene therapy vectors are in development for many inherited human disorders. In nonclinical studies, cellular immune responses mediated by cytotoxic T cells may target vector-transduced cells, which could impact safety and efficacy. Here, we describe the bioanalytical validation of an interferon-gamma (IFN-γ)-based Enzyme-Linked Immunospot (ELISpot) assay for ... More
Characterization of an expanded set of assays for immunomodulatory proteins using targeted mass spectrometry.
Authors:Whiteaker JR,Zhao L,Schoenherr RM,Huang D,Kennedy JJ,Ivey RG,Lin C,Lorentzen TD,Colantonio S,Caceres TW,Roberts RR,Knotts JG,Reading JJ,Perry CD,Garcia-Buntley SS,Bocik W,Hewitt SM,Paulovich AG
Journal:Scientific data
PubMed ID:38918394
Immunotherapies are revolutionizing cancer care, but many patients do not achieve durable responses and immune-related adverse events are difficult to predict. Quantifying the hundreds of proteins involved in cancer immunity has the potential to provide biomarkers to monitor and predict tumor response. We previously developed robust, multiplexed quantitative assays for ... More
PhoXplex: Combining Phospho-enrichable Cross-Linking with Isobaric Labeling for Quantitative Proteome-Wide Mapping of Protein Interfaces.
Authors:Hoenger Ramazanova RD,Roumeliotis TI,Wright JC,Choudhary JS
Journal:Journal of proteome research
PubMed ID:39422127
Integrating cross-linking mass spectrometry (XL-MS) into structural biology workflows provides valuable information about the spatial arrangement of amino acid stretches, which can guide elucidation of protein assembly architecture. Additionally, the combination of XL-MS with peptide quantitation techniques is a powerful approach to delineate protein interface dynamics across diverse conditions. While ... More
An efficient and cost-effective purification protocol for Staphylococcus aureus Cas9 nuclease.
Authors:Teng ACT,Tavassoli M,Shrestha S,Marks RM,McFadden MJ,Evagelou SL,Lindsay K,Vandenbelt A,Li W,Ivakine E,Cohn R,Santerre JP,Gramolini AO
Journal:STAR protocols
PubMed ID:36574341
Here, we describe a protocol for purifying functional clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-associated protein 9 (Cas9) from Staphylococcus aureus within 24 h and over 90% purity. SaCas9 purification begins with immobilized metal affinity chromatography, followed by cation exchange chromatography, and ended with centrifugal concentrators. The simplicity, cost-effectiveness, and reproducibility ... More
p53 is active in murine stem cells and alters the transcriptome in a manner that is reminiscent of mutant p53.
Authors:Yan H, Solozobova V, Zhang P, Armant O, Kuehl B, Brenner-Weiss G, Blattner C
Journal:
PubMed ID:25719246
Since it was found that p53 is highly expressed in murine embryonic stem cells, it remained a mystery whether p53 is active in this cell type. We show that a significant part of p53 is localised in the nucleus of murine embryonic stem cells and that the majority of this ... More