Kit de TIV couplée humaine 1-Step - ADN

Les kits d’expression protéique humaine in vitro en 1 étape Thermo Scientific permettent la traduction et la modification post-transcriptionnelle de protéines de pleine longueur à partir de modèles d’ARNm ou de plasmide avec des rendements allant jusqu’à 100 µg/ml par réaction.

Les kits IVT pour humains sont des systèmes uniques d’expression protéique à base de lysat cellulaire HeLa pour la traduction in vitro ou les réactions couplées de transcription / traduction. L’expression protéique est effectuée dans une réaction simple de 90 minutes qui peut être prolongée jusqu’à 6 heures avec une production protéique continue jusqu’à 100 µg/ml lorsqu’elle est associée au vecteur d’expression pT7CFE1 optimisé. Les kits IVT pour humains peuvent exprimer des enzymes fonctionnelles, des phosphoprotéines, des glycoprotéines et des protéines membranaires afin d’être utilisé immédiatement dans l’étude des interactions protéiques, l’analyse mutationnelle rapide et l’activité de mesure.

Caractéristiques du kit IVT couplé pour humain en 1 étape :

• Fonctionnel— Utilisation de la machine traductionnelles humaine pour exprimer les protéines actives
• Pratique— Transcription et traduction en une seule étape
• Hautes performances— Rendement supérieur à la traduction in vitro des réticulocytes de lapin
•Fiable— Protéines express échouant dans les systèmes réticulocytaires de lapin

Supérieur aux méthodes traditionnelles :
• Les extraits HeLa sans cellules sont capables d’exprimer des protéines avec des modifications post-traductionnelles
• Une traduction précise offre une protéine pleine longueur compatible avec les applications en aval
• La traduction des protéines est optimisée avec l’élément EMCV IRES et d’autres éléments de stabilisation de l’ARNm

Comprend :
• Les kits complets contiennent du lysat cellulaire HeLa, des protéines accessoires, du reaction mix, de l’eau exempte de nucléase, un vecteur d’expression et un vecteur de contrôle positif GFP

Nécessite :
• Incubateur bain-marie à 30°C

Applications :
• Protéines express pour mesurer l’activité enzymatique
• Capable d’effectuer une analyse mutationnelle
• Protéines express à utiliser lors d’essais de déplacement de mobilité de gel
• Capable d’effectuer des co-immunoprécipitations
• Protéines cytotoxiques express
• Capable d’effectuer un marquage d’acides aminés non naturels

Le kit IVT couplé pour humain en 1 étape pour ADN est un système sans cellules utilisant la machine de transcription et de traduction cellulaire à partir d’une lignée cellulaire modifiée de type HeLa. La procédure est rapide et facile et constitue une alternative efficace aux autres méthodes d’expression des protéines. Il suffit d’ajouter une cassette d’expression appropriée à un mélange de lysats cellulaires HeLa, de protéines accessoires, de Reaction Mix et d’incuber à 30°C pendant une durée allant de 90 minutes à une nuit.

Le kit IVT humain en 1 étape pour ARNm utilise également la machine de traduction des protéines humaines afin de produire des protéines fonctionnelles. Ce kit est recommandé pour traduire des transcriptions d’ARNm contenant un élément EMCV IRES et des fonctions de stabilisation d’ARNm conçues dans le vecteur d’expression pT7CFE1.

Le système de traduction in vitro humain est robuste et permet d’exporter des protéines provenant de différentes espèces, notamment des mammifères, des bactéries et des protozoaires. L’analyse comparative montre que les niveaux d’expression des protéines fonctionnelles telles que la luciférase sont beaucoup plus élevés dans le système humain que dans les systèmes à base de réticulocytes de lapin ou d’E. coli. Par ailleurs, les protéines exprimées avec le système de traduction in vitro ne sont pas contaminées par des substances susceptibles d’interférer avec les applications en aval.

Plus de données sur le produit
• Protocole d’expression protéique in vitro à l’aide de modèles d’ARNm
• Notes d’appliction de biologie des protéines