La DNase I Thermo Scientific élimine l’ADN indésirable des lysats cellulaires afin d’améliorer l’efficacité de l’extraction des protéines.
Caractéristiques de la DNase I Thermo Scientific :
• Dégrade et élimine l’ADN indésirable des échantillons
• Clive l’ADN simple brin et double brin
• Compatible avec les réactifs de lyse cellulaire Thermo Scientific Pierce
• Réduit la viscosité des lysats bactériens (extraits protéiques) pour faciliter le pipetage
La désoxyribonucléase I (DNase I) est un polypeptide glycosylé unique qui dégrade l’ADN simple et double brin indésirable. L’enzyme fonctionne en clivant l’ADN en fragments 5' phosphodinucléotides et en petits fragments oligonucléotidiques. La DNase I est communément ajoutée aux réactifs de lyse cellulaire afin d’éliminer la viscosité due au contenu en ADN des lysats cellulaires bactériens ou d’éliminer les matrices d’ADN des ARN produits par transcription
in vitro. Cette qualité de DNase est suffisante pour le travail sur les protéines. Utilisez la DNase exempte de RNase pour toute application nécessitant la digestion de l’ADN dans laquelle il est essentiel d’éviter d’endommager l’ARN.
Informations générales sur l’utilisation de la DNase I :
• Les ions calcium sont requis pour l’activité de la DNAse I. Des quantités de traces de Ca++ peuvent être présentes à une concentration suffisamment élevée pour que la DNase I soit active ; en revanche, l’utilisation d’EGTA ou de tampons exempts de calcium peut réduire l’activité de la DNase I à des taux indétectables.
• Des taux élevés (100 mM) d’ions monovalents tels que Na+ et K+ diminueront l’activité de la DNase I
• La DNase I est inactivée par chauffage à 65°C pendant 10 minutes
• Unité Kunitz : 1 unité Kunitz est la quantité d’enzyme nécessaire pour provoquer une augmentation de 0,001 à 260 nm / min / ml à 25°C dans 0,1 M de NaOAc, à pH 5,0, en raison de la dégradation d’ADN fortement polymérisé.
• Unités d’analyse de dégradation : 1 unité est définie comme la quantité d’enzyme nécessaire pour dégrader complètement 1 µg d’ADN plasmide en 10 minutes à 37°C dans 10 mM de Tris·HCl à pH 7,5, 50 mM de MgCl
2, 13 mM de CaCl
2.
Spécifications :
• Quantité : 0,5 ml
• Concentration : ≥ 2 500 unités / ml
• Définition de l’unité : 1 unité est définie comme la quantité d’enzyme requise pour produire une augmentation de l’absorbance à 260 nm de 0,001 / min / ml à 25°C pour de l’ADN fortement polymérisé.
• Aspect visuel : Liquide transparent et incolore, exempt de matières insolubles
• Formulation : DNase I dans 10 mM de Tris-HCl à pH 7,5, 10 mM de CaCl
2, 10 mM de MgCl
2Produits associésSolution de DNase I (1 unité / µl), exempte de RNaseUsage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.