Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit
Invitrogen™

Amplex™ Red Glutamic Acid/Glutamate Oxidase Assay Kit

Le kit de dosage d’acide glutamique et de la glutamate oxydase Amplex™ Red permet de détecter de façon simple etAfficher plus
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RéférenceQuantité
A12221200 dosages
Référence A12221
Prix (EUR)
648,00
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Quantité:
200 dosages
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Le kit de dosage d’acide glutamique et de la glutamate oxydase Amplex™ Red permet de détecter de façon simple et efficace l’activité de l’acide glutamique / de la glutamate oxydase à l’aide d’un lecteur de microplaques fluorescent ou d’un fluoromètre.

Consultez notre gamme complète de dosages de microplaques à fluorescence

• Détectez des concentrations d’acide L-glutamique à partir de 10 nM ou 40 µU/ml d’oxydase de L-glutamate purifiée
• Permet des mesures à différents points dans le temps
• Conçu pour une interférence d’autofluorescence minimale

Le kit d’essai d’acide glutamique / glutamate rouge Amplex™ fournit une méthode ultrasensible pour détecter l’acide glutamique ou pour surveiller en continu l’activité de la glutamate oxydase à l’aide d’un lecteur de microplaques à fluorescence ou d’un fluoromètre. Avec le dosage, l’acide L-glutamique est oxydé par la glutamate oxydase pour produire du α-cétoglutarate, du NH3 et du peroxyde d’hydrogène. La L-alanine et la transaminase de L-glutamate–pyruvate sont incluses dans la réaction de régénération de l’acide L-glutamique par transamination du α-cétoglutarate, ce qui provoque plusieurs cycles de la réaction initiale et une amplification significative du peroxyde d’hydrogène produit. Le peroxyde d’hydrogène réagit avec la 10-acétyl-3,7-dihydroxyphénoxazine (réactif Amplex™ Red) dans un rapport stœchiométrique de 1:1 dans une réaction catalysée par la peroxydase de raifort (HRP) pour générer la résorufine du produit hautement fluorescent.

Étant donné que la résorufine possède des maxima d’absorption et d’émission de fluorescence d’environ 571 nm et 585 nm, respectivement, il y a peu d’interférences dues à l’autofluorescence dans la plupart des échantillons biologiques.

Utilisation des dosages Amplex™ Red pour une gamme étendue d’enquêtes
Une grande variété de dosages Amplex™ Red validés sont disponibles pour l’étude de la signalisation cellulaire et des lipides, de la neurobiologie, de l’inflammation et de la fonction immunitaire, et du métabolisme. Nous proposons également un réactif Amplex™ UltraRed (No de catalogue A36006), un réactif de deuxième génération caractérisé par une plus grande sensibilité et une fluorescence plus brillante, ainsi que le réactif d’arrêt Amplex™ Red/UltraRed Stop ( No de catalogue A33855). Parce qu’il permet de terminer la réaction générant le signal de fluorescence à un moment défini par l’utilisateur, le réactif Amplex™ Red/UltraRed Stop est synonyme de practicité et de contrôle. Une fois le réactif d’arrêt ajouté, le signal de fluorescence reste stable pendant au moins trois heures. Une conception et un emballage de matrice de dosage personnalisés sont également disponibles.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Méthode de détectionFluorescence
Type de colorantAutre(s) étiquette(s) ou colorant(s)
FormatPlaque 96 puits
Quantité200 dosages
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
À utiliser avec (application)Dosage de l’acide glutamique/glutamate-oxydase
À utiliser avec (équipement)Fluorimètre, Lecteur de microplaques
Gamme de produitsAmplex
Type de produitKit de dosage d’acide glutamique/glutamate oxydase rouge
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Stocker au congélateur (entre -5°C et -30°C) à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I'm using an Amplex Red kit, the reagent changes color to pink almost immediately in my own Krebs-Ringer buffer but not in HBSS. Why is this?

The components of Krebs-Ringer buffer (salts) should not cause oxidation of the Amplex reagent (which, in the presence of peroxidase and H2O2 oxidizes to resorufin, which is pink in color and fluorescent). Try water alone (the water used to make the Krebs-Ringer buffer). Since Hank's Buffered Saline Solution is typically purchased rather than made in the lab, it likely would not have the same contaminant. Another option is to degas the buffer prior to use to removed dissolved oxygen radicals.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can Amplex Red Assays be performed using cell lysates?

This is not recommended. The presence of endogenous proteases can complicate the assay by degrading the horseradish peroxidase (HRP). Endogenous peroxidases and antioxidants can modify the H2O2 required for the reaction, competing with HRP (and catalase) for the substrate.

The Amplex Red Assays are best performed with either purified enzymes or extracted H2O2 in a defined buffer system, extracellular solutions or body fluids (media, serum, etc.) that do not exhibit high levels of endogenous protease or oxidase activity and do not contain antioxidants.

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Citations et références (13)

Citations et références
Abstract
Glutamate excitotoxicity is involved in cell death caused by tributyltin in cultured rat cortical neurons.
Authors:Nakatsu Y, Kotake Y, Komasaka K, Hakozaki H, Taguchi R, Kume T, Akaike A, Ohta S,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16207939
'Tributyltin, an endocrine-disrupting chemical, has been used as a heat stabilizer, agricultural pesticide, and component of antifouling paints. In this study, the neurotoxicity of tributyltin was investigated in cultured rat cortical neurons. Tributyltin caused marked time- and dose-dependent increases in the number of trypan blue-stained cells. Measurement of extracellular glutamate ... More
Iron alters glutamate secretion by regulating cytosolic aconitase activity.
Authors:McGahan MC, Harned J, Mukunnemkeril M, Goralska M, Fleisher L, Ferrell JB
Journal:Am J Physiol Cell Physiol
PubMed ID:15613494
'Glutamate has many important physiological functions, including its role as a neurotransmitter in the retina and the central nervous system. We have made the novel observations that retinal pigment epithelial cells underlying and intimately interacting with the retina secrete glutamate and that this secretion is significantly affected by iron. In ... More
Bispecific small molecule-antibody conjugate targeting prostate cancer.
Authors:Kim CH, Axup JY, Lawson BR, Yun H, Tardif V, Choi SH, Zhou Q, Dubrovska A, Biroc SL, Marsden R, Pinstaff J, Smider VV, Schultz PG,
Journal:
PubMed ID:24127589
'Bispecific antibodies, which simultaneously target CD3 on T cells and tumor-associated antigens to recruit cytotoxic T cells to cancer cells, are a promising new approach to the treatment of hormone-refractory prostate cancer. Here we report a site-specific, semisynthetic method for the production of bispecific antibody-like therapeutics in which a derivative ... More
Single cell glutamate analysis in Aplysia sensory neurons.
Authors:Drake TJ, Jezzini S, Lovell P, Moroz LL, Tan W
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:15848241
'Glutamate is the major excitatory neurotransmitter in the central nervous system. However, techniques and assays available for the determination and detection of glutamate are limited. Here we have applied an effective glutamate assay toward the high-throughput analysis of single neurons. Initial physiological studies and recent immunohistochemical data strongly suggested that ... More
P2X agonist BzATP interferes with amplex-red-coupled fluorescence assays.
Authors:León D, Marín-García P, Sánchez-Nogueiro J, de la O FO, García-Carmona F, Miras-Portugal MT,
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:17562321
'This paper does not have an abstract.'