Kits de marquage fluorescent des protéines
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Kits de marquage fluorescent des protéines

Formez des conjugués colorant-protéine stables à travers le spectre avec l’un de nos 16 kits de marquage de protéines disponibles pour une utilisation dans diverses applications de microscopie par fluorescence, y compris la cytométrie en flux, l’IHC/IF/ICC, la FISH et l’analyse à haute densité.
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RéférenceMarqueur ou colorant
A20173Alexa Fluor 647
A10170Alexa Fluor 350
A10235Alexa Fluor 488
A10236Alexa Fluor 532
A10237Alexa Fluor 546
A20174Alexa Fluor 555
A10238Alexa Fluor 568
A10239Alexa Fluor 594
A20170Alexa Fluor 633
A20171Alexa Fluor 660
A20172
également connu sous le numéro A-20172
Alexa Fluor 680
F10240FITC (fluorescéine)
O10241
également connu sous le numéro O-10241
Oregon Green 488
P30012Pacific Blue
D20655Biotine (DSB-X)
Référence A20173
Prix (EUR)
900,00
Each
Marqueur ou colorant:
Alexa Fluor 647
Prix (EUR)
900,00
Each
Prêts à l’emploi en seulement 90 minutes, nos kits de marquage des protéines comprennent une colonne de centrifugation pré-emballée facile à utiliser pour éliminer les colorants libres et pour une récupération type supérieure à 85 %. Chaque kit contient suffisamment de réactifs pour 3 à 5 réactions de conjugaison de protéines. Nos kits fournissent de meilleurs résultats en raison d’une fluorescence de fond plus faible, d’une liaison non spécifique moindre et de flux de travaux plus faciles pour la conjugaison des protéines avec 16 fluorophores différents.

• Marquez par fluorescence jusqu’à 1 mg de protéines par réaction (trois réactions par kit)
• Marquez 0,5 à 3 mg par réaction avec le kit de marquage de protéines biotine DSB-X (cinq réactions par kit)
• Protéines marquées prêtes à l’emploi en 90 minutes (temps de manipulation ∼15 min)
• Purifiez rapidement les protéines en éliminant rapidement le colorant non lié à l’aide de colonnes de centrifugation pré-emballées pour une récupération > 85 %
• Comprend des instructions détaillées pour déterminer le degré de marquage

Chaque kit de marquage des protéines contient tout ce dont vous avez besoin pour effectuer 3 à 5 réactions de marquage distinctes et purifier les conjugués qui en résultent. Le colorant réactif est soit un ester de succinimidyle (SE), soit un ester de tétrafluorophényle (TFP) qui réagit efficacement avec les amines primaires des protéines pour former des conjugués protéiques stables de colorant. Chacun des flacons de colorant réactif fournis dans le kit est suffisant pour le marquage de 1 mg d’une variété de protéines purifiées, y compris les facteurs de croissance, les cytokines, les nanocorps, les enzymes, les molécules d’adhérence cellulaire et les anticorps.

Le marquage direct avec des fluorophores permet d’utiliser plusieurs anticorps primaires du même isotype (dérivés de la même espèce) dans la même expérience. Les protéines de stabilisation telles que la BSA doivent être retirées de l’échantillon avant le marquage.

Les différents kits de marquage des protéines
Beu fluorescent Alexa Fluor 350 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 346/442 nm
Vert fluorescent Alexa Fluor 488 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 494/519 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser à l’argon de 488 nm et détecté sous filtres standard FITC/Cy2
Jaune fluorescent Alexa Fluor 532 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 530/554 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Nd:YAG de 532 nm et détecté sous filtres standard Rhodamine 6G
Orange fluorescent Alexa Fluor 546 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 554/570 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser He-Ne de 543 nm et détecté sous filtres standard TRITC/Cy3
Orange fluorescent Alexa Fluor 555 :valeurs maximales d’excitation et d’émission de 555/565 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser He-Ne de 543 nm et détecté sous filtres standard TRITC/Cy3
Orange rouge fluorescent Alexa Fluor 568 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 577/603 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr de 568 nm et détecté sous filtres standard Rhodamine Red/Cy3,5
Rouge fluorescent Alexa Fluor 594 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 590/617 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr ou He-Ne de 594 nm et détecté sous filtres standard Texas Red
Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 633 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 632/647 nm
Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 647 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 650/668 nm ; excité à l’aide d’une ligne laser Kr ou He-Ne de 633 ou 635 nm et détecté sous filtres standard APC/Cy5.
Rouge lointain fluorescent Alexa Fluor 660 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 663/690 nm
IR proche fluorescent Alexa Fluor 680 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 680/700 nm
Vert fluorescent Fluorescéine-EX : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 494/518 nm
Oregon Green 488 : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 496/524 nm
Pacific Blue : colorant excité par le violet avec des valeurs maximales d’excitation et d’émission de 410/455 nm
Texas Red-X : valeurs maximales d’excitation et d’émission de 595/615 nm
Biotine DSB-X : les conjugués peuvent être liés de façon réversible à des protéines de liaison à la biotine telles que la streptavidine ou l’avidine. La concentration (mg/ml) de la préparation d’anticorps marqués à la biotine DSB-X peut être déterminée en mesurant l’absorbance de l’échantillon dialysé à 280 nm et en divisant cette valeur par 1,3 ou 1,4 lorsqu’elle est mesurée en solution dans une cuve avec une longueur de trajet optique de 1 cm. La biotine DSB-X n’absorbe pas de manière significative à 280 nm.

Pour le marquage de plus petites quantités d’anticorps (∼100 µg), nous recommandons nos kits de marquage d’anticorps. Veuillez consulter le manuel de l’utilisateur du kit de marquage des protéines pour plus d’informations sur les protocoles, les poids moléculaires et le degré de marquage de chaque colorant.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
CouleurFar-Red
Méthode de détectionFluorescence
Excitation / émission650/668
Type d’étiquetteColorants Alexa Fluor
Méthode d’étiquetageBasé sur la conjugaison, Basé sur la conjugaison
Balance d’étiquetage1 mg, 1 mg
Gamme de produitsAlexa Fluor
Type de produitKit de marquage des protéines
Quantité1 kit
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Réactivité chimiqueAmine
Labeling TargetAnticorps, Protéines
Marqueur ou colorantAlexa Fluor 647
SolubilitéDMSO (diméthylsulfoxyde)
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conserver au réfrigérateur à 2°C à 8°C et à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

Can I use 50 μg of protein with Fluorescent Protein Labeling Kits?

No. We recommend using 1 mg of protein with Fluorescent Protein Labeling Kits. For smaller protein sample sizes, we recommend using Microscale Protein Labeling kits which are optimized for 20-100 µg of protein.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What formulation of antibody should I use for conjugation for small animal in vivo imaging?

To allow for good reaction kinetics, antibodies should be in PBS buffer at a concentration of 0.5-3.0 mg/ml. The antibody must be free of preservatives (azide etc.), amine containing buffers and carrier proteins such as BSA.

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What is degree of labeling (DOL)?

Degree of labeling (DOL) describes the number of fluorophores per antibody. For in vivo labeling experiments, the DOL is restricted to a narrow range because it has significant consequences for the biodistribution and clearance of the probe. For example, for in vivo imaging, we have determined that the DOL range for the far-red Alexa Fluor dyes is 1.5 to 3 molecules per antibody for optimal optical in vivo imaging.

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Citations et références (18)

Citations et références
Abstract
CD8 T cell competition for dendritic cells in vivo is an early event in activation.
Authors:Willis RA, Kappler JW, Marrack PC
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16880405
'T cell responses against an antigen are often focused on a small fraction of potentially immunogenic determinants, a phenomenon known as immunodominance. Immunodominance can be established at several stages of antigen presentation, including antigen processing, binding of peptides to MHC, and competition between T cells for dendritic cells (DCs). The ... More
Activation-induced deaminase cloning, localization, and protein extraction from young VH-mutant rabbit appendix.
Authors:Yang G, Obiakor H, Sinha RK, Newman BA, Hood BL, Conrads TP, Veenstra TD, Mage RG
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:16280388
'Studies in mouse, human, and chicken suggest that activation-induced deaminase (AID) is involved in three known processes leading to antibody diversification: somatic hypermutation, gene conversion, and class-switch recombination. Developing rabbit appendix provides a particularly good site for studying all three of these B cell maturation events. We report here successful ... More
Optimizing a waveguide-based sandwich immunoassay for tumor biomarkers: evaluating fluorescent labels and functional surfaces.
Authors:Mukundan H, Xie H, Anderson AS, Grace WK, Shively JE, Swanson BI,
Journal:Bioconjug Chem
PubMed ID:19173652
'The sensor team at the Los Alamos National Laboratory has developed a waveguide-based optical biosensor for the detection of biomarkers associated with disease. We have previously demonstrated the application of this technology to the sensitive detection of carcinoembryonic antigen in serum and nipple aspirate fluid from breast cancer patients. In ... More
Allergic airways disease develops after an increase in allergen capture and processing in the airway mucosa.
Authors:von Garnier C, Wikstrom ME, Zosky G, Turner DJ, Sly PD, Smith M, Thomas JA, Judd SR, Strickland DH, Holt PG, Stumbles PA,
Journal:J Immunol
PubMed ID:17947647
'Airway mucosal dendritic cells (AMDC) and other airway APCs continuously sample inhaled Ags and regulate the nature of any resulting T cell-mediated immune response. Although immunity develops to harmful pathogens, tolerance arises to nonpathogenic Ags in healthy individuals. This homeostasis is thought to be disrupted in allergic respiratory disorders such ... More
VHH antibody targeting the chemokine receptor CX3CR1 inhibits progression of atherosclerosis.
Authors:Low S, Wu H, Jerath K, Tibolla A, Fogal B, Conrad R, MacDougall M, Kerr S, Berger V, Dave R, Villalona J, Pantages L, Ahlberg J, Li H, Van Hoorick D, Ververken C, Broadwater J, Waterman A, Singh S, Kroe-Barrett R
Journal:
PubMed ID:31924119
'CX3CR1 has been identified as a highly attractive target for several therapeutic interventions. Despite this potential, no potent antagonists, either small molecule or monoclonal antibody, have been identified. Here we describe the lead finding and engineering approach that lead to the identification of BI 655088, a potent biotherapeutic antagonist to ... More