DSP Pierce™, format No-Weigh™

Le DSP Thermo Scientific Pierce (réactif de Lomant) est un agent de réticulation d’ester N-hydroxysuccinide homo-bifunctionnel (ester NHS) insoluble dans l’eau, qui est clivable au thiol, réactif aux amines primaires et utile pour de nombreuses applications. Le DSP contient un ester NHS réactif aux amines à chaque extrémité d’un bras espaceur 8 carbones. Les esters NHS réagissent aux amines primaires à un pH de 7 à 9 pour former des liaisons amides stables tout en libérant le groupe N-hydroxysulfosuccinimide. Les protéines, y compris les anticorps, ont généralement plusieurs amines primaires dans la chaîne latérale des résidus lysine (K) et l’extrémité N-terminale de chaque polypeptide qui sont disponibles comme cibles pour les réactifs de réticulation ester NHS. Le DSP est non sulfoné et insoluble dans l’eau, il doit donc d’abord être dissous dans un solvant organique, puis ajouté au mélange de réaction aqueuse. Dans la mesure où le DSP ne possède pas de groupe chargé, il est lipophile et perméable à la membrane. Il est donc utile pour les conjugaisons intracellulaires et intramembranaires. Un analogue sulfoné du DSP (DTTSP) est hydrosoluble. Le DSS, l’analogue non clivable de l’agent de réticulation DSP, est également disponible pour les applications nécessitant un bras espaceur stable qui ne peut pas être clivé en présence d’agents réducteurs.

Les produits Thermo Scientific au format No-Weigh sont des réactifs spéciaux fournis dans un format pré-aliquoté. L’emballage pré-pesé évite la perte de réactivité et de contamination des réactifs au fil du temps en évitant l’ouverture et la fermeture répétitives du flacon. Le format permet l’utilisation d’un nouveau flacon de réactif à chaque fois, ce qui élimine les tracas de la pesée de petites quantités de réactifs et réduit les préoccupations quant à la stabilité du réactif.

Le DSP contient un ester N-hydroxysuccinimide (NHS) réactif aux amines à chaque extrémité d’un bras espaceur 8 carbones. Les esters NHS réagissent aux amines primaires à un pH de 7 à 9 pour former des liaisons amides stables tout en libérant le groupe N-hydroxy-succinimide. Les protéines, y compris les anticorps, ont généralement plusieurs amines primaires dans la chaîne latérale des résidus lysine (K) et l’extrémité N-terminale de chaque polypeptide qui sont disponibles comme cibles pour les réactifs de réticulation ester NHS. Le DSS, l’analogue non clivable de l’agent de réticulation DSP, est également disponible pour les applications nécessitant un bras espaceur stable qui ne peut pas être clivé en présence d’agents réducteurs.

Caractéristiques du réactif de Lomant :

• Groupes réactifs : Ester NHS (les deux extrémités)
• Réactif vers : groupes amino (amines primaires)
• L’ester NHS réactif aux amines réagit rapidement à n’importe quelle molécule contenant des amines primaires
• La liaison disulfure dans le bras espaceur est facilement clivée par 10-50 mM DTT ou TCEP à un pH de 8,5
• Le bras espaceur est également clivable dans un tampon de chargement d’échantillons SDS-PAGE réducteur
• L’agent de réticulation clivable permet de séparer les produits réticulés
• Insoluble dans l’eau (dissoudre d’abord dans le DMF ou le DMSO) ; à comparer au DTSSP (Sulfo-DSP)
• Perméable à la membrane, permettant une réticulation intracellulaire

Applications :
• Réticulation chimique des protéines intracellulaires avant la lyse cellulaire et l’immunoprécipitation
• Fixez les interactions protéiques pour permettre l’identification des interactions fiables ou transitoires des protéines
• Fixez les tissus pour une immunocoloration sans endommager l’ARN
• Procédez à une réticulation protéique pour créer des bioconjugués par le biais de réactions à étape unique
• Immobilisez des protéines sur des surfaces recouvertes d’amines

Propriétés de DSP
• Autres dénominations : Réactif de Lomant, DTSP
• Formule moléculaire : C₁₄H₁₆N₂O₈S₂
• Poids moléculaire : 404,42
• Longueur du bras espaceur : 12,0 Å (8 atomes)
• Numéro CAS : 57757-57--0
• Groupes de réactifs : Esters NHS, réaction aux amines primaires avec un pH entre 7,0 et 9,0

Spécifications du DSP :
nous fabriquons le DSP selon les spécifications les plus élevées pour produire les bioconjugués les plus spécifiques, assurer l’intégrité de vos données et vous fournir le plus haut degré d’homogénéité. Chaque lot de DSP est testé pour remplir les conditions minimales suivantes :
• Identité : Le balayage IR montre uniquement des pics caractéristiques de la structure et des groupes fonctionnels du DSP
• Pureté : > 95 % par RMN quantitative (la norme la plus élevée pour la pureté des agents de réticulation)

Références du produit
Guide d’application des agents de réticulation -- recherchez les références bibliographiques récentes pour ce produit