Les nucléotides dUTP, OBEA-dCTP et UTP marqués au ChromaTide™ Molecular Probes™ peuvent être utilisés pour synthétiser des sondes d’ADN marquées sans avoir besoin de nucléotides marqués avec des radioisotopes dangereux et coûteux. Ces nucléotides peuvent être incorporés à l’aide de techniques de biologie moléculaire standard ; les sondes marquées peuvent ensuite être utilisées dans le cadre de protocoles d’hybridation in situ, de microarray ou de transfert. Les nucléotides marqués au colorant ChromaTide™ sont disponibles en différentes couleurs de fluorescence pour faciliter l’analyse multicolore.

Spécifications des nucléotides marqués au ChromaTide™ :
• Ex / Em du colorant : Alexa Fluor™ 488-5-UTP (490 / 520 nm)
• Longueur du liant alkynylamino : 5 atomes

Méthodes pour incorporer les nucléotides ChromaTide™ dans les sondes
• Traduction de coupure
• Marquage aléatoire des amorces
• Marquage de l’extrémité avec une désoxyribonucléotidyl transférase terminale
• Transcription inverse
• Amplification par PCR

Voir Méthodes pour incorporation enzymatique des dUTP ChromaTide™ pour prendre connaissance des directives spécifiques à chaque méthode.

Les colorants fluorescents Alexa Fluor™ et BODIPY™ constituent d’excellentes sondes
Les sondes fabriquées avec des nucléotides marqués peuvent être utilisées pour des techniques multicolores telles que l’hybridation in situ et les puces d’hybridation. Nos conjugués colorants exclusifs BODIPY™ et Alexa Fluor™ sont exceptionnellement brillants et photostables et fondamentalement insensibles au pH. Le profil d’émission étroit des colorants BODIPY™ permet d’assurer un chevauchement spectral minimal. Les colorants Alexa Fluor™ sont hautement solubles dans l’eau, tout comme les sondes d’ADN qui en résultent, ce qui en fait des marqueurs de choix pour la fluorescence dans le cadre d’une hybridation in situ.

Les liants longs améliorent les performances
Les nucléotides dUTP et UTP ChromaTide™ sont modifiés en position C-5 de l’uridine grâce à un liant alkynylamino unique qui fournit un bras espaceur entre le nucléotide et le colorant afin de réduire les interactions entre eux. Le chiffre associé au nom du produit, par exemple, le “12” dans fluorescéine-12-dUTP, indique la longueur nette du bras espaceur, en atomes. Ces bras espaceurs permettent d’obtenir des conjugués plus brillants et une accessibilité accrue aux haptènes pour les réactifs de détection secondaires.

Pour une liste complète de nos réactifs ChromaTide™ : Nucléotides marqués au Molecular Probes ChromaTide™ et au aha — Tableau 8.5.
Pour plus d’informations sur ces réactifs de marquage, consultez le paragraphe Marquage des oligonucléotides et des acides nucléiques — section 8.2 du manuel Molecular Probes™.

Usage exclusivement réservé à la recherche. Non utilisé à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.