Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 10,000 MW, Lysine Fixable (mini-Ruby)
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Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 10,000 MW, Lysine Fixable (mini-Ruby)

Les dextranes marqués sont des polysaccharides hydrophiles qui sont le plus couramment utilisés dans des études de microscopie pour surveillerAfficher plus
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RéférenceQuantité
D331210 mg
Référence D3312
Prix (EUR)
790,00
Each
Quantité:
10 mg
Prix (EUR)
790,00
Each
Les dextranes marqués sont des polysaccharides hydrophiles qui sont le plus couramment utilisés dans des études de microscopie pour surveiller la division cellulaire, suivre le mouvement des cellules vivantes et établir des rapports sur les propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique. Le dextrane marqué est couramment introduit dans les cellules par micro-injection.

Besoin d’un spectre d’émission différent ou d’un suivi plus long ? Consultez nos autres produits de suivi de cellules de mammifères.

Spécifications du dextrane :

Marquage (Ex/Em) : Tétraméthylrhodamine & Biotine (555/580)
Taille : 10 000 MW
Charge : Anionique
Fixable : Fixable par lysine

Normes de fabrication strictes de Molecular Probes™ Dextranes
Nous proposons plus de 50 conjugués de dextrane fluorescents et biotinylés dans plusieurs gammes de poids moléculaire. Les dextranes sont des polysaccharides hydrophiles caractérisés par leur poids moléculaire de modéré à élevé, une bonne hydrosolubilité et une faible toxicité. Ils présentent également une faible immunogénicité. Les dextranes sont biologiquement inertes en raison de leurs liaisons poly-(α-D-1,6-glucose) peu communes, qui les rendent résistantes au clivage par la plupart des glycosidases cellulaires endogènes.

Dans la plupart des cas, les dextranes fluorescentes Molecular Probes™ sont beaucoup plus brillantes et ont une charge négative plus élevée que les dextranes disponibles auprès d’autres sources. De plus, nous utilisons des méthodes rigoureuses pour éliminer le plus de colorants non conjugués possible, puis doser nos conjugués de dextrane par chromatographie sur couche mince pour assurer l’absence de contaminants à faible poids moléculaire.

Une large sélection de substituants et de poids moléculaires
Les dextranes Molecular Probes™ sont conjugués à la biotine ou à une grande variété de fluorophores, dont sept de nos colorants Alexa Fluor™ (Conjugués de dextrane Molecular Probes–Tableau 14.4) et sont disponibles dans les poids moléculaires nominaux suivants (MW) : 3 000 ; 10 000 ; 40 000 ; 70 000 ; 500 000 ; et 2 000 000 daltons.

Charge nette et fixabilité du dextrane
Nous utilisons le couplage succinimidyle de nos colorants à la molécule de dextrane, ce qui, dans la plupart des cas, produit un dextrane neutre ou anionique. La réaction utilisée pour produire les dextranes Rhodamine Green™ et Alexa Fluor 488 génère un produit final neutre, anionique ou cationique. Les dextranes Alexa Fluor, Cascade Blue, jaune lucifer, fluorescéine et Oregon Green sont intrinsèquement anioniques, tandis que les dextranes marqués avec de la rhodamine B zwitterionique, de la tétraméthylrhodamine et du Texas Red™ sont essentiellement neutres. Pour produire des dextranes plus fortement anioniques, nous avons développé une procédure exclusive pour ajouter des groupes chargés négativement aux portoirs de dextranes ; ces produits sont désignés sous le terme de dextranes “polyanioniques” .

Certaines applications nécessitent que le traceur de dextrane soit traité avec du formaldéhyde ou du glutaraldéhyde pour une analyse ultérieure. Pour ces applications, nous offrons des versions “fixables par lysine” de la plupart de nos conjugués de dextranes de fluorophores ou de biotine. Ces dextranes possèdent des résidus de lysine liés de manière covalente qui permettent aux traceurs de dextrane d’être conjugués à des biomolécules environnantes par fixation médiée par aldéhyde pour détection subséquente par des techniques immunohistochimiques et ultrastructurelles. Nous avons également montré que tous nos conjugués de dextrane Alexa Fluor de 10 000 MW pouvaient être fixés avec des fixateurs à base d’aldéhyde.

Applications clés qui utilisent des dextranes marqués
Il existe une multitude de citations qui décrivent l’utilisation de dextranes marqués. Certaines des utilisations les plus courantes incluent :

Traçage neuronal (antérograde et rétrograde) dans les cellules vivantes
Traçage de lignées cellulaires dans les cellules vivantes
Traçage neuroanatomique
Examen des communications intercellulaires (par exemple, dans les jonctions lacunaires, pendant la cicatrisation des plaies, et pendant le développement embryonnaire)
Étude de la perméabilité vasculaire et de l’intégrité de la barrière hémato–encéphalique
Suivi de l’endocytose
Surveillance de l’acidification (certains conjugués de colorant–dextrane sont sensibles au pH)
Étude des propriétés hydrodynamiques de la matrice cytoplasmique

À des fins de recherche uniquement. Non destiné à des fins thérapeutiques ou diagnostiques humaines ou animales.
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
Spécifications
Marqueur ou colorantColorants classiques
Type de produitDextrane
Quantité10 mg
Conditions d’expéditionTempérature ambiante
Excitation/Emission555/580 nm
Gamme de produitsInvitrogen
Unit SizeEach
Contenu et stockage
Conservez au congélateur (entre -5 et -30°C) à l’abri de la lumière.

Foire aux questions (FAQ)

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

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I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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Citations et références (22)

Citations et références
Abstract
Versatile, high-resolution anterograde labeling of vagal efferent projections with dextran amines.
Authors:Walter GC, Phillips RJ, Baronowsky EA, Powley TL,
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:19056424
'None of the anterograde tracers used to label and investigate vagal preganglionic neurons projecting to the viscera has proved optimal for routine and extensive labeling of autonomic terminal fields. To identify an alternative tracer protocol, the present experiment evaluated whether dextran conjugates, which have produced superior results in the CNS, ... More
Astrocytes and microglial cells incorporate degenerating fibers following entorhinal lesion: a light, confocal, and electron microscopical study using a phagocytosis-dependent labeling technique.
Authors:Bechmann I, Nitsch R
Journal:Glia
PubMed ID:9179599
'Entorhinal lesion leads to anterograde degeneration of perforant path fibers in their main termination zone in the outer molecular layers of the dentate gyrus. Concomitantly, astrocytes become hypertrophic, and microglial cells alter their phenotype, suggesting participation in anterograde degeneration. This study analyzes the involvement of these lesion-induced activated glial cells ... More
Tracing of the entorhinal-hippocampal pathway in vitro.
Authors:Kluge A, Hailer NP, Horvath TL, Bechmann I, Nitsch R
Journal:Hippocampus
PubMed ID:9519887
'In vitro tract tracing allowing for continuous observation of the perforant path is a crucial prerequisite for experimental studies on the entorhinal-hippocampal interaction in an organotypic slice culture containing the entorhinal cortex, the perforant path, and the dentate gyrus (OEHSC). We prepared horizontal slices of the temporal entorhinal-hippocampal region of ... More
Persistent neuronal labeling by retrograde fluorescent tracers: a comparison between Fast Blue, Fluoro-Gold and various dextran conjugates.
Authors:Novikova L, Novikov L, Kellerth JO
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:9210570
'The permanence of retrograde neuronal labeling by the fluorescent tracers Fast Blue, Fluoro-Gold, Mini-Ruby, Fluoro-Ruby and Fluoro-Emerald was investigated in adult rat spinal motorneurons at 1, 4, 12 and 24 weeks after tracer application to a transected muscle nerve. After 1 week, the largest number of retrogradely labeled motoneurons was ... More
The use of Lucifer Yellow and Mini-Ruby for intracellular staining in fixed brain tissue: methodological considerations evaluated in rat and human autopsy brains.
Authors:Ohm TG, Diekmann S
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:7534362
The quality of intracellular filling of Mini-Ruby (MR) is comparable to that of Lucifer Yellow (LY) in both perfusion-fixed rat and immersion-fixed autopsy human tissue. In adult human brain, the use of MR avoids the co-conversion of the typical intracellular lipofuscin deposits as is invariably the case during the photoconversion ... More