Le fragment de Klenow Thermo Scientific, exo-, est le long fragment de l’ADN Polymérase I. Il présente une activité polymérase 5′ → 3′ sans l’activité exonucléase 3′ → 5′ et 5′ → 3′ de l’ADN Polymérase I. L’activité exonucléase 3’ → 5’ de l’enzyme est éliminée par des mutations dans le site actif d’exonucléase 3’ → 5’.

Points clés

• Sans activité exonucléase 3’ → 5’ 
• Incorpore des nucléotides modifiés (par ex., nucléotides marqués par Cy3, Cy5, de la fluorescéine-, de la rhodamine-, de l’aminoallyl ou de la biotine)
• Actif dans les tampons d’enzymes de restriction, de PCR et de RT

Applications
• Marquage aléatoire de l’ADN
• Marquage par remplissage en saillies de 5’ d’ADN double brin
• Amplification du déplacement des brins (SDA)
• Séquençage de l’ADN avec la méthode Sanger

Remarque

Le fragment de Klenow, exo-, n’est pas recommandé pour les réactions de troncature de l’ADN avant une ligature de l’ADN, car il ajoute souvent au moins un nucléotide supplémentaire à l’extrémité 3 des substrats d’ADN à extrémités tronquées indépendamment de la matrice.