Silica Bead DNA Gel Extraction Kit

Le kit d’extraction sur gel d’ADN sur billes de silice Thermo Scientific est un système simple et efficace d’extraction de l’ADN à partir de gels d’agarose et de mélanges réactifs. Le kit utilise le protocole modifié de Vogelstein et Gillespie, utilisant la solubilisation du gel d’agarose et l’adsorption sélective des acides nucléiques sur des particules de silice spécialement préparées à haute concentration de sel. Le lavage de ces particules liées à l’ADN les débarrasse d’éventuels contaminants et l’ADN pur est élué avec un tampon TE ou de l’eau.

Avec peu de manipulations, cette méthode s’avère plus rapide et plus simple à réaliser que d’autres méthodes d’extraction à base organique. Par rapport aux kits d’extraction sur gel basés sur des colonnes, le kit d’extraction de l’ADN sur gel offre une grande flexibilité pour augmenter ou réduire proportionnellement les volumes de réactif et d’élution. L’ADN purifié convient à toutes les procédures courantes de biologie moléculaire, y compris la digestion par restriction, le clonage, le séquençage, etc.

Points clés

• Flexible : mise à l’échelle facile des volumes de réaction et d’élution
• Performant : récupération de l’ADN supérieure à 80 %
• Rapide : la purification ne prend que 15 à 20 minutes
• Efficace : convient aux fragments d’ADN aussi courts que 100 bp
• Sûr : n’implique pas d’extraction au phénol

Applications

• Purification de fragments d’ADN à partir de gels d’agarose préparés avec des tampons TAE ou TBE
• Concentration d’échantillons d’ADN pour dessalage ou changement de tampon
• Élimination d’enzymes après les réactions de PCR, digestion par restriction, déphosphorylation ou marquage
• Élimination de nucléotides, d’amorces et d’amorces dimères non incorporées
• Élimination de liants après ligature
• Élimination de résidus de sels, phénol, chloroforme, ou bromure d’éthidium
• Purification d’ADN plasmidique sans ARN

Comprend : suspension de poudre de silice, tampon de liaison, tampon de lavage concentré, tampon de conversion de TBE, protocole détaillé

Remarque
Il convient de prendre soin d’éviter les dommages à l’ADN causés par la lumière UV lorsque le fragment d’ADN purifié sur gel sera ensuite utilisé dans des réactions de clonage. Toujours utiliser une lampe UV de grande longueur d’onde (360 nm) lors de l’excision de la bande de gel. Si la lampe UV disponible est de courte longueur d’onde (254 à 312 nm), réduire l’exposition aux rayons UV à quelques secondes ou conserver le gel sur une lame en verre ou en plastique. Sinon, des teintures visibles peuvent être incluses dans les gels d’agarose standards pour permettre de visualiser les bandes d’ADN à la lumière ambiante (2, 3).