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Applied Biosystems™

Arcturus™ RiboAmp™ PLUS Kit

Le kit d’amplification de l’ARN ARCTURUS™ RiboAmp™ PLUS permet au chercheur d’effectuer des analyses moléculaires sur des échantillons d’ARN précédemmentAfficher plus
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RéférenceQuantité
KIT050124 échantillons
Référence KIT0501
Prix (EUR)
3 920,00
Each
Quantité:
24 échantillons
Prix (EUR)
3 920,00
Each
Le kit d’amplification de l’ARN ARCTURUS™ RiboAmp™ PLUS permet au chercheur d’effectuer des analyses moléculaires sur des échantillons d’ARN précédemment considérés comme trop petits pour l’analyse par microarray. Le kit RiboAmp™ PLUS offre une amplification linéaire unique d’un minimum de 1 ng d’ARN total. Grâce à un processus exclusif pour une amplification linéaire haute efficacité et haute fidélité, l’ARN messager est amplifié jusqu’à 1 000 fois en un cycle de synthèse et jusqu’à 1 000 000 fois en deux cycles. Le kit RiboAmp™ PLUS produit de l’ARN antisens amplifié (ARNa), prêt à l’étiquetage et à l’hybridation microarray ou à la PCR en temps réel. Le kit RiboAmp Plus peut être utilisé pour générer des résultats biologiquement pertinents grâce aux plateformes de matrices d’ADNc et d’oligonucléotides. Nous proposons également des kits RiboAmp™ HS PLUS pour de plus petites quantités d’ARN.

Principales caractéristiques du produit :
• Haute fidélité – maintient des niveaux d’expression native
• Plus grande sensibilité – détecte l’ARNm à faible abondance
• Haute fiabilité – fournit l’ARN amplifié reproductible pour les expériences microarray
• Application rapide – traite les échantillons plus rapidement
• Spécificité améliorée – révèle des différences dans l’expression génétique entre les types de cellules

Maintient des niveaux d’expression native
Le kit d’amplification d’ARN RiboAmp™ PLUS offre une amplification d’ARN haute fidélité sans précédent, même à partir d’échantillons microscopiques. La comparaison des résultats microarray à partir d’ARN cellulaire total et d’ARNa amplifié à l’aide du kit RiboAmp™ PLUS révèle une très grande concordance entre les gènes exprimés différemment. Ceci démontre la capacité du kit RiboAmp™ PLUS à fournir la fidélité d’amplification nécessaire pour une analyse fiable des données à partir de petits échantillons.

Détection de l’ARNm à faible abondance
Le kit d’amplification d’ARN RiboAmp™ PLUS permet d’amplifier l’ARNm dans toutes les catégories d’abondance. Grâce à la RT-PCR, les gènes à abondance faible, moyenne et élevée sont facilement détectés au sein de la population d’ARN amplifié. L’amplification de l’ARNm dans toutes les catégories d’abondance garantit l’identification des modèles d’expression génétique différentielle.

Fournit de l’ARN amplifié reproductible pour les expériences Microarray
Le kit d’amplification d’ARN RiboAmp™ PLUS offre systématiquement des ARNa prêts pour l’étiquetage et l’hybridation pour les microarrays d’expression avec une variabilité minimale d’une amplification à une autre. L’analyse par microarray d’amplifications indépendantes à partir du même ARN source montre une excellente corrélation.

Traitement des échantillons plus rapides
Le kit RiboAmp™ PLUS comprend des réactifs et des dispositifs complets pour la synthèse de modèles, la transcription et la purification des acides nucléiques. Les concentrations sous vide fastidieuses sont complètement éliminées grâce à l’incorporation des chimies optimisées et à l’utilisation des nouvelles colonnes de purification à haut seuil de rétention MiraCol™ d’Arcturus. Le nombre d’étapes de pipetage diminue considérablement, car l’échantillon est élué directement dans les tubes de réaction et les réactifs sont pré-distribués et pré-mélangés de manière pratique. En une journée de travail de huit heures, le kit RiboAmp™ PLUS permet de mettre en place l’amplification, l’étiquetage et l’hybridation microarray. Grâce à une transcription in vitro pendant la nuit pratique, un deuxième cycle d’amplification peut être complété le matin suivant.

Révéler les différences d’expression génétique entre les types de cellules
L’analyse précise de l’expression génétique nécessite d’analyser des types de cellules spécifiques sans interférence avec les cellules environnantes. Commencer par ces populations de cellules pures signifie souvent travailler avec de petits échantillons. Des technologies spéciales sont nécessaires pour surmonter les difficultés liées à la manipulation de ces échantillons précieux. La combinaison de LCM, d’amplification d’ARN et d’analyse microarray révèle une expression génétique différentielle entre les types de cellules.

Systèmes intégrés pour la microgénomique
Le système complet Arcturus™ pour la microgénomique™ offre une solution intégrée pour préparer de petites quantités d’ARN pour l’analyse de l’expression génétique. Le système dispose de l’instrument de microdissection de capture laser (LCM) ArcturusXT™ pour obtenir des populations de cellules pures, du kit d’isolement d’ARN PicoPure™ pour extraire et purifier l’ARN et du kit RiboAmp™ PLUS pour l’amplification linéaire de l’ARN. Les systèmes Arcturus pour la microgénomique permettent d’obtenir des dosages de microarray précis et sensibles qui révèlent des molécules qui seraient autrement obscurcies dans des échantillons de tissus entiers ou des mélanges cellulaires.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spécifications
À utiliser avec (application)Microarray Analysis, Real-Time Quantitative PCR (qPCR)
À utiliser avec (équipement)ArcturusXT™ LCM Instrument
ComprendAmplification Purification Kit (Purification Reagents and Columns), cDNA Synthesis Kit, In vitro Transcription (IVT) Kit
Marqueur ou colorantUnlabeled
Gamme de produitsARCTURUS, RiboAmp
Quantité24 échantillons
Transcriptase inverseNot Included
Type d’échantillonAny Tissue Type, Cell Cultures, LCM Samples
TypePLUS Kit
Étape du flux de travailReverse Transcription, In Vitro Transcription, RNA Amplification
Unit SizeEach
Contenu et stockage
cDNA synthesis kit, in vitro transcription (IVT) kit, amplification purification kit (purification reagents and columns). Variable storage conditions

Foire aux questions (FAQ)

What is the typical size range of amplified RNA?

A single round of amplification yields product sizes ranging from 200 bases to 6 kb. The majority of these products are approximately 1.5 kb in length. A second round of amplification will result in shorter products. We recommend using an Agilent 2100 bioanalyzer to visualize these products. Amplification products can be visualized by agarose gel electrophoresis; they will migrate as a smear. Although this data is still useful, it is less informative than bioanalyzer analysis.

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Why is RNA amplification necessary?

Glass microarray analysis experiments typically require 5-20 µg of total RNA per slide for sample labeling and hybridization. Thus, microarray-based gene expression analysis of very small samples [laser capture microdissection (LCM), tissue biopsies, or other clinical samples] is difficult due to the very low amounts of total RNA recovered from the samples. Linear amplification of RNA from small samples produces sufficient quantities of RNA for sample labeling and hybridization. Since the amplification technique is highly reproducible and maintains representation of the gene expression in the original sample, it is recommended for probe synthesis by most manufacturers of commercially available microarrays.

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How is fold amplification calculated?

RNA amplification using the Van Gelder and Eberwine technique (Van Gelder 1990) utilizes an oligo(dT) primer containing the T7 RNA polymerase promoter for synthesis of first strand cDNA. The poly(A) tail at the end of mRNA sequences serves as the substrate for the binding of these primers. Since mRNA typically constitutes only 1-5% of the total RNA in the cell, only this fraction of the total RNA is amplified. The tissue type, its developmental state, and its health all influence the actual proportion of mRNA in a total RNA sample. Total RNA from brain, testes, and embryonic tissues may contain up to 4% mRNA, while RNA from many other tissues will have only 1% or less mRNA. The RNA isolation method can also influence mRNA content. The generally accepted average value for mRNA content is about 2% of a total RNA sample. When 1 µg of total RNA, 2% or 20 ng of which is mRNA, is amplified 1000-fold, yields of 20 µg aRNA (or cRNA) should be expected. You may observe higher fold amplification when starting with lower amounts of total RNA. This is because, in an in vitro transcription (IVT) reaction, a finite amount of RNA can be synthesized with the fixed amount of NTPs. When starting with less RNA, NTPs do not become limiting until the RNA is amplified beyond the typical 1000-2000 fold amplification levels seen with higher amounts of input RNA.

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How do I locate the overview image on the Arcturus XT LCM Instrument?

First, optimize the visualization of the image in the live video at 2X by increasing or decreasing the brightness setting, then right-click on the overview image and select "remember settings". This resets your optimized image settings, and when you select "re-acquire overview image" you will now generate a perfectly exposed overview image.

With the ArcturusXT LCM Instrument, which laser should I use to isolate my region of interest? UV cutting laser or IR capture laser?

For a few cells: The gentle IR-only approach is the best recommendation for preserving nucleic acids and verifying that the desired material is collected on the cap. For groups of cells or large tumor regions: Mount your tissue on a membrane slide and take advantage of the power of the IR, or IR + UV cutting laser to cut around your region of interest quickly and cleanly.