Reactivo de ensayo de proteínas Pierce™ de 660 nm

El reactivo de ensayo de proteínas Pierce de 660 nm es un reactivo listo para usar, compatible con detergentes y agentes reductores para medir rápidamente la concentración total de proteínas. El ensayo es más lineal que los ensayos de Bradford basados en Coomassie, es compatible con las concentraciones más altas de la mayoría de los detergentes y reduce los agentes y otros reactivos utilizados con más frecuencia.

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Las características del kit de ensayo de proteínas de 660 nm incluyen:
• Compatibilidad: funciona con una mayor gama de detergentes y agentes reductores que otros ensayos a base de colorantes
• Listo para su uso: reactivo único con un protocolo sencillo de mezcla y lectura; no es necesario preparar ningún reactivo de trabajo
• Linealidad: produce curvas patrón que son más lineales que las del método de ensayo Bradford
• Formato del ensayo: el ensayo puede realizarse en tubos de ensayo o microplacas
• Volumen de muestra: solo requiere10 µl para microplaca o 100 µl para los procedimientos de tubo de ensayo
• Almacenamiento: almacenar a temperatura ambiente

El accesorio para el reactivo de compatibilidad de detergente iónico (IDCR) ofrece una compatibilidad mucho más amplia con detergentes y lo convierte en el único ensayo de proteínas del mercado adecuado para muestras que contengan un tampón de muestra Laemmli SDS con azul de bromofenol. Aunque el ensayo de proteínas Pierce de 660 nm produce un nivel más alto de variación entre proteínas (37 %) que otros ensayos, como el ensayo de proteínas BCA, el formato de un solo reactivo más sencillo y una mayor compatibilidad de sustancias hacen que el ensayo Pierce de 660 nm sea más cómodo para muchas aplicaciones rutinarias. El ensayo de proteínas Pierce de 660 nm se puede realizar en un formato de tubo de ensayo o microplaca.

Cómo detecta la proteína el ensayo Pierce de 660 nm
El ensayo de proteína Pierce de 660 nm se basa en la unión de un complejo de metal colorante patentado a la proteína en condiciones ácidas que causan un cambio en la absorción máxima del tinte, que se mide a 660 nm. El complejo colorante-metal es de color marrón rojizo y cambia a verde al unirse a la proteína. El cambio de color se produce mediante la desprotonación del colorante a pH bajo, facilitada por interacciones con grupos de aminoácidos de las proteínas cargados positivamente. Por tanto, el colorante interacciona principalmente con los restos básicos de las proteínas, como histidina, arginina y lisina y, en menor medida, tirosina, triptófano y fenilalanina.

El color producido en el ensayo es estable y aumenta en proporción a una amplia gama de concentraciones crecientes de proteína, incluso en presencia de detergentes y agentes reductores que serían incompatibles con los ensayos de proteínas Bradford y BCA.

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