Fluo-4FF, AM, cell permeant - Special Packaging
Fluo-4FF, AM, cell permeant - Special Packaging
Citas y referencias (17)
Invitrogen™

Fluo-4FF, AM, cell permeant - Special Packaging

Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5NMás información
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Número de catálogoCantidad
F2398110 x 50 μg
Número de catálogo F23981
Precio (MXN)
-
Cantidad:
10 x 50 μg
Los indicadores de calcio marcados son moléculas que presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+. Fluo-5F, fluo-5N y fluo-4ff son análogos de fluo-4 con menor afinidad de unión de Ca2+, lo que los hace adecuados para detectar niveles intracelulares de calcio en el intervalo de 1 µM a 1 mM que saturarían la respuesta de fluo-3 y fluo-4. Las células se pueden cargar como éster AM de estos indicadores calcio mediante la adición del indicador disuelto directamente a las placas que contienen las células cultivadas. Estos indicadores son compatibles con la excitación a 488 nm mediante fuentes láser de iones de argón, lo que los hace útiles para aplicaciones de detección de microplacas, microscopía confocal y citometría de flujo.

Obtenga más información sobre los indicadores de iones, incluidos los indicadores de calcio, potasio, pH y potencial de membrana ›

Especificaciones del indicador de calcio (éster AM):
• Etiqueta (Ex/Em de forma unida a Ca2+): Fluo-4ff (494/516 nm)
• Aumento de la intensidad de fluorescencia al unirse con Ca2+: >100 veces
• Kd para Ca2+ en tampón: ∼9,7 µM
• Presentan un aumento de la fluorescencia al unirse a Ca2+ con poco cambio en la longitud de onda

Uso de TPEN para controlar cationes de metales pesados
Además, los indicadores basados en BAPTA, como estos, se unen a varios cationes de metales pesados (por ejemplo, Mn2+, Zn2+, Pb2+) con mucha mayor afinidad que a Ca2+. Las perturbaciones en las mediciones de calcio causadas por la presencia de estos iones pueden controlarse usando el quelante seleccionador de metales pesados TPEN.

Más opciones para indicadores de calcio fluorescentes
Ofrecemos una amplia selección de indicadores de calcio Molecular Probes™ para su uso en diversos escenarios experimentales. Para obtener más información, consulte Fluorescent Ca2+ Indicators Excited with Visible Light—Section 19.3 (Indicadores de Ca2+ fluorescentes excitados mediante luz visible, sección 19.3) en el manual de Molecular Probes™.

Para obtener información sobre indicadores de Ca2+ excitables mediante UV, indicadores de Ca2+ basados en proteínas, conjugados de indicadores de Ca2+ e indicadores basados en fluorescencia de otros iones metálicos (es decir, Mg2+, Zn2+) consulte Indicators for Ca2+, Mg2+, Zn2+ and Other Metal Ions—Chapter 19 (Indicadores para Ca2+, Mg2+, Zn2+ y otros iones metálicos, capítulo 19) en el manual de Molecular Probes™.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteA base de colorantes fluorescentes
Cantidad10 x 50 μg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio confocal, Microscopio de fluorescencia, Instrumentos de alto contenido, Lector HTS, Lector de microplacas, Generador de imágenes de fluorescencia
Tipo de productoTinte
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador de -5 °C a -30 °C y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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Citations & References (17)

Citations & References
Abstract
LIM domain only 4 (LMO4) regulates calcium-induced calcium release and synaptic plasticity in the hippocampus.
Authors:Qin Z, Zhou X, Gomez-Smith M, Pandey NR, Lee KF, Lagace DC, Béïque JC, Chen HH,
Journal:J Neurosci
PubMed ID:22442089
'The LIM domain only 4 (LMO4) transcription cofactor activates gene expression in neurons and regulates key aspects of network formation, but the mechanisms are poorly understood. Here, we show that LMO4 positively regulates ryanodine receptor type 2 (RyR2) expression, thereby suggesting that LMO4 regulates calcium-induced calcium release (CICR) in central ... More
nNOS(+) striatal neurons, a subpopulation spared in Huntington's Disease, possess functional NMDA receptors but fail to generate mitochondrial ROS in response to an excitotoxic challenge.
Authors:Canzoniero LM, Granzotto A, Turetsky DM, Choi DW, Dugan LL, Sensi SL,
Journal:
PubMed ID:23720635
'Huntington''s disease (HD) is a neurodegenerative condition characterized by severe neuronal loss in the cortex and striatum that leads to motor and behavioral deficits. Excitotoxicity is thought to be involved in HD and several studies have indicated that NMDA receptor (NMDAR) overactivation can play a role in the selective neuronal ... More
Mechanisms underlying cannabinoid inhibition of presynaptic Ca2+ influx at parallel fibre synapses of the rat cerebellum.
Authors:Daniel H, Rancillac A, Crepel F
Journal:J Physiol
PubMed ID:15034129
'Activation of CB1 cannabinoid receptors in the cerebellum acutely depresses excitatory synaptic transmission at parallel fibre-Purkinje cell synapses by decreasing the probability of glutamate release. This depression involves the activation of presynaptic 4-aminopyridine-sensitive K(+) channels by CB1 receptors, which in turn inhibits presynaptic Ca(2+) influx controlling glutamate release at these ... More
Cross-tolerance to otherwise lethal N-methyl-D-aspartate and oxygen-glucose deprivation in preconditioned cortical cultures.
Authors:Tauskela JS, Comas T, Hewitt K, Monette R, Paris J, Hogan M, Morley P
Journal:Neuroscience
PubMed ID:11720781
'In vitro ischemic preconditioning induced by subjecting rat cortical cultures to nonlethal oxygen-glucose deprivation protects against a subsequent exposure to otherwise lethal oxygen-glucose deprivation. We provide evidence that attenuation of the postsynaptic N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor- and Ca(2+)-dependent neurotoxicity underlies oxygen-glucose deprivation tolerance. It is demonstrated that extended tolerance to otherwise ... More
Mitochondrial calcium uniporter silencing potentiates caspase-independent cell death in MDA-MB-231 breast cancer cells.
Authors:Curry MC, Peters AA, Kenny PA, Roberts-Thomson SJ, Monteith GR,
Journal:Biochem Biophys Res Commun
PubMed ID:23602897
'The mitochondrial calcium uniporter (MCU) transports free ionic Ca(2+) into the mitochondrial matrix. We assessed MCU expression in clinical breast cancer samples using microarray analysis and the consequences of MCU silencing in a breast cancer cell line. Our results indicate that estrogen receptor negative and basal-like breast cancers are characterized ... More
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