DNA抽出は分子生物学において基本的な技法で、さまざまな生物学的サンプルからDNAを分離するために使用されます。 このプロセスは、DNAを他の細胞成分から分離して、さらなる分析や実験のために純粋なDNAを取得する手順が含まれます。 DNA抽出には、用途や研究要件に基づいていくつかの方法を利用できます。もっとも一般的な技法はフェノール-クロロホルム抽出法で、もっとも自動化可能な技法は磁気ビーズベースの抽出です。 RNA抽出タンパク質精製のどちらも同じ基本原理に従っています。

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DNAおよびRNA精製のステップ

さまざまなサンプルタイプからの核酸の抽出、分離、および精製には、通常次のようなステップが含まれます:

  • サンプルを均一化し、溶解する—細胞の膜や壁を破壊します
  • サンプルの結合—核酸を特定のマトリックスに結合させます
  • 洗浄—不純物を除去します
  • 溶出—精製された産物を放出します
核酸抽出のステップ:溶解、結合、洗浄、溶出

核酸の抽出および分離法

核酸の抽出および分離は、核、リボソーム、細菌、ウイルスなどの遺伝物質を含む細胞構造を破壊することから始まります。これは通常、適合する界面活性剤の添加、機械的破壊、および/または加熱によって行います。 核酸精製にはいくつかの方法を利用でき、各方法は異なる生化学的原理に基づいています。 必要なスループット、ラボで利用可能な機器、または必要な純度に基づいて方法を選択します。 当社の分子生物学研究用のラボ必需品コレクションをご確認ください。

Magnetic Dynabeads

Dynabeads磁気ビーズのアイコン

磁気ビーズベースの核酸精製

磁気ビーズをサンプルに添加すると、その表面が核酸を引き付けてビーズに結合させます。 強力な磁気を使用して、ビーズを所定の位置に保持しながら、不要な物質を除去します。 洗浄後、遺伝子物質は水または低塩バッファー中でビーズから溶出します。 Dynabeads磁気ビーズを使用して、さまざまな分離アプリケーションを実現できます。

磁気ビーズによる分離は、その拡張性と自動化対応性のため、現在もっとも一般的な核酸抽出法の1つです。 MagMAXビーズキットおよびKingFisherサンプル精製システムは、連携してさまざまな核酸を効率的に精製するように設計されています。

フラスコのアイコン

有機的抽出および沈降

有機的抽出による核酸分離では、フェノールとグアニジンイソチオシアン酸を添加して、DNA、RNA、およびタンパク質を異なる有機相に分離します。 有機的抽出は低コストの方法で、TRIzolまたはフェノール-クロロホルムのような高度な試薬を使用する簡単なプロセスです。また、必要なラボ機器は少なくて済みます。

溶解し、溶媒を添加した後、混合物は遠心分離プロセスに経て、水相(核酸含有)を有機相(タンパク質および脂質含有)から分離します。

RNAサンプル調製のアイコン

シリカベースの核酸分離

核酸は高塩条件下でシリカ(ガラス繊維とも呼ばれる)に結合し、低塩条件下で放出されます。 シリカ含有カラムは、複数の清澄化された細胞ライセートから精製核酸を同時に結合、洗浄、および溶出する容易な方法を提供します。

Invitrogen PurelinkおよびGeneJETカラムは、遠心分離、真空、または重力によってバッファーを流動させるように設計されています。 ほとんどのプロトコルではスピンカラム技術を使用しており、すぐに使用可能なラボ用機器を活用できるという利点があります。 スピンプレートは、同じ分離原理に基づいたハイスループットフォーマットを提供します。

KingFisher精製装置

DNA、RNA、タンパク質、および細胞の自動分離、抽出、および精製。 Applied Biosystems MagMAXの最適化されたキットおよび試薬は、手動のステップを排除し、時間の節約に役立つ使いやすいプロトコルを提供します。

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プラスミドDNAの分離および精製

プラスミドDNAの抽出および精製は、分子生物学研究において不可欠な技法であり、プラスミドDNAを細菌細胞から分離および精製できます。 プラスミドは微生物内に見られる小さな環状DNA分子で、遺伝子クローニング、タンパク質発現、および遺伝子工学などのさまざまなアプリケーションで重要な役割を果たします。

分離したプラスミドDNAの品質と純度は、信頼性が高く正確なダウンストリーム実験を実現するために不可欠です。 精製プロセスには、タンパク質、RNA、およびゲノムDNAなどの他の細胞成分からプラスミドDNAを慎重に分離することが含まれ、さらなる分析や操作のための高品質のDNAを確保するのに役立ちます。


KingFisher PlasmidPro Maxi Processor

プラスミド抽出の自動化

 

プラスミドDNA精製のステップ

従来の手動のプラスミドDNA精製ワークフローには、多くの場合、次のような重要なステップが含まれます:

  1. 細菌の採取:20~30分間の遠心分離
  2. 溶解および中和のために再懸濁:ベンチでの操作で15~20分間
  3. ライセートの清浄化:遠心分離機、シリンジ、または吸引を使用して5~10分間; 「ER低減(エンドトキシン除去)」
  4. 結合、洗浄、および溶出物の沈降: 点滴法および/または遠心分離を使用して45~60分間
  5. 溶液への再懸濁:ベンチでの操作で10分間
プラスミドDNA分離のステップ

プラスミドDNA精製の方法

充填済みカートリッジによるプラスミド精製の自動化

KingFisher PlasmidPro Maxi Processorは従来のスピンカラムベースのプラスミド精製法と同じプロセスと化学的性質を利用しながら、自動化の利点を提供します。 試薬がカートリッジに充填されているため、セットアップ、遠心分離、およびピペット操作が不要で、サンプル調製におけるエラーを低減するのに役立ちます。 この完全自動化システムは「押すだけで実行可能」な設計を取り入れており、マキシスケールのプラスミドDNA精製では唯一の設計です。

磁気ビーズ技術によるミニプレッププラスミド精製の自動化

Applied Biosystems MagMAX Pro HT NoSpin Plasmid Miniprep Kitは、トランスフェクショングレードのプラスミドDNAを、迅速かつ拡張性高く、容易なセットアップで精製するためのキットです。 新しい磁気ビーズ技術により、時間のかかる遠心分離や真空ろ過ステップは不要になり、キットはエタノール、カオトロピック塩、および有機溶媒の使用を必要としないため、環境に優しく持続可能な選択肢です。

カラムベースのプラスミド精製キット

サーモフィッシャーサイエンティフィックは、お客様が必要とする純度およびスケールでプラスミドDNAを分離するように設計された幅広いプラスミドDNA抽出製品を提供し、カラムベースのワークフローをサポートします。 純度グレードと培養量に基づいて、PureLinkまたはGeneJETキットをお選びください。 当社の選択ツールを使用すると、お客様の研究に適したプラスミド精製キットが見つかります。

プラスミドDNA分離をご覧ください

プラスミドDNAの分離


核酸の抽出および精製技術用の装置、キット、および試薬

当社の核酸抽出用装置、キット、および試薬は、実質的にあらゆるサンプルタイプから最大限の収量、純度、および完全性を提供するように最適化されています。 RNAウイルス核酸、DNAフラグメント、プラスミドDNA 、またはゲノムDNAを抽出および精製する場合でも、サーモフィッシャーサイエンティフィックにはソリューションがあります。

RNA抽出キット

アプリケーション、サンプル、およびRNAタイプに基づいてRNA抽出キットを選択できます。

ゲノムDNA抽出

高感度で拡張可能なゲノムDNA精製製品は効率を最大化するのに役立ちます。

プラスミドDNA精製

クローニングやまたはトランスフェクション用の高品質プラスミドDNAを分離、精製、および抽出できます。

ウイルス核酸精製

さまざまなサンプルタイプからウイルスDNAおよびRNAを優れた再現性で精製できます。

核酸の自動精製

MagMAXキットとKingFisher自動核酸精製システムを使用すると、DNA、RNA、ウイルス核酸、およびプラスミドを効率的に分離できます。

PCRおよびアガロースゲルのクリーンアップ

シンプルで迅速なPCRおよびゲルクリーンアップキットでDNAフラグメントを精製できます。


DNA解析

さまざまなDNA解析方法により、研究者は遺伝子変異、遺伝子発現、特定のDNA配列、およびDNAの構造と機能の側面に関する洞察を得られます。 一般的に使用されるDNA解析法には以下が含まれます:

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.