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Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus Dye |
Invitrogen Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus dye는 널리 사용되고 신뢰할 수 있는 형광 염료입니다. 이들 염료는 다양한 형광 기반 애플리케이션과 호환되는 다양한 스펙트럼, 고성능, 저분자 fluorophore입니다. 뛰어난 성능 외에도 숙련된 문제 해결 기술 지원 팀, 8만 건 이상의 공개 참조 자료, 실험 계획을 지원하는 풍부한 응용 및 실험 팁과 프로토콜을 이용한 혜택을 누리실 수 있습니다.
Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus dye 요약
광범위한 Invitrogen Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus dye는 멀티플렉스 검출을 위한 모든 필터와 많은 옵션을 제공합니다. 이 fluorophore 시리즈는 근자외선, 가시광선, 근적외선 스펙트럼을 포괄하며, 모든 일반적인 여기(excitation) 소스 및 기기와 호환됩니다.
| 색상 | Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus dye | Excitation/Emission | Dye equivalents |
|---|---|---|---|
| Blue | Alexa Fluor 350 | 343/441 | AMCA, coumarin |
| Alexa Fluor 405 | 401/422 | ||
| Alexa Fluor Plus 405 | 404/455 | ||
| Green | Alexa Fluor 430 | 431/540 | |
| Alexa Fluor 488 | 499/520 | Cy2, FITC (fluorescein) | |
| Alexa Fluor Plus 488 | 493/518 | ||
| Alexa Fluor 514 | 518/543 | ||
| Yellow | Alexa Fluor 532 | 534/553 | |
| Orange | Alexa Fluor 546 | 561/572 | |
| Alexa Fluor 555 | 553/568 | Cy3, TRITC (rhodamine) | |
| Alexa Fluor Plus 555 | 558/572 | ||
| Alexa Fluor 561 | 556/569 | ||
| Red | Alexa Fluor 568 | 579/603 | Rhodamine red |
| Alexa Fluor 594 | 590/618 | Texas Red | |
| Alexa Fluor Plus 594 | 590/618 | ||
| Far Red | Alexa Fluor 633 | 631/650 | |
| Alexa Fluor 635 | 633/648 | ||
| Alexa Fluor 647 | 650/671 | Cy5 | |
| Alexa Fluor Plus 647 | 658/675 | ||
| Near-IR | Alexa Fluor 660 | 663/691 | |
| Alexa Fluor 680 | 681/704 | Cy5.5, IR680 | |
| Alexa Fluor Plus 680 | 687/704 | ||
| Alexa Fluor 700 | 696/719 | ||
| Alexa Fluor 750 | 752/776 | Cy7 | |
| Alexa Fluor 790 | 782/805 | ||
| Alexa Fluor Plus 800 | 789/794 |
Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus 제품
Alexa Fluor 및 Alexa Fluor Plus 리소스
Alexa Fluor dye의 장점
탁월한 밝기
Alexa Fluor dye로 만든 단백질 콘주게이트는 유사한 스펙트럼의fluorophore-라벨링된 다른 단백질 제품을 능가하는 형광 출력을 생성합니다. Alexa Fluor dye는 다양한 형광 색상으로 제공되며 대부분의 다른 염료에 비해 광안정성이 더 높습니다.
Alexa Fluor dye 분자는 상당한 자기 소광없이 단백질에 부착될 수 있으므로 이미징, 유세포분석 및 기타 형광 기반 응용 분야에 사용할 수 있는 더 밝은 콘주게이트를 만들 수 있습니다.
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Alexa Fluor 488 dye와 fluorescein isothiocyanate(FITC)로 준비된 goat anti–mouse IgG antibody conjugate의 상대 형광 비교. 콘주게이트 형광은 참조 염료 대비 콘주게이트 염료의 형광 양자 수율을 비교하고 염료:단백질 라벨링 비율을 곱하여 측정하였습니다.
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해당 콘주게이트의 다른 염료:단백질 비율에서 Alexa Fluor 555 및 Cy3 dye의 goat anti–rabbit IgG antibody conjugate의
상대 형광 비교.
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Jackson ImmunoResearch Laboratories(녹색) 및 Amersham-Pharmacia Biotech(청색)의 Cy5 goat anti–mouse IgG antibody와 Alexa Fluor 647 goat anti–mouse IgG antibody(적색, A21235)의 유세포분석 밝기 비교. 인간 혈액을 정상 염소 혈청으로 차단하고 anti-CD3 mouse monoclonal antibody와 함께 인큐베이션 하였습니다. 세포를 세척, 재현탁한 후 Alexa Fluor 647 또는 Cy5 goat anti–mouse IgG secondary antibody와 함께 인큐베이션 하였습니다. 633nm He-Ne 레이저와 긴 경로의 방출 필터(>650 nm)가 장착된 유세포분석기에서 샘플을 분석했습니다.
향상된 광안정성
광안정성은 Alexa Fluor dye 콘주게이트의 주요 특성으로, 이미지 캡처에 더 많은 시간을 사용할 수 있도록 합니다. 탁월한 밝기와 다양한 스펙트럼에 걸친 광범위한 염료를 제공하며, Alexa Fluor dye와 dye conjugate를 사용하면 신뢰할 수 있는 광안정성을 얻을 수 있습니다.
Alexa Fluor dye 분자의 광안정성을 fluorescein과 같은 기존 fluorophore와 비교하여 볼 수 있습니다.
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Alexa Fluor 488 및 Alexa Fluor 546 dye와 잘 알려진 fluorescein 및 Cy3 fluorophore의 광표백 속도 비교. 소 폐동맥 내피세포(BPAEC)를 (상단 시리즈)는 Alexa Fluor 488 Phalloidin과 mouse monoclonal anti–a-tubulin antibody를 Alexa Fluor 546 goat anti–mouse IgG 항체와 결합하여 라벨링하였고, (하단 시리즈)는 fluorescein Phalloidin과 anti–a-tubulin antibody를 상용화된 Cy3 goat anti–mouse IgG antobody와 결합하여 라벨링하였습니다. pseudocolored image를 30초 간격(0, 30, 90 및 210초 노출)으로 촬영하였습니다. 이 이미지들은 fluorescein 및 rhodamine에 적합한 밴드패스 필터 세트를 사용하여 획득했습니다.
광표백 감소, 지속적인 신호. 소 폐동맥 내피 세포를 fluorescein phalloidin (A) 또는 Alexa Fluor 488 phalloidin (B)를 사용하여 섬유상 액틴을 라벨링하였습니다. 세포는 현미경에서 지속적인 조명 아래 배치되었습니다. 30초 동안 1초 간격으로 이미지를 획득했습니다. 이러한 조명 조건에서, fluorescein 이미지는 초기 값의 약 20%로 광표백되었으며, Alexa Fluor 488 Phalloidin의 형광은 초기 값으로 유지되었습니다.
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Alexa Fluor Plus dye의 추가 장점
Alexa Fluor Plus dye를 사용하여 존재비가 낮은 표적 검출
기존의 Alexa Fluor dye는 다양한 발현 수준의 단백질을 검출하기 위한 다양한 응용 분야에서 사용할 수 있지만, Alexa Fluor Plus dye는 더 높은 신호 대 노이즈 비율을 제공하도록 최적화되고 교차 반응성을 최소화하여 희귀 또는 귀중한 샘플에서 존재량이 낮은 표적을 검출할 수 있습니다.
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Alexa Fluor Plus 405 conjugate를 사용하면 기존의 Alexa Fluor 405 conjugate에 비해 향상된 신호 대 노이즈 비율을 제공합니다. 고정된 HeLa 세포의 β-III tubulin 면역형광 분석에서 Traditional Alexa Fluor 405 secondary antibody(왼쪽)과 Alexa Fluor Plus 405 secondary antibody(오른쪽, goat anti-rabbit IgG secondary antibody, 카탈로그 번호 A48254)를 비교하였습니다. 핵은 SYTOX Deep Red Stain(카탈로그 번호 S11380)으로 염색되었습니다. 이 이미지에는 tubulin(청록색) 및 핵(자홍색)의 오버레이가 포함되어 있습니다. 이미지는 EVOS M7000 이미징 시스템 (카탈로그 번호 AMF7000)에서 20x 확대로 촬영되었습니다.
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Alexa Fluor Plus 555를 사용하면 기존의 Alexa Fluor 555 conjugate에 비해 더욱 상세히 볼 수 있습니다. E18 Sprague Dawley 일차 피질 신경 세포의 β-III tubulin 면역형광 분석에서 Alexa Fluor Plus 555 secondary antibody(왼쪽)과 Alexa Fluor Plus 555 secondary antibody(오른쪽, goat anti-mouse IgG secondary antibody, 카탈로그 번호 A32727)를 비교하였습니다. 핵은 Hoechst 33342 Stain (카탈로그 번호 H3570)으로 염색되었습니다. 이 이미지에는 tubulin(주황색)과 핵(청색)의 오버레이가 포함되어 있습니다. 이미지는 공초점 현미경에서 40x 확대로 촬영되었습니다.
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