酵素活性測定用マイクロプレートアッセイ試薬

EnzCheck®アッセイは、蛍光レポーターを使用し、様々な酵素活性を測定するための迅速かつ簡便な方法をもたらします。各アッセイキットは、必要なアッセイバッファーが入っており、簡単なプロトコールを用いて、感度の高い検出に最適な波長に設定されています。マイクロプレートフォーマットは、アッセイ容量が200 µLのハイスループット解析に便利なフォーマットです。当社はプロテアーゼ、コラゲナーゼ、エラスターゼ、リゾチームおよび逆転写酵素のアッセイを提供しています。

プロテアーゼ活性測定試薬キット

EnzChek® Protease Assay Kitには、緑色蛍光BODIPY® FLまたは赤色蛍光BODIPY® TR-X色素のいずれかで密に標識されたカゼイン誘導体が入っています。通常、コンジュゲートはその遊離色素が本来示す<3%未満の蛍光を呈します。アッセイ後に実測された蛍光の増加は、プロテアーゼ活性に正比例しています。EnzChek®アッセイは分離ステップがまったくないため、連続測定に用いることができます。

その他の酵素活性測定試薬キット

当社はゼラチナーゼ/コラゲナーゼ、エラスターゼ、リゾチームおよび逆転写酵素のEnzChek®アッセイキットも開発しました。このアッセイでは、分子内自己消光した基質がレポートするため、酵素 反応速度の連続した高感度のモニタリングが可能になります。

enzcheck-elastase
Assay of porcine pancreatic elastase using the EnzChek® Elastase Assay Kit. Dye-conjugated elastin (25 μg/mL) from the kit was incubated with various concentrations of elastase for the specified incubation times, and fluorescence was measured.
選択ガイド
 EnzChek® Protease Assay Kit,Green   FluorescenceEnzChek® Protease Assay Kit, Red   Fluorescence
ターゲットプロテアーゼプロテアーゼ
レポーターBODIPY® FLコンジュゲートBODIPY® TR-Xコンジュゲート
励起/蛍光 (nm)505/513589/617
生細胞不可不可
ライセート可可
精製酵素可可
使用方法検出限界はプロテアーゼにより異なる検出限界はプロテアーゼにより異なる
構成アッセイバッファーを含むアッセイバッファーを含む
フォーマット200 µLの反応容量で1,000アッセイ200 µLの反応容量で1,000アッセイ
プロトコール概要
  1. 細胞を溶解し、上清を分離
  2. 基質を調製し、ウェルに分注
  3. サンプルをウェルに添加
  4. サンプルをインキュベート
  5. 蛍光を測定
  6. 標準曲線を用いて活性を算出
  1. 細胞を溶解し、上清を分離
  2. 基質を調製し、ウェルに分注
  3. サンプルをウェルに添加
  4. サンプルをインキュベート
  5. 蛍光を測定
  6. 標準曲線を用いて活性を算出
カタログ 番号E6638E6639
 EnzChek®ゼラチナーゼ/コラゲナーゼアッセイキットEnzChek®エラスターゼアッセイキットEnzChek®リゾチームアッセイ キットEnzChek®逆転写酵素アッセイ キット
ターゲットコラゲナーゼ/ゼラチナーゼエラスターゼリゾチーム逆転写酵素
レポーターフルオレセインコンジュゲートBODIPY®FLコンジュゲートフルオレセインコンジュゲートPicoGreen®試薬
励起/蛍光 (nm)495/515505/515495/515480/520
生細胞不可不可不可不可
ライセート可可可可
精製酵素可可可可
使用方法検出下限2 x 10-4 U/mL検出下限5 x 10-3 U/mL検出下限20 U/mL検出下限2 x 10-3 U/mL
構成アッセイバッファーおよびコントロールを含むアッセイバッファー、阻害物質およびコントロールを含むアッセイバッファーおよびコントロールを含むアッセイバッファーを含む
フォーマット基質濃度に応じて250～1,000アッセイが可能200 µLの反応容量で600アッセイ100 µLの反応容量で400アッセイ200 µLの反応容量で1,000アッセイ
プロトコール概要
  1. DQゼラチン基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. DQエラスチン基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. DQリゾチーム基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. テンプレートおよびプライマーをアニール
  2. アニールされた物質を反応溶液に加えた後、その溶液をウェルに分注
  3. サンプルおよび標準物質をウェルに添加
  4. 1時間後、EDTAを加えて反応を停止
  5. PicoGreen® dsDNAワーキング溶液添加
  6. 5分間インキュベート
  7. 蛍光を測定
カタログ 番号E12055E12056E22013E22064
プロテアーゼ
 EnzChek® Protease Assay Kit,Green   FluorescenceEnzChek® Protease Assay Kit, Red   Fluorescence
ターゲットプロテアーゼプロテアーゼ
レポーターBODIPY® FLコンジュゲートBODIPY® TR-Xコンジュゲート
励起/蛍光 (nm)505/513589/617
生細胞不可不可
ライセート可可
精製酵素可可
使用方法検出限界はプロテアーゼにより異なる検出限界はプロテアーゼにより異なる
構成アッセイバッファーを含むアッセイバッファーを含む
フォーマット200 µLの反応容量で1,000アッセイ200 µLの反応容量で1,000アッセイ
プロトコール概要
  1. 細胞を溶解し、上清を分離
  2. 基質を調製し、ウェルに分注
  3. サンプルをウェルに添加
  4. サンプルをインキュベート
  5. 蛍光を測定
  6. 標準曲線を用いて活性を算出
  1. 細胞を溶解し、上清を分離
  2. 基質を調製し、ウェルに分注
  3. サンプルをウェルに添加
  4. サンプルをインキュベート
  5. 蛍光を測定
  6. 標準曲線を用いて活性を算出
カタログ 番号E6638E6639
その他の酵素
 EnzChek®ゼラチナーゼ/コラゲナーゼアッセイキットEnzChek®エラスターゼアッセイキットEnzChek®リゾチームアッセイ キットEnzChek®逆転写酵素アッセイ キット
ターゲットコラゲナーゼ/ゼラチナーゼエラスターゼリゾチーム逆転写酵素
レポーターフルオレセインコンジュゲートBODIPY®FLコンジュゲートフルオレセインコンジュゲートPicoGreen®試薬
励起/蛍光 (nm)495/515505/515495/515480/520
生細胞不可不可不可不可
ライセート可可可可
精製酵素可可可可
使用方法検出下限2 x 10-4 U/mL検出下限5 x 10-3 U/mL検出下限20 U/mL検出下限2 x 10-3 U/mL
構成アッセイバッファーおよびコントロールを含むアッセイバッファー、阻害物質およびコントロールを含むアッセイバッファーおよびコントロールを含むアッセイバッファーを含む
フォーマット基質濃度に応じて250～1,000アッセイが可能200 µLの反応容量で600アッセイ100 µLの反応容量で400アッセイ200 µLの反応容量で1,000アッセイ
プロトコール概要
  1. DQゼラチン基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. DQエラスチン基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. DQリゾチーム基質をウェルに分注
  2. 酵素含有サンプルをウェルに添加
  3. インキュベート
  4. 蛍光を測定
  1. テンプレートおよびプライマーをアニール
  2. アニールされた物質を反応溶液に加えた後、その溶液をウェルに分注
  3. サンプルおよび標準物質をウェルに添加
  4. 1時間後、EDTAを加えて反応を停止
  5. PicoGreen® dsDNAワーキング溶液添加
  6. 5分間インキュベート
  7. 蛍光を測定
カタログ 番号E12055E12056E22013E22064

リソース

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.