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Zero Blunt® PCRクローニングキットは、非組換え体によるバックグラウンドが低い条件下で、平滑末端のPCR断片（または、平滑末端のDNA断片）をクローニングできるようにデザインされています。pCR®-Bluntベクターには、LacZαのC末端に融合した致死性のE. coli ccdB遺伝子が含まれています。

平滑末端PCR断片のライゲーションはlacZα-ccdB遺伝子融合の発現を阻害します。それにより、形質転換時のポジティブな組換え体のみが増殖可能になります。非組換えベクターを含むコンピテントセルは、形質転換混合液をプレーティングする際に死滅します。

迅速かつ柔軟なZero Bluntクローニング

Zero Blunt®クローニングキットにExpressLink™ T4 DNAリガーゼが追加されたことで、室温でのライゲーションをわずか5分間で行うことが可能になり、通常、80%以上の高収率でインサートを含む組換え体をクローニングすることができます。

pCR™-Bluntベクターの特徴：

  • ポジティブセレクション用にccdB遺伝子が搭載されています。
  • カナマイシンまたはZeocin™耐性を選択することができ、柔軟な抗生物質の選択が可能
  • 挿入配列を切り出すための、PCR生成物挿入部位に隣接するEcoR I部位
  • in vitroRNA転写とシーケンシング用のT7プロモーター／プライマー領域
  • シーケンシングまたはPCRスクリーニング用のM13フォワードおよびリバースプライマー領域
 

Zero Bluntクローニングの性能と有用性

Zero Blunt®クローニングキットは、コンピテントセルが付属しない製品（K2750-20およびK2750-40）、またはOne Shot® TOP10 Chemically Competent E. coliが付属する製品（K2700-20およびK2700-40）について、それぞれ20または40反応分をご用意しております。

 

  Zero Blunt®クローニングキット
クローニング効率95%（コントロールあり）
ライゲーション時間5分
ライゲーション温度室温
PCRクリーンアップの必要性不要
抗生物質の選択カナマイシンおよびZeocin™

キット内容

ベクター
ライゲーションバッファー
フォワードおよびリバースシーケンシングプライマー
dNTP
滅菌水
コントロール用DNAテンプレート

関連製品およびサポート

 

 

研究目的にのみご使用ください。 人体や動物に対する診断・治療用ではありません。