CarboxyLink™ Coupling Resin

Thermo Scientific CarboxyLink Kopplungsharz ist für die kovalente Immobilisierung von Peptiden oder anderen carboxylhaltigen (—COOH) Molekülen zu einem porösen, perlenhaltigen Harz für die Verwendung in Affinitätsreinigungsverfahren vorgesehen.

CarboxyLink Harz ist eine quervernetzte Agarose mit Rollrand, die mit Diamino-Dipropylamin (DADPA) aktiviert wurde, um lange Distanzarme mit jeweils einem primären Amin am Ende zu enthalten. Bei der Inkubation mit dem Harz und dem Carbodiimid-Crosslinker EDC (im Lieferumfang des CarboxyLink Immobilisierungskits enthalten) gehen die Carboxyl-enthaltenden Moleküle permanente Aminbindungen mit dem Träger ein. Nach Kopplung eines Moleküls kann die dermaßen präparierte Affinitätssäule mehrfach für gängige Protein-Affinitätsreinigungsverfahren eingesetzt werden. CarboxyLink Kopplungsharz können auch verwendet werden, um andere Arten von Molekülen mit alternativen aminreaktiven Vernetzungschemien zu immobilisieren.

Merkmale des CarboxyLink Kopplungsharz:

• CarboxyLink Kopplungsharz— DADPA-aktivierte, quervernetzte, 4%-ige Agarose
• Effiziente Immobilisierung—Paar 1 bis 2 mg Peptid pro Milliliter Harz (CarboxyLink Agarose-Harz aktiviert mit mehr als 16 µml Amin pro Milliliter Harz; DADPA auf UltraLink Support aktiviert mit mehr als 40 µml Amin pro Milliliter Harz)
• Die stabile Verbindung—Immoblisierung führt zu einer kovalenten Bindung von Carboxylgruppen durch Amidbindungen und ermöglicht mehrere Runden Affinitätsreinigung mit einer Charge vorbereitetem Harz
• Flexible und schonende Kopplungsbedingung—Immobilisierungsreaktion, die in einfachem MES oder anderem Nicht-Amin- und Nicht-Carboxyl, in nahezu neutralem Puffer, mit oder ohne organisches Lösungsmittel durchgeführt wird.
• Ideal für unmodifizierte Peptide—Immobilisiert Peptide mit hoher Kapazität und verschiedenen Ausrichtungen ohne sterische Behinderung simmobilisiert, wodurch eine effektive Verwendung in der Affinitätsreinigung spezifischer Antikörper ermöglicht wird

Da EDC Carboxylate mit primären Aminen in vernetzt, werden Peptide und andere Moleküle, die beide Funktionsgruppen enthalten, unterschiedlich polymerisiert und zum CarboxyLink Harz immobilisiert. Bei Peptiden, deren einzige Carboxyl- und Aminogruppen sich am Endpunkt befinden, führt die Kopplung mit dem CarboxyLink Kit zu End-to-End-Ketten von Peptiden, die durch ihre C-terminalen Enden mit dem Träger verbunden sind. Im Allgemeinen sorgt diese Struktur für hohe Kapazität und geringe sterische Hindernisse für die Verwendung in der Affinitätsreinigung. Bei Peptiden, die in der Mitte ihrer Sequenz mehrere primäre Amine (Lysin) oder Carboxylate (Glutamic- und Asparaginsäure) enthalten, kann die CarboxyLink Kopplungsmethode jedoch dazu führen, dass wichtige Bindungsstellen blockiert werden, was zu einer hohen Kopplungskapazität, aber einer schlechten Bindungskapazität für die Affinitätsreinigung führt. Alternative Methoden zur Immobilisierung sind AminoLink Plus Kopplungsharz, UltraLink Biosupport und SulfoLink Kopplungsharz.

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