Pierce™ SAT(PEG)4 (PEGylated N-succinimidyl S-acetylthioacetate)

Thermo Scientific Pierce SAT(PEG)4 ist eine langarme (18,2 Angström), pegylierte Form von SATA, ein Sulfhydryl-Additions-Reagenz für kovalente Modifikation von Primäraminen, mit dem kontrolliertes, heterobifunktionales Crosslinking ermöglicht wird.

Merkmale von SAT(PEG)4:

• Thiolat- und PEGylat-Primäramine in einem Schritt
• Hinzufügen von Sulfhydrylgruppen für heterobifunktionale Vernetzung ohne Beeinträchtigung der Proteinlöslichkeit
• NHS-aktiviert für effiziente PEGylierung von Primäraminen bei einem pH-Wert von 7 bis 9; Reaktion der NHS-Ester-Gruppe führt zur Bildung stabiler, irreversibler Amidbindungen
• Reine Verbindung mit definierter Struktur und Molekulargewicht, um reproduzierbare Proteinmodifikationseffekte sicherzustellen
• PEG-Spacer bietet einzigartige Vorteile, einschließlich erhöhter Stabilität, verringerter Tendenz zur Aggregation und reduzierter Immunogenität

SAT(PEG)4 ist die Abkürzung für N-Succinimidyll S-Acetyl(Thiotetraethylenglycol), ein aminreaktives Reagenz für die PEGylierung und das Hinzufügen von Sulfylhydrgruppen zu Proteinen und anderen aminhaltigen Molekülen. Wie SATA und andere S-Acetyl (SAT)-Reagenzien wird SAT(PEG)4 am häufigsten in Biokonjugationsmethoden verwendet, um Sulfhydrylgruppen (—SH) im Rahmen einer zweistufigen oder heterobifunktionalen Vernetzungsstrategie in Proteine zu integrieren. Die SAT-Gruppe verhindert die Oxidation des Schwefelatoms, wird aber durch Behandlung mit Hydroxylamin leicht entfernt, wenn die ungeschützte Sulfhydrylgruppe für die Konjugation benötigt wird. Der Polyethylenglycol(PEG)-Spacerarm in SAT(PEG)4 minimiert sterische Hindernisse und bietet zusätzliche Löslichkeit für die modifizierten und konjugierten Moleküle.

Über die NHS-Ester-Gruppe kommt es zu einer spezifischen Reaktivität mit Primäraminen (z. B. Lysinrückstände in Proteinen). Spontane Reaktionen in Phosphat oder anderen Nicht-Amin-Puffern bei einem pH-Wert von 7 bis 9 führen zur Bildung stabiler, kovalenter Amidbindungen. Nach dem Entfernen des Schutzes der Sulfhydrylgruppe mit Hydroxylamin, können Moleküle, die mit SAT(PEG)4 modifiziert werden, zu einer Reaktion mit anderen Proteinen oder Oberflächen gebracht werden, die mit heterobifunktionalen Crosslinkern wie Sulfo-SMCC oder SM(PEG)n-Reagenzien Maleimid-aktiviert wurden.

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