Reactivo de extracción de proteínas de tejidos T-PER™

El reactivo de extracción de proteínas de tejidos Thermo Scientific T-PER permite una extracción suave de las proteínas totales de las muestras de tejido.

Características del reactivo de extracción de proteínas de tejidos T-PER:

• Procedimiento sencillo: homogeneice las muestras de tejido en 1:20 (p/v) de tejido a reactivo T-PER y centrifugue para sedimentar el material residual de células o tejidos
• Suave y práctico: el detergente es dializable para una extracción rápida y sencilla; se puede utilizar con componentes adicionales (por ejemplo, inhibidores de proteasa, sales, agentes reductores, agentes quelantes, etc.)
• Flexible: el lisado se puede utilizar para ensayos con indicadores, ensayos de proteína cinasa, inmunoensayos y purificación de proteínas
• Compatible: el lisado es compatible con ensayos de proteínas estándar, como el ensayo de proteínas Thermo Scientific Pierce Coomassie Plus (Bradford)

Detalles del producto

El reactivo de lisis celular de tejido utiliza un detergente patentado en 25 mM de bicina, 150 mM de cloruro sódico (pH 7,6) para maximizar la eficacia de la solubilización de proteínas a partir de muestras de tejidos de mamíferos mediante homogeneización. Su composición sencilla es compatible con aditivos como inhibidores de proteasa, sales, agentes reductores y agentes quelantes, lo que proporciona la versatilidad necesaria para diferentes tipos de muestras y aplicaciones de lisis. Los lisados celulares preparados con reactivo T-PER son directamente compatibles con ensayos con indicadores (por ejemplo, luciferasa, beta-galactosidasa, cloranfenicol acetiltransferasa), ensayos de proteína cinasa (por ejemplo, proteína cinasa A [PKA], proteína cinasa C [PKC], tirosina cinasa), inmunoensayos (por ejemplo, inmunotransferencia, ensayos por inmunoabsorción ligados a enzimas [ELISA], radioinmunoensayos [RIA]) y procedimientos de purificación de proteínas.

La extracción homogénea y eficiente de proteínas tisulares a partir de diferentes muestras es un reto debido a la composición tisular y a los métodos de extracción variables. Los tejidos colagenosos y fibrosos, como el corazón y los riñones, hacen que la extracción de proteínas con métodos de maja y mortero o congelación-descongelación no sea eficaz sin la ayuda de detergentes. Por el contrario, los tejidos blandos, como el bazo y el hígado, requieren un protocolo de extracción más suave para obtener unos resultados óptimos. El reactivo T-PER se ha diseñado para el uso con todos los tejidos, con independencia de los métodos de extracción mecánica. El detergente suave mejora la solubilización de proteínas sin comprometer la función. El pH neutro y la concentración de sales de este reactivo permiten una extracción más eficaz de los compartimentos celulares, lo que produce unos lisados homogéneos.

El reactivo T-PER fue validado para el rendimiento de proteínas tanto en tejido fresco como congelado. Se prevé que el tejido congelado y los protocolos de extracción mediante congelación-descongelación resulten en una alta producción de proteínas. Además, se ha demostrado que el reactivo T-PER extrae con eficacia proteínas diana de distintos compartimentos celulares, como la membrana plasmática (Na-K+ ATPasa, pan-cadherina), el citoplasma (HSP90, MAPK), las mitocondrias (COXIV) y el núcleo (HDAC1), así como marcadores específicos de tejido del cerebro (sinaptofisina) y del corazón (isoforma troponina T cardíaca).

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