El reactivo de etiquetado TMT súper pesado reactivo a la amina es una forma alternativa de TMT que contiene el doble de isótopos pesados para el etiquetado de péptidos, y cuando se utiliza con muestras etiquetadas con TMT, permite aplicaciones de multiplexación de TMT 2D para la cuantificación dirigida.

Características del reactivo de etiquetado TMT súper pesado (shTMT):
• Multiplexado bidimensional: permite la multiplexación de muestras multiplex tradicionales etiquetadas con TMT con péptidos muy pesados para la cuantificación multiplexada dirigida
• Mejora la precisión cuantitativa: el etiquetado reduce el coaislamiento y la interferencia para permitir una cuantificación más resistente
• Reduce la complejidad de la adquisición: utiliza un péptido etiquetado pesado como activador para la selección de péptidos

Se utiliza el reactivo de etiquetado TMT súper pesado para etiquetar péptidos sintéticos y es para su uso específico con muestras etiquetadas con multiplex TMT. Cuando se utilizan juntos, el desplazamiento de masa del péptido sintético etiquetado súper pesado sirve como un activador de la selección del péptido diana en la muestra multiplexada y reduce la interferencia o el coaislamiento para permitir una cuantificación más resistente. Este nuevo método combina la potencia de multiplexación de los reactivos TMT con métodos de cuantificación dirigidos y se denomina método TOMAHAQ (activado por desplazamiento, multiplexado, masa precisa, alta resolución y cuantificación absoluta)1. Para esta aplicación, el usuario puede realizar una cuantificación dirigida en muestras multiplexadas para péptidos diana sin depender de las condiciones de la cromatografía.

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Para el análisis de alta resolución de los péptidos etiquetados con TMT, la columna de LC recomendada para una fuente de Nanospray Flex es la columna de LC Acclaim PepMap 100 C18 (N.º de cat. 164942 o 164939). Para una fuente EASY-Spray, la columna LC recomendada es la columna de LC Easy-Spray C18 (N.º de N.° de ref. ES802 o ES803).

Referencia
Erickson BK, Rose cm, Braun CR, Erickson AR, Knott J, McAlister GC, Wühr M, Paulo JA, Everley RA, Gygi SP. Estrategia para combinar el multiplexado de muestras con ensayos de proteómica dirigidos para la caracterización de la firma de proteínas de alto rendimiento. Mol Cell. 2017 65(2):361-370.