NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm
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NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm
Invitrogen™

NativePAGE™ Bis-Tris Mini Protein Gels, 3 to 12%, 1.0 mm

Das Invitrogen NativePAGE Bis-Tris Gelsystem ist ein vorgefertigtes Polyacrylamid-Mini-Gel-System, das eine empfindliche, hochauflösende Analyse von nativen Proteinen und Proteinkomplexen für die Bestimmung der Molekülmasse und die Beurteilung der Reinheit ermöglicht.
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KatalognummerWells
BN1001BOX10-Well
BN1003BOX15-Well
Katalognummer BN1001BOX
Preis (EUR)
258,65
Exklusiv online
278,00
Ersparnis 19,35 (7%)
Each
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Wells:
10-Well
Preis (EUR)
258,65
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Das Invitrogen NativePAGE Bis-Tris Gelsystem ist ein vorgefertigtes Polyacrylamid-Mini-Gel-System, das eine empfindliche, hochauflösende Analyse von nativen Proteinen und Proteinkomplexen für die Bestimmung der Molekülmasse und die Beurteilung der Reinheit ermöglicht. Basiert auf der blauen nativen Polyacrylamid-Gelelektrophorese (BN PAGE), die von Schägger und von Jagow entwickelt wurde und die Beschränkungen der herkömmlichen nativen Elektrophorese durch einen nahezu neutralen pH-Wert und Detergensverträglichkeit überwindet.

Das NativePAGE Bis-Tris-Gelsystem zeichnet sich durch folgende Merkmale aus:
Großer Molekülmassenbereich, von 15 bis 10.000 kDa
Trennung bei neutralem pH-Wert, wodurch der native Zustand von Proteinkomplexen besser erhalten bleibt
Auflösung aller Proteine im Gel unabhängig von ihrem isoelektrischen Punkt (pI)
Fähigkeit, Membranproteinkomplexe in ihren nativen Konformationen zu analysieren
Fähigkeit, eine bessere Auflösung als bei der herkömmlichen Tris-Glycin-Nativ-Elektrophorese zu erhalten

Funktionsweise der NativePAGE Bis-Tris-Gele
In SDS-PAGE fungiert SDS als Lade-Verschiebungsmolekül, das Proteine denaturiert, indem es sie negativ auflädt und Proteine zur Anode migrieren lässt. BN PAGE verwendet Coomassie G-250 als Lade-Verschiebungsmolekül, das an Proteine bindet und sie negativ auflädt, während die Proteine in ihrem nicht denaturiertem, nativen Zustand verbleiben. Der fast neutrale pH-Wert des NativePAGE Bis-Tris-Gelsystems bietet maximale Stabilität sowohl der Proteine als auch der Gelmatrix, was eine hochsensitive Methode zur Analyse nativer Membran-Protein-Komplexe und eine höhere Bandauflösung als bei herkömmlichen Tris-Glycin-Gelsystemen ermöglicht.

Für die Übertragung von Proteinen auf eine Membran empfehlen wir die Verwendung von NuPAGE Transferpuffern für herkömmliche Nassübertragungen und PVDF-Membranen. Der NuPAGE Transferpuffer hält die neutrale pH-Umgebung aufrecht, die während der Elektrophorese hergestellt wird. Nitrozellulosemembranen sind nicht kompatibel mit Blotting, da die Membran den Coomassie G-250-Farbstoff sehr fest bindet. Schneller halbtrockener Transfer mit dem Invitrogen Power Blotter (PB0013) bzw. schneller trockener Transfer mit dem iBlot 2 Gel-Transfergerät (IB21001) unter Verwendung von PVDF-Membranen.

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

Specifications
Zur Verwendung mit (Geräte)XCell SureLock Mini-Zelle
Gel Thickness1,0 mm
Länge (metrisch)8 cm
TrennmodusMolekulargewicht
Menge10 Gele/Karton
Empfohlene AnwendungenNativ
ProbenladevolumenBis zu 25 µl
Haltbarkeit12 Monate
VersandbedingungNasseis
LagerungsbedingungenBei 2 bis 8 °C lagern. Nicht einfrieren.
Breite (metrisch)8 cm
Gelanteil (%)3 bis 12 %
GelgrößeMini
GeltypBis-Tris
ProduktlinieNativePAGE
Trennbereich30 bis 10.000 kDa
TrennverfahrenNativ
Wells10-Well
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Jede Packung enthält 10 Gele. Bei 2 °C bis 8 °C lagern. Nicht einfrieren.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What gels can I use to separate native proteins?

The NativePAGE Invitrogen Bis-Tris Gel System is a pre-cast polyacrylamide mini gel system that provides a sensitive and high-resolution method for analyzing native membrane protein complexes, native soluble proteins, molecular mass estimations, and assessing purity of native proteins. It is based on the blue native polyacrylamide gel electrophoresis technique (BN PAGE) developed by Schagger and von Jagow.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

What does it mean when bands appear to be getting narrower (or "funneling") as they progress down a protein gel?

There may be too much beta-mercaptoethanol (BME), sample buffer salts, or dithiothreitol (DTT) in your samples. If the proteins are over-reduced, they can be negatively charged and actually repel each other across the lanes causing the bands to get narrower as they progress down the gel.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Electrophoresis and Western Blotting Support Center.

After transferring onto a nitrocellulose membrane, what is the best way to store the membrane overnight for probing the next day?

We recommend rinsing the membrane briefly in water, air drying and store it at room temperature in a ziplock bag. Do not place nitrocellulose in the freezer because it will shatter. Unlike PVDF, nitrocellulose membranes should never be pre-wetted in alcohol as it will cause them to shrivel.

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Are NativePAGE gels and buffers compatible with Mini Gel tank?

Yes, NativePAGE gels are compatible with our Mini Gel tank, however there is a small variation from the original protocol.

The following protocol are for using NativePage gels with the Mini Gel Tank depending on if you are also performing a western transfer or not:
If you are NOT performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of each buffer (Anode and Dark Blue Cathode) per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel. Start the gel run

If you are performing a western transfer:
1. Prepare 250 mL of Dark Blue Cathode Buffer, 250 mL of Light Blue Cathode Buffer, and 500 mL of Anode Buffer per gel
2. After inserting a loaded NativePAGE gel into the Mini Gel Tank and pulling the clamp forward, fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Dark Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel
3. Add 220 mL of Anode Buffer to the back anode buffer chamber for that gel
4. Start the gel run; pause the run after the dark blue dye has run ~1/3 of the way through gel
a. Pour out the buffers from the Mini Gel Tank
b. Refill the back anode buffer chamber with 220 mL of Anode Buffer per gel
c. Fill the front cathode buffer chamber to the Fill Line with Light Blue Cathode Buffer (~200 mL per gel)
5. Resume the gel run

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I would like to run a NativePAGE gel. Which of your protein standards should I use?

We recommend using the NativeMark Unstained Protein Standard, Cat. No. LC0725 for native gel electrophoresis with Tris-Glycine, NuPAGE Tris-Acetate or NativePAGE gels.

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Zitierungen und Referenzen (1)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
A protein secretion system linked to bacteroidete gliding motility and pathogenesis.
Authors:Sato K, Naito M, Yukitake H, Hirakawa H, Shoji M, McBride MJ, Rhodes RG, Nakayama K,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:19966289
'Porphyromonas gingivalis secretes strong proteases called gingipains that are implicated in periodontal pathogenesis. Protein secretion systems common to other Gram-negative bacteria are lacking in P. gingivalis, but several proteins, including PorT, have been linked to gingipain secretion. Comparative genome analysis and genetic experiments revealed 11 additional proteins involved in gingipain ... More