T4 RNA Ligase (10 U/μl)
Thermo Scientific™

T4 RNA Ligase (10 U/μl)

Thermo Scientific T4 RNA Ligase katalysiert die ATP-abhängige intra- und intermolekulare Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen 5'-Phosphat und 3'-Hydroxyltermini von Oligonukleotiden,Weitere Informationen
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EL00211000 E
Katalognummer EL0021
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Thermo Scientific T4 RNA Ligase katalysiert die ATP-abhängige intra- und intermolekulare Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen 5'-Phosphat und 3'-Hydroxyltermini von Oligonukleotiden, einsträngiger RNA und DNA.

Das minimale Substrat ist ein Nukleosid 3',5''-Biphosphat in der intermolekularen Reaktion und Oligonukleotid aus 8 Basen in der intramolekularen Reaktion.

Anwendungen

• RNA 3'-Endmarkierung mit Cytidin 3',5‘-bis [Alpha-32P]-Phosphat
• Verbindung von RNA mit RNA
• Synthese von Oligoribonukleotiden und Oligodesoxyribonukleotiden
• spezifische Modifikationen von tRNAs
• Oligodesoxyribonukleotid-Ligation mit einzelsträngigen cDNAs für 5' RACE (schnelle Amplifikation von cDNA-Enden)
• ortsspezifische Erzeugung von zusammengesetzten Primern für die PCR

Hinweis

Die empfohlene BSA-Konzentration im Reaktionsgemisch beträgt 0,1 mg/ml.
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
Kompatibler Puffer10x Reaktionspuffer
ProdukttypT4 RNA Ligase
Menge1000 E
Konzentration10 U/μl
EnzymT4 RNA Ligase
Unit SizeEach

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

What are some of the problems associated with sticky-end cloning?

The amplified DNA needs to be purified from the PCR mixture components prior to cloning. The dNTPs carried over from the PCR are competitive inhibitors for ATP in the ligation reaction.

If during synthesis of the PCR primers their chemical integrity has been compromised by either a base substitution or modification, the enzyme recognition site may in actuality not exist. If this is the case, PCR products will be resistant to digestion with restriction enzymes. It may be necessary to use a higher concentration of the restriction enzyme and to incubate at the appropriate temperature overnight to ensure cutting.