Maxima™ H Minus cDNA Synthesis Master Mix

Der Thermo Scientific Maxima H Minus cDNA-Synthese-Master Mix bietet alle Reaktionskomponenten für die cDNA-Synthese in einem praktischen Einzelröhrchenformat. Optimiert für eine hocheffiziente cDNA-Synthese zum Einsatz in quantitativen, zweistufigen RT-PCR (RT-qPCR)-Anwendungen.

Zu den Merkmalen gehören:
• Der Master Mix im Einzelröhrchenformat verringert die Anzahl der Pipettierschritte und verbessert die Konsistenz der RT-qPCR-Ergebnisse
• Erhöhte RT-Effizienz über unterschiedliche Konzentrationen an ursprünglicher RNA und eine Vielzahl von Genzielen hinweg
• Hohe Thermostabilität für RT-Reaktionen bei 50 bis 65 °C

Der Master Mix enthält Maxima H Minus reverse Transkriptase (RT) und RiboLock RNase-Inhibitor. Maxima H Minus RT ist ein leistungsstarkes Enzym, das von M-MuLV-RT durch In-vitro-Evolution abgeleitet wurde. Das Enzym zeichnet sich durch eine hohe Thermostabilität, Robustheit, Prozessivität sowie erhöhte cDNA-Syntheserate aus und weist keine RNase H-Aktivität auf. Der rekombinante RiboLock RNase-Inhibitor schützt RNA-Templates bei Temperaturen bis zu 55 °C wirksam vor dem Abbau durch die RNasen A, B und C. Der Master Mix enthält zudem Reaktionspuffer, dNTPs, Oligo(dT)18 sowie Random-Hexamer-Primer. Ein separates Röhrchen mit RT-Negativkontrollgemisch wird ebenfalls bereitgestellt.

Der Maxima H Minus cDNA-Synthese-Master Mix ermöglicht eine reproduzierbare cDNA-Synthese bei erhöhten Temperaturen (50 – 65 °C). Die Synthesereaktion ist in der Regel innerhalb von 15 – 30 Minuten abgeschlossen.

Zusätzliche Informationen zu den Reaktionskomponenten
• Das RT-Negativkontrollgemisch enthält alle Komponenten des Maxima H Minus cDNA-Synthese-Master Mix außer RT. Das Vorhandensein eines PCR-Produkts in der Reaktion der RT-Negativkontrolle weist darauf hin, dass die Reaktion mit DNA kontaminiert ist. Um die Effizienz der Entfernung von genomischer DNA weiter zu verbessern, wird die RNA-Inkubation mit dsDNase (Kat.- Nr. EN0771) dringend empfohlen.
• Nukleasefreies Wasser zur Reaktionsvorbereitung und Verdünnung der Proben-DNA ist im Lieferumfang enthalten. Mithilfe geeigneter Qualitätsprüfungen wurde sichergestellt, dass keine Exodesoxyribonukleasen, Ribonukleasen sowie Phosphatasen vorhanden sind.

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