Pierce™ EDC, formato No-Weigh™

Thermo Scientific Pierce EDC es un entrecruzador de longitud cero reactivo a carboxilo y amina. EDC reacciona primero con un grupo carboxilo y forma un intermediario o-acilisourea reactivo a la amina que reacciona rápidamente con un grupo amino para formar un enlace amida con la liberación de un subproducto de isourea. El intermediario es inestable en soluciones acuosas y, por tanto, los procedimientos de conjugación en dos pasos emplean N-hidroxisucinimida (NHS) para la estabilización. Si no reacciona con una amina, se producirá hidrólisis del intermediario, regeneración del carboxilo y liberación de una urea N-sustituida. Una reacción secundaria es la formación de una N-acilurea, que generalmente se limita a los carboxilos ubicados en regiones hidrófobas de las proteínas.

Los productos Thermo Scientific No-Weigh son reactivos especiales suministrados en un formato previamente indicado. El envase prepesado evita la pérdida de reactividad del reactivo y la contaminación con el tiempo eliminando la apertura y el cierre repetitivos del vial. El formato permite el uso de un vial de reactivo fresco cada vez, lo que elimina la molestia de pesar pequeñas cantidades de reactivos y reduce las preocupaciones sobre la estabilidad del reactivo.

Características de EDC:

• Grupo reactivo: Carbodiimida
• Objetivo de la reacción: activa los grupos carboxilo para que se conjuguen con grupos amino (aminas primarias)
• Varias estrategias de conjugación: obtenga una reacción de EDC solo con grupos objetivo o incluya NHS o Sulfo-NHS para aumentar la eficacia de la reacción o estabilizar los intermedios activos para una reacción posterior con las aminas
• Enlaces neutros: forma enlaces amida neutros entre carboxilos y aminas
• Reactivo soluble en agua: añádalo directamente a reacciones en tampones fisiológicos acuosos
• Derivados de la reacción solubles: se puede retirar fácilmente mediante un lavado con agua o ácido diluido
• Reactivo cristalino de alta pureza: se utiliza para crear derivados activados de gran calidad

Propiedades de EDC
• Fórmula molecular: C₈H₁₇N₃·HCl
• Peso molecular: 191,7
• Longitud del agente del separador: 0 Å
• Número CAS: 25952-53-8
• Grupos reactivos: carbodiimida
• Reactividad: Forma un intermedio activo con grupos carboxilo con un pH de 4,7–6,0 (óptimo). A continuación, el intermedio reacciona con las aminas primarias.

El 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida hidrocloruro (EDC o EDAC) es un agente de entrecruzamiento de longitud cero utilizado para asociar los grupos carboxilo con aminas primarias. Este entrecruzador se ha utilizado en diversas aplicaciones, como la formación de enlaces amida en la síntesis de péptidos, la colocación de haptenos en proteínas de transporte para formar inmunógenos, el etiquetado de ácidos nucleicos a través de grupos de 5' fosfato y la creación de ésteres NHS reactivos a aminas de biomoléculas. El EDC reacciona con un carboxilo para formar un intermedio de O-acilisourea reactivo a aminas. Si este intermediario no encuentra una amina, se hidrolizará y regenerará el grupo carboxilo. En presencia de N-hidroxosulfosucinimida (Sulfo-NHS), el EDC se puede utilizar para convertir grupos carboxilo en ésteres Sulfo-NHS reactivos a aminas. Esto se consigue mediante la mezcla del EDC con una molécula que contiene carboxilo y la adición de Sulfo-NHS.

Aplicaciones:
• Conjugue los grupos carboxilos y aminos Grupos carboxilo entre péptidos y proteínas
• Acople haptenos a proteínas portadoras inmunogénicas (p. ej. acople un péptido a KLH)
• Inmovilice antígenos peptídicos a anticuerpos purificados por afinidad
• Cree compuestos de etiquetado reactivos a amina activados por NHS
• Entrecruce proteínas con superficies o gránulos recubiertos de carboxilo
• Active nanopartículas con ésteres reactivos a aminas de sulfo-NHS
• Etiquetado de ADN a través de grupos fosfatos 5' (consulte el Consejo Técnico n.º 30)

Referencias del producto:
Guía de aplicaciones del entrecruzador -- búsqueda de referencias bibliográficas recientes para este producto