Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit ist für die Synthese von Erststrang-cDNA direkt aus einem Säugetierzelllysat optimiert, ohne zuvor die RNA zu isolieren. Lyse und reverse Transkription werden im gleichen Röhrchen durchgeführt, und die daraus resultierende Erststrang-cDNA ist für PCR und qPCR einsatzbereit.
Merkmale des SuperScript IV Kits: • Kompatibel mit einer Vielzahl von Säugetierzelltypen, die unter verschiedenen Behandlungsbedingungen kultiviert wurden • Einzelröhrchenformat minimiert Reagenzienverlust, Probenverlust und Behandlungszeit • Das Gesamtlysatvolumen wird bei der Erststrang-Synthesereaktion für cDNA verwendet, wodurch eine begrenzte Anzahl von Zellen mit höheren Ausbeuten erzielt wird und seltene Transkripte nachgewiesen werden können • Qualitativ hochwertige cDNA, die für die Verwendung in einer Vielzahl von Anwendungen erzeugt wurde, einschließlich PCR und qPCR • Einfaches Protokoll, das etwa 37 Minuten dauert • Kompatibel mit dem TaqMan und SYBR Green qPCR Master Mix von verschiedenen Herstellern • Optimierte Leistung für 1 – 10.000 Zellen je Probe, Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA
Das SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit enthält SuperScript IV reverse Transkriptase. Merkmale dieses Enzyms: • Reduzierte RNase H-Aktivität • Höhere thermische Stabilität • Hohe cDNA-Ausbeute bei der Erststrang-Synthesereaktion für eine höhere Empfindlichkeit und einen verbesserten Nachweis seltener Transkripte • Überlegene Toleranz gegenüber verschiedenen RT-Inhibitoren
SuperScript IV reverse Transkriptase ist eine ausgezeichnete Wahl für alle RT-PCR- und qRT-PCR-Anwendungen. Proprietäre MMLV-Mutante mit hervorragender Stabilität und Zuverlässigkeit bei RT-Reaktionen. Deutliche Verbesserung der Inhibitorresistenz, Prozessivität und Reaktionsgeschwindigkeit im Vergleich zur SuperScript III reversen Transkriptase bei gleichzeitiger Bewahrung aller Vorteile des vorherigen Enzyms, einschließlich erhöhter Thermostabilität, hocheffizienter Synthese von Volllängen-cDNA und reduzierter RNase-Aktivität.
Funktionsweise Bei der herkömmlichen RT-PCR muss in einem sehr zeitaufwändigen Verfahren zuerst RNA aus Zellen isoliert werden, was zu Materialverlust führen kann. Mit dem SuperScript IV CellsDirect cDNA-Synthese-Kit werden die Zellen lysiert und die cDNA aus dem Lysat in einem einzigen Röhrchen mit minimalem Aufwand und ohne Probenverlust erzeugt. Die DNase I-Behandlung ist ein optionaler Schritt und kann zur Entfernung genomischer DNA vor der Erststrang-Synthese verwendet werden. Dieses Kit wurde für kleine Zellproben optimiert, von 10.000 Zellen bis hin zu einer einzelnen Zelle.
Spezifikationen
Format
Kit
GC-Rich PCR Performance
Hoch
Reaktionsgeschwindigkeit
10 min
Verfahren
Reverse Transkription
Umweltfreundliche Eigenschaften
Weniger Risiken, weniger Abfall
Optimale Reaktionstemperatur
50 °C
Reverse Transkriptase
SuperScript IV
Ribonuklease-H-Aktivität
Verringert
Versandbedingung
Trockeneis
Zur Verwendung mit (Anwendung)
RT-PCR, Real Time PCR (qPCR)
Endprodukttyp
Erststrang-cDNA
Anzahl Reaktionen
500 Reaktionen
Reaktionsformat
Vorgemischte Komponenten
Reagenztyp
Reverse Transkription
Ausgangsmaterial
Zellen
Inhalt und Lagerung
• SuperScript IV CellsDirect Lyselösung (3x 9 ml) • SuperScript IV CellsDirect Stopplösung (2x 1,25 ml) • Lyseverstärker (1x 250 µl) • DNase I (1x 500 µl) • SuperScript IV RT-Mastermix (4x 1 ml) • SuperScript IV RT-Negativkontrolle (4x 1 ml)