PureLink™ RNA Mini-Kit
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PureLink™ RNA Mini-Kit

Das PureLink RNA Mini Kit ist ein säulenbasiertes Kit, das zur Isolierung hochwertiger Gesamt-RNA aus einer Vielzahl von Probentypen mitWeitere Informationen
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KatalognummerMengeProdukttyp
12183018A50 AufreinigungenRNA-Mini-Kit
1218302010 AufreinigungenRNA-Mini-Kit
12183025250 AufreinigungenRNA-Mini-Kit
A2983950/KassetteRNA Mini-Sterilisationssäulen
1218302650/KassetteHomogenisator
Katalognummer 12183018A
Preis (EUR)
384,00
Each
Menge:
50 Aufreinigungen
Produkttyp:
RNA-Mini-Kit
Preis (EUR)
384,00
Each
Das PureLink RNA Mini Kit ist ein säulenbasiertes Kit, das zur Isolierung hochwertiger Gesamt-RNA aus einer Vielzahl von Probentypen mit Standard-Laborgeräten innerhalb von 20 Minuten verwendet wird. Das Kit enthält RNase-freie Lyse- und Waschlösungen, die RNA vor RNasen schützen und gleichzeitig die RNA von DNA, Proteinen und anderen zellulären Rückständen befreien. Der schnelle Spin-Säulen-Workflow eignet sich ideal für die Verarbeitung von Chargengrößen mit niedrigem bis mittlerem Durchsatz. Das fortschrittliche PureLink RNA Mini Spin-Säulendesign ermöglicht eine maximale Probeneingabe (200 mg Gewebe) und RNA-Rückgewinnung (bis zu 1.000 µg). Das bedeutet, dass Anwender sowohl kleine als auch große Probengrößen mit demselben RNA-Isolationskit verarbeiten können.

• Verarbeiten Sie Probenzufuhren von 5–200 mg tierischem/pflanzlichem Gewebe oder von 0,5 × 106 bis 108 Gewebekulturzellen mit einer Spin-Säule in 20 Minuten
• Isolieren Sie mehr RNA als Mini-Spin-Säulen anderer Hersteller: Bis zu 1.000 µg Gesamt-RNA aus einer Säule
• Verwenden Sie isolierte RNA in den meisten Anwendungen ohne weitere DNase Behandlung (sehr geringe DNA-Rückstandsübertragung)
• Flexibel – Eine optionale DNase-Behandlung in der Säule oder nach der Isolation ist mit dem PureLink DNase-Set zur einfachen Entfernung von DNA-Rückständen verfügbar

. Die besonders hohe Bindungskapazität ermöglicht eine schnelle RNA-Aufreinigung mit Standard-Laborgeräten
Das PureLink RNA Mini Kit ermöglicht die schnelle Aufreinigung von Gesamt-RNA aus einer Vielzahl von Zellen und Gewebetypen, um bis zu 1.000 µg aufgereinigte RNA aus einer einzigen Extraktion zu erhalten (siehe Abbildung 1). Hochwertige Gesamt-RNA erhalten Sie aus Mini- und Midiprepmengen von Ausgangsmaterialien mit nur geringen Kontaminationsspuren durch genomische DNA. Die besonders hohe Bindungskapazität ermöglicht es einem Kit, die meisten RNA-Isolierungsanforderungen in einem schnellen 20-Minuten-Protokoll zu erfüllen, ohne dass spezielle Probenverarbeitungsgeräte erforderlich sind.

Einfache, optionale DNase-Behandlung in der Säule für empfindliche Anwendungen
Die PureLink RNA Mini Kit-Säulen sind äußerst effizient für die Isolierung hochwertiger Gesamt-RNA bei gleichzeitiger Entfernung der meisten genomischen DNA. Für die meisten Anwendungen, die RNA aus tierischem Gewebe oder Säugetierzelllinien erfordern, ist im Allgemeinen keine zusätzliche DNase Behandlung notwendig. Einige Anwendungen wie die Genexpressionsanalyse durch qRT-PCR ohne intron-übergreifende Primer oder die Arbeit mit Proben von Organismen mit sehr kleinen oder keinen Introns erfordern jedoch möglicherweise eine vollständige Entfernung der verbleibenden kontaminierenden DNA. Das PureLink DNase Set ermöglicht die praktische Verdauung von DNA in der Säule während des RNA-Isolationsprotokolls. Die Behandlung mit DNase während der Behandlung „in der Säule“ ist einfacher und ermöglicht eine höhere RNA-Rückgewinnung als die Behandlung mit DNase nach der RNA-Isolierung. Das PureLink DNase Set kann auch verwendet werden, um DNA-Rückstände aus RNA zu entfernen, die zuvor aufgereinigt wurde. Sowohl der Workflow „in der Säule“ als auch der Post-RNA-Aufreinigungs-Workflow sind mit dem PureLink DNase Set erhältlich.

Vereinfachte, ungiftige RNA-Aufreinigung
Das PureLink RNA Mini Kit verwendet ungiftigen Guanidin-Isothiocyanat-Lyse-Puffer, um die RNA während der Isolierungsschritte zu schützen. Spezielle RNase-freie Reagenzien in Kombination mit zertifizierten RNase-freien Kieselgelmembranen in einer einzigartigen Säulenkonfiguration ermöglichen ein sicheres und einfaches Verfahren, das in der Regel in weniger als 20 Minuten ohne gefährliche Phenol-/Chloroformextraktion, CsCl-Zentrifugation oder LiCl- oder Alkoholausfällung durchgeführt werden kann.

Das PureLink RNA Mini Kit wird für die Verwendung mit dem Homogenisator (Kat. Nr. 12183026) empfohlen, der für die Homogenisierung von Zell- oder Gewebelysaten durch Zentrifugation, vor der Nukleinsäure-Aufreinigung entwickelt wurde. Der Homogenisator eignet sich besonders zur Klärung von Partikeln aus Pflanzengewebe.

Für Pflanzengewebe mit hohem Polyphenol- oder Stärkegehalt (z. B. Piniennadeln, Kartoffelknollen) empfehlen wir die Verwendung von PureLink Reagenz für pflanzliche RNA (Kat.- Nr. 12322012) zusammen mit dem PureLink RNA Mini-Kit.

Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
Specifications
Elutionsvolumen30 bis 300 μl
EndprodukttypGesamt-RNA
Zur Verwendung mit (Anwendung)RT-PCR, qPCR, cDNA-Bibliothekskonstruktion, NGS, Microarray-Analyse, Blot-Hybridisierung, Northern Blotting, In-vitro-Translation, Nuclease-Protection-Assays, Nukleinsäure-Markierung
Hochdurchsatz-KompatibilitätNicht mit hohen Durchsatz kompatibel (manuell)
ProdukttypRNA-Mini-Kit
Aufreinigungszeit20 min.
Menge50 Aufreinigungen
UmfangMini
VersandbedingungRaumtemperatur
AusgangsmaterialmengeBakterien: ≤ 109 Zellen, Blut: ≤ 0,2 ml, Zellen: ≤ 5 x 107, Pflanze: ≤ 250 mg, Gewebe: ≤ 200 mg, Hefe: ≤ 5 x 108 Zellen, Enzymreaktionen: ≤1,2 ml
ErtragBis zu 350 μg
Isolation TechnologyKieselgel-Zentrifugationssäule
ProbentypBakterien, Blutzellen, flüssige Proben (z. B. Serum), Pflanzenproben, Gewebe, Hefe, Enzymatische Reaktionen
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
• Lysepuffer (125 ml)
• Waschpuffer I (50 ml)
• Waschpuffer II (15 ml)
• RNase-freies Wasser (15,5 ml)
• Zentrifugenkartuschen mit Entnahmeröhrchen (je 50)
• Entnahmeröhrchen (je 50)
• Rückgewinnungsröhrchen (je 50)

Bei Raumtemperatur lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

I've isolated RNA using the PureLink RNA Mini Kit, but see inhibition of downstream enzymatic reactions. What could be causing this?

The presence of ethanol or salt in the purified RNA can inhibit downstream enzymatic reactions. Ensure that you are using the correct order of wash buffers in the kit for washing, and that Wash Buffer II is discarded in the flow-through. Place the spin cartridge into the wash tube and centrifuge the spin cartridge at maximum speed for 2-3 minutes to completely dry the cartridge.

I'm seeing RNA degradation after RNA extraction using the PureLink RNA Mini Kit. What happened?

The RNA could have been contaminated with RNase. Ensure that you are using RNase-free equipment and change gloves frequently. Improper handling can also result in RNA degradation. Ensure samples are processed immediately, and that the lysis is performed quickly after adding the lysis buffer. Lastly, tissues rich in RNase (such as rat pancreas) may require the addition of RNase inhibitors or inactivators to protect the RNA from degradation, or a larger volume of lysis buffer.

I'm getting low RNA yield when using the PureLink RNA Mini Kit. What could be the cause of this and what do you suggest I try?

Low RNA yield can occur due to the following:

- Incomplete lysis and homogenization: ensure that 10 µL of 2-mercaptoethanol was added per milliliter of lysis buffer, perform all steps at room temperature, decrease the amount of starting material used, use proper homogenization methods, and/or cut tissue samples into smaller pieces to ensure complete tissue immersion in the lysis buffer.
- Poor quality starting material: use fresh samples and process immediately after collection.
- Ethanol may not have been added to Wash Buffer II.
- Incorrect elution conditions may have been used: Add RNase-free water and incubate for 1 minute before centrifugation, following the recommendations for elution in the manual. You can also perform a second elution step to recover more RNA.

I'm using the PureLink RNA Mini Kit and my RNA spin cartridge is clogged. What should I do?

Incomplete homogenization or dispersal of precipitate after ethanol addition can lead to clogging of the RNA spin cartridge. Clear the homogenate and remove any particulate or viscous material by centrifugation. Completely disperse any precipitate that forms after adding ethanol to the homogenate. Load only the supernatant onto the RNA spin cartridge to avoid clogging.

What are the differences in technology between the PureLink RNA Mini Kit and RiboPure RNA Purification Kits?

The PureLink RNA Mini Kit provides rapid column-based purification of total RNA, without organic lysis (phenol/chloroform). You can obtain up to 1,000 µg of purified RNA from a single extraction. The RiboPure RNA Purification Kits combine a phenol/guanidine thiocyanate solution with a glass-fiber filter purification method.

Zitierungen und Referenzen (1)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Comparison of commercial RNA extraction kits for preparation of DNA-free total RNA from Salmonella cells.
Authors:Rump LV, Asamoah B, Gonzalez-Escalona N,
Journal:BMC Res Notes
PubMed ID:20663210
'The isolation of DNA-free RNA is a crucial step in the reverse transcription PCR (RT-PCR). Every RNA extraction procedure results in RNA samples contaminated with genomic DNA, which can cause false-positive outcomes in highly sensitive applications, including a recently developed quantitative real-time PCR (RT-qPCR) assay that targets invA mRNA for ... More