Thermo Scientific Pierce Boronsäure-Harz ermöglicht die Isolierung von Ribonukleotid- und Oligonukleotid-RNA.

Merkmale von Boronsäure-Harz:

• Ligand: Boronsäure
• Support: Perlenpolyacrylamid-Beads (1800 MW Ausschlussgrenze)
• Spacer: m-Aminophenyl-Gruppe
• Beladung: 100 µMol Boronat pro Milliliter abgesetztem Harz
• Kapazität: mindestens 99 % Bindung und Rückgewinnung von 110 µMol AMP pro Milliliter abgesetztem Harz
• Format: 50 % Harzausfällung in 0,05 % Natriumazid

Die immobilisierte Boronsäure ist eine anwenderfreundliche Polyacrylamid-Affinitätsunterstützung zur Aufreinigung von Ribonukleotiden und anderen Verbindungen mit geringem Molekulargewicht, die Cis-diol-Gruppen enthalten. Der Ligand (m-Aminophenyl-Boronsäure) bindet an die cis-Diol-Gruppen der Zuckerportionen der Nukleotide und formt so einen reversiblen fünfgliedrigen Ringkomplex. Nach dem Auswaschen nicht gebundener Moleküle aus der Probe kann der Komplex durch Senkung des pH-Werts oder Zugabe von Sorbitol dissoziiert und das Nukleotid eluiert werden.

Die Polyacrylamid-Unterstützung, die in diesem Produkt verwendet wird, schließt Moleküle über 1800 MW aus, die in die inneren Räume der Beads gelangen, sodass nur kleinere Moleküle interagieren und sich mit dem gesamten Maß an Boronatligand binden können. Dementsprechend ist eine effiziente Reinigung von glykosilierten Proteinen eventuell nicht möglich, obwohl es erfolgreich in dieser Anwendung verwendet wurde. Auf Boronsäure basierende Affinitätschromatographie wurde dazu eingesetzt, Ribonukleoside zu isolieren, Nucleosidylpeptide zu reinigen, Ribonukleasen in Gewebeextrakten zu trennen, RNA und Oligoribonukleotide zu trennen und den Anteil an nicht enzymatischer Glykosilierung in peripheren Nerven von Diabetikern und Kontrollratten/-hunden zu bestimmen.