Thermo Scientific Pierce High Capacity Streptavidin Agarose ist ein Beadharz aus immobilisiertem rekombinantem Streptavidin-Protein, das biotinylierte Proteine bei mehr als 10 mg/ml Beads bindet.

Merkmale der High Capacity Streptavidin Agarose:

• Streptavidin — Gereinigtes, rekombinantes Streptavidin-Protein (53 kDa, nahezu neutraler pI); tetrameres Protein mit vier Biotin-bindenden Stellen pro Molekül
• Agarose-Harz — Träger sind vernetzte, 6%ige Agarosebeads (CL-6B), das beliebteste Harz zur Proteinaffinitätsreinigung
• Inert und stabil — Streptavidin wird durch ladungsfreie, laugungsbeständige kovalente Bindungen immobilisiert, was zu einer geringen unspezifischen Bindung führt und mehrere Anwendungen ohne Ertragsverlust ermöglicht
• Hohe Kapazität — Diese Beads haben eine dichte Ladung von immobilisiertem Streptavidin und bieten eine Bindungskapazität von mehr als 10 mg biotinylierter BSA pro Milliliter Harz
• Zwei Formate — Erhältlich als Harzsuspension in verschiedenen Flaschengrößen und als gepackte 1 ml- und 5 ml-Chromatographiekassetten

Anwendungen:
• Aufreinigung von Membranantigenen in Verbindung mit biotinylierten monoklonalen Antikörpern
• Isolierung von Zelloberflächenproteinen, die mit einem spaltbaren Biotinylierungsreagenz markiert wurden
• Isolierung von Zelloberflächen-Glykoproteinen mit biotinyliertem Concanavalin A
• Rückgewinnung einsträngiger biotinylierter DNA zur Dideoxy-Sequenzierung
• Streptavidin-beschichtete Platten zur direkten Festphasensequenzierung
• In-vitro-Mutagenese mit Streptavidin-beschichteten Platten
• DNA-Fingerprinting mit Streptavidin-beschichteten Platten

Merkmale der vernetzten, 6%igen Beadagarose (CL-6B):
• Unterstützung der pH-Stabilität: 2 bis 14 (kurzfristig); 3 bis 13 (langfristig)
• Durchschnittliche Partikelgröße: 45 bis 165 Mikrometer
• Ausschlussgrenze: 10.000 bis 4.000.000 Dalton
• Maximale volumetrische Durchflussrate: Ca. 1 ml/Minute (für Säulendurchmesser 1 cm)
• Maximale lineare Geschwindigkeit: 30 cm pro Stunde
• Maximaler Druck: Weniger als 25 psi (1,5 bar)

Pierce High Capacity Streptavidin Agarose besteht aus gereinigtem rekombinantem Streptavidin, das mit hoher Dichte kovalent auf qualitativ hochwertiger, vernetzter 6%iger Beadagarose immobilisiert wurde. Bei Streptavidin handelt es sich um ein tetrameres Biotin-bindendes Protein. Die Agarosebeads weisen physikalische und chemische Eigenschaften auf, die ihren Einsatz in einer Vielzahl von Batch- oder Säulen-Affinitätsverfahren ermöglichen. Mit diesem Streptavidin-Harz können biotinylierte Antikörper, Proteine, Peptide, Nukleinsäuren und andere Moleküle oder Interaktionskomplexe erfasst, immunpräzipitiert, entfernt oder aus Proben gereinigt werden.

Streptavidin ist ein tetrameres Protein mit vier Biotin-bindenden Stellen ähnlich wie Avidin. Das native Protein aus Streptomyces avidinii ist Kohlenhydrat-frei, hat einen sauren pI von 5,5 und eine Masse von 75 kDa. Das rekombinante Protein, das zur Herstellung von Thermo Scientific Pierce Streptavidin-Harzen verwendet wird, hat einen nahezu neutralen isoelektrischen Punkt und eine Masse von 53 kDa. Streptavidin hat aufgrund fehlender Kohlenhydrate im Allgemeinen eine geringere unspezifische Bindungen als Avidin (aus Hühnereiweiß).

Streptavidin Agarosebeads mit hoher Kapazität sind dicht mit immobilisiertem Streptavidin beladen und bieten eine Bindungskapazität von mehr als 10 mg biotinylierter BSA pro Milliliter Harz. Dies entspricht einer 2- bis 3-mal höheren Biotin-Bindungskapazität als bei Produkten anderer Anbieter, was die Verwendung kleiner Mengen Harz für Experimente ermöglicht.

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