Pierce™ His Protein Interaction Pull-Down Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ His Protein Interaction Pull-Down Kit

Das Thermo Fisher Scientific Pierce Pull-Down-Kit für Interaktion mit His-markiertem Protein enthält die notwendigen Komponenten zur Aufnahme und Reinigung vonWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
212771 Kit
Katalognummer 21277
Preis (EUR)
590,00
Each
Menge:
1 Kit
Preis (EUR)
590,00
Each
Das Thermo Fisher Scientific Pierce Pull-Down-Kit für Interaktion mit His-markiertem Protein enthält die notwendigen Komponenten zur Aufnahme und Reinigung von Proteinen, die mit His-markierten Fusionsproteinen interagieren.

Merkmale des Pull-Down-Kits für Interaktion mit His-markiertem Protein:

6xHis Pull-down (Art.-Nr. 21277)—reinigt Proteininteraktoren von jedem His-markierten Fusionsprotein
Komplettkit—liefert alle Komponenten und ein detailliertes Protokoll zur Proteinreinigung:Proteininteraktionen
Keine spezielle Ausrüstung erforderlich—Verwendung gängiger Laborgeräte und Reagenzien (z. B. Mikrozentrifuge)
Praktisch—Zentrifugensäulen der Mikrozentrifuge erleichtern die einfache und effiziente Manipulation von Agarose-Beads. Einschließlich der einfachen Verarbeitung mehrerer Proben
Flexibel—Anweisungen enthalten Protokolle für die Verwendung mit Ködern und Beuteproteinen, die aus einer Vielzahl von Probentypen exprimiert werden
Weniger unspezifische Bindung—Cobalt-Chelatharz ist spezifischer für Histidin-markierte Fusionsproteine als Nickelharze, Ergebnis weniger unspezifischer Bindungen
Bindung—Bindet 10 bis 25 mg Histidin-markiertes Fusionsprotein pro ml Harz

Anwendungen:

• Entdeckung einer neuen Protein:Protein-Interaktion aus einem Zelllysat;
• Bestätigung einer möglichen Interaktion aus einem Zelllysat oder aus vorher gereinigten Protein
• Extraktion von Informationen über Protein:Protein-Interaktionen aus in-vitro-Transkription/Translation-Lysaten

Sie stellen das markierte Fusionsprotein als “Köder” und die Zellen zur Verfügung, die das vermeintliche Proteininteraktionsziel exprimieren (“Beute”) und die Pull-Down-Kits bieten alles andere: Zelllysepuffer, Mikrozentrifugenspin-Säulen, tag-spezifisches Affinitätsharz (Agarose-Beads) und optimierte Puffer und Protokolle. Die Pull-Down-Kits wurden entwickelt, um Erstbenutzern die Methode zu vermitteln und die Anwenderfreundlichkeit, den Komfort und die Reproduzierbarkeit für erfahrene Forscher zu erhöhen.

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Pierce™ GST Proteininteraktions-Pull-Down-Kit
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Specifications
AssayAffinitätsreinigung
Zur Verwendung mit (Anwendung)Pull-Down (Tag-basiert)
Zur Verwendung mit (Geräte)Mikrozentrifuge
FormatKit
Menge1 Kit
Ausreichend für25 Reaktionen
ZielNicht zielspezifisch
ProduktliniePierce
TypPull-Down-Kit
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Ausreichend für: Mindestens 25 Pulldown-Reaktionen, jeweils mit 25 µl Harzkobalt
• Chelat-Agarose-Harz, 750 µl
• Pull-Down-Lysepuffer, 250 ml
• Imidazol-Lösung (4 m), 5 ml
• TBS-Packung (500 ml), 1 Packung
• Pierce Spin-Säulen und Zubehör, 27 Säulen
• Mikrozentrifugensammelröhrchen, 100 Röhrchen

Pierce Lysepuffer nach Erhalt bei Raumtemperatur lagern. Die restlichen Kit-Komponenten bei 4 °C lagern.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

If my protein is endogenously expressed, which Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit should I choose?

We recommend the biotin kit for endogenously expressed proteins. The reason for this is the wide variety of biotinylation reagents that can be used to label the detection protein of the binding pair. For help choosing a biotinylation reagent, refer to the Biotinylation Selection Guide available at our website.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How is the tagged protein detected on the membrane using the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

The biotin kit utilizes streptavidin-HRP to detect the biotinylated protein bound to the prey protein on the membrane. The GST kit utilizes a polyclonal goat anti-GST antibody for detection of the glutathione-S-transferase tagged fusion protein bound to another protein on a membrane.

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How many reactions can be performed using one Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit?

The Thermo Scientific Pull-Down Protein:Protein Interaction Kits contain a complete, validated set of reagents specifically developed for performing pull-down assays.The kits contain sufficient materials for conducting 25 pull-down assays.

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Are all of the conditions for binding the prey protein to the bait protein described in the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

No. Every protein pair will require unique conditions in order to bind with one another. Factors to consider are pH, ionic strength of the buffer, need for cofactors, whether the interaction is long term or transient, etc. The researcher is recommended to perform a literature search or try several different conditions in order to determine what conditions are best for the binding of their proteins of interest. The kit includes a “universal“ wash buffer formed by diluting the lysis buffer 1:1 in TBS.

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With the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits, what methods can be used to detect the prey protein?

The prey protein can be detected following transfer on a membrane. The membrane procedures uses 1:100,000 - 1:500,000 dilution of the anti-GST antibody.

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