Pierce™ Reversible Protein Stain Kit for PVDF Membranes

Das Thermo Scientific Pierce Kit zur reversiblen Proteinfärbung für PVDF-Membranen ist eine schnelle und empfindliche Alternative zu Ponceau-S-Färbemitteln zum Proteinnachweis auf PVDF-Membran nach dem Transfer von Polyacrylamidgelen.

Merkmale des Kits zur reversiblen Proteinfärbung für PVDF-Membranen:

• Besser als Ponceau S – empfindlicher, leichter zu dokumentieren, dauerhaft bis umgekehrt (verblasst nicht)
• Empfindlich – hohe Avidität, Gesamtproteinfärbung; untere Nachweisgrenze entspricht 25 bis 50 ng pro Band
• Spezifisch – erkennt nur Protein; bindet oder interagiert nicht mit anderen Elektrophorese- oder Probenkomponenten
• Schnell – Färbung in weniger als 30 Minuten; vollständige Löschung und Umkehrung der Färbung in weniger als 15 Minuten
• Stabil – die Komponenten sind bei Raumtemperatur stabil, sparen Platz im Kühlschrank und eliminieren Äquilibrierungsschritte

Dieses Kit für die Membranfärbung verwendet ein zerstörungsfreies, reversibles, zuverlässiges und empfindliches Verfahren zur Färbung und zum Nachweis von Proteinen auf PVDF-Membranen. Das Kit ist eine hervorragende Alternative zu Ponceau-S-Färbungen zur Bewertung der Effizienz der Proteinübertragung nach SDS-PAGE und vor dem Immunblotting. Die untere Nachweisgrenze bei diesem Verfahren liegt bei 25 bis 50 ng pro Band (mindestens fünfmal empfindlicher als die herkömmliche Ponceau S-Färbung). Das Färbeprotokoll ist einfach, schnell und führt zu türkisblauen Banden, die nicht verblassen und für zukünftige Referenzzwecke leicht fotografiert werden können. Die Färbung kann in weniger als 15 Minuten leicht umgekehrt werden. Der nachfolgende Western-Blot-Nachweis ist nicht betroffen, da die Färbung das Protein nicht verändert und vollständig entfernt wird.

Das Pierce Kit zur reversiblen Proteinfärbung für PVDF-Membranen hat eine ausgezeichnete Avidität für eine breite Palette von Proteinen, was zu einer geringen Variabilität zwischen Proteinen führt und die meisten Proteine bei sehr niedrigen Konzentrationen (25 bis 50 ng pro Band) nachweisen kann. Die Pierce Membranfärbung ist anderen Proteinfärbungen, die für PVDF-Membranen erhältlich sind, überlegen. Zum Beispiel ist Ponceau S weniger empfindlich und führt zu roten Bändern, die leicht verblassen und schwer zu fotografieren sind. Der Coomassie-Farbstoff ist ein empfindliches Färbemittel, bindet aber dauerhaft an Proteine und kann das Western Blotting stören.

Das Kit verwendet einen Farbstoff, der eine hohe Affinität zu Protein aufweist, aber nicht dauerhaft bindet. Die Färbung hat minimale unspezifische Wechselwirkungen mit der Membranoberfläche und den Proteintransferreagenzien, und die Technik ist mit allgemeinen Western-Blot-Systemen kompatibel. Die behandelte Membran beeinträchtigt den konventionellen chemilumineszierenden oder chromogenen Nachweis mit HRP- und alkalischen Phosphatase-Substraten nicht. Darüber hinaus ist das Färbemittel kompatibel mit der N-terminalen Sequenzanalyse von Proteinen, die aus der Membran angeregt und eluiert werden.

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