HisPur™ Cobalt Superflow Agarose

Thermo Scientific HisPur Cobalt Superflow Agarose ist ein mit divalentem Kobalt beladener Superflow 6-Träger mit vierzähnigem Chelatliganden. Diese Agarose ist für die Aufreinigung von Proteinen mit Polyhistidin-Tags in großen Maßstab und mit hohem Reinigungsgrad vorgesehen.

Merkmale von HisPur Cobalt Superflow Agarose:

• Robust — Der Träger mit Beads aus stark quervernetzter, 6%iger Superflow Agarose toleriert lineare Flussraten bis zu 1.200 cm/h bei minimalem Auslaugen von Kobalt aufgrund eines vierzähnigen Chelatliganden
• Hohe Ausbeute — Bindet 20 mg 6xHis-GFP pro Milliliter Harz bei einer linearen Flussrate von 150 cm/Stunde. Kann mehr als 30 mg pro Milliliter Harz binden, abhängig von der Flussrate
• Hohe Reinheit — Spezifität der Kobaltbindung für Histidin-Tags führt im Allgemeinen zu Elutionsfraktionen mit weniger als 10 % Kontamination durch nicht spezifische Proteine
• Kompatibel — Bleibt nach Exposition gegenüber einer Vielzahl von Chemikalien und pH-Bedingungen funktionsfähig
• Kosteneffektiv — Harz bleibt auch nach mehreren Reinigungs- und Wiederverwendungszyklen stabil

HisPur Cobalt Superflow Agarose ist ein stark vernetztes, langlebiges Harz, das nicht bei Durchflussraten komprimiert, die für FPLC-Aufreinigungen von mittlerem bis großem Maßstab verwendet werden. Das Resin ist gegen eine Reihe von Chemikalien und pH-Werten beständig und kompatibel mit häufigen In-Situ-Reinigungsverfahren. Im Vergleich zu Nickel und anderen Liganden für die immobilisierte Metallaffinitätschromatographie (IMAC) sorgt Kobalt für eine größere Spezifität bei der Reinigung von Proteinen mit His-Tags. Die spezifische Bindung von HisPur Cobalt Superflow Agarose führt zu einem höheren Reinheitsgrad der eluierten Fraktionen, der weitere Polishing-Schritte überflüssig macht.

Anwendungen:
• FPLC-Aufreinigung von Polyhistidin-getaggten Proteinen im großen Maßstab

Affinitätschromatographie wird oft als schnelles und problemloses Verfahren zur Aufreinigung von rekombinanten Proteinen verwendet. Zu diesen Aufreinigungsmethoden gehört die Bindung von Polyhistidin-Tags an divalente Metallkationen. Diese sind wiederum an die Chelatliganden, die an den Beads des Trägers immobilisiert sind, koordinativ gebunden. Für die immobilisierte Metallaffinitätschromatographie (IMAC) zur Aufreinigung von His-getaggten Proteinen beeinflusst der Typ des Beads, Chelators und immobilisierten Metalls die Reinheit, Ausbeute und Durchflussleistung dieser Aufreinigungen.

Der Träger mit Beads aus stark quervernetzter, 6%iger Superflow Agarose toleriert höhere lineare Flussraten als weniger stark quervernetzte Agarose-Harze. Das Protokoll mit HisPur Cobalt Superflow Agarose schafft schonende Wasch- und Elutionsbedingungen und führt normalerweise zu Zielprotein mit einem Reinheitsgrad von über 90 %. Die Reinheitsgrade, die mit dieser HisPur Cobalt Superflow Agarose erreicht werden, sind im Allgemeinen höher als die Reinheitsgrade, die mit Nickel-IMAC-Harzen erreicht werden. Das macht HisPur Cobalt Superflow Agarose zu einem wertvollen Hilfsmittel für Anwender, die an einschrittigen Aufreinigungen interessiert sind. Darüber hinaus eignet sich HisPur Cobalt Superflow Agarose perfekt für Aufreinigungen in großem Maßstab, da das Harz den mittleren Drücken ohne Kompression standhält.

Weitere Produktdaten
• Leistungscharakterisierung von HisPur Cobalt Superflow Agarose

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