Das Thermo Scientific Pierce HA Tag IP/Co-IP-Kit enthält das Affinitätsharz, die Positivkontrolle und andere Reagenzien, die für die Durchführung von Immunpräzipitation (IP) oder Co-Immunpräzipitation (Co-IP)-Reaktionen mit einem HA-markierten Bait-Protein erforderlich sind.

Merkmale des HA Tag IP/Co-IP-Kits:

• Verbessert: Aktualisiertes Kit enthält mehr immobilisiertes Antikörperharz und ein verbessertes Protokoll zusammen mit GST-PI3K-SH2-HA Fusionsprotein als positive Kontrolle
• Spezifisch: Hochgradig spezifische monoklonale Anti-HA-Antikörper liefern Immunpräzipitationsprodukte in hoher Ausbeute und einem sauberen Western Blot-Nachweis
• Kompatibel: Enthält Protokolle und Reagenzien für verschiedene Elutionsbedingungen zum Berücksichtigen unterschiedlicher Proteinempfindlichkeiten und Downstream-Anwendungen
• Robust: Das Kit und die Anti-HA-Agarose sind mit verschiedenen Zelllysaten und physiologischen (nicht denaturierenden) Puffersystemen kompatibel
• Praktisch und einfach: Kit enthält alle erforderlichen Reagenzien, praktische Spin-Säulen und leicht zu befolgende Anweisungen

Dieses Kit basiert auf einer quervernetzten gekörnten Agarose, zu der ein hochspezifischer Anti-HA-Antikörper kovalent immobilisiert ist. Das gebrauchsfertige Affinitätsharz, zusammen mit den mitgelieferten Puffern, Mikrozentrifugen-Spin-Säulen, Positivkontrolle und einfach zu befolgenden Anweisungen, stellt einen vollständigen Satz von Reagenzien dar, der für 25 IP- oder Co-IP-Assays ausreicht. Bei der Inkubation mit einer Probe, die das markierte Fusionsprotein enthält, werden Interaktionskomplexe mit HA-markiertem Bait-Protein an den Agarose-Beads eingefangen. Nach einfachen Waschschritten kann der spezifische Proteininteraktionskomplex auf einfache Weise aus dem Harz in den mitgelieferten Elutionspuffer oder SDS-PAGE Probenladepuffer für die nachfolgende Analyse eluiert werden.

Das Hämagglutinin (HA)-Peptid (YPYDVPDYA) aus HA-Protein humaner Influenzaviren ist eines von mehreren Fusionsprotein-Tags für die rekombinante Proteinexpression. Mithilfe eines spezifischen, hochgradig affinitätsfixierten Antikörpers lassen sich HA-getaggte Fusionsproteine schnell aus bakteriellen und Säugetierzelllysaten sowie aus Pierce humanen In-vitro-Transkriptionsreaktionen aufreinigen. Für Co-Immunpräzipitation-Reaktionen ermöglichen einfache Waschschritte die Anreicherung und Elution spezifischer Proteininteraktionskomplexe in den mitgelieferten Elutionspuffer bzw. SDS-PAGE Probenladepuffer für die nachfolgende Analyse.

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