Pierce™ Biotin-Quantifizierungskit

Das Thermo Scientific Pierce Biotin Quantitation-Kit enthält Aliquots von HABA-Reagenzien und biotinylierten Proteinstandards für die bequeme kolorimetrische Bestimmung des Biotinylierungsgehalts in markierten Antikörpern und anderen Proteinen.

Eigenschaften des Biotin-Quantifizierungs-Kits:

• Kolorimetrisch – erfordert einen Plattenleser oder ein Spektralphotometer, der auf eine Messung bei 500 nm eingestellt ist
• Verlässlich – bewährte, gut charakterisierte Methode für die Bestimmung des Biothinylisierungsniveaus
• Praktisch – Das Kit bietet die notwendigen Reagenzien und Standards, um den Assay problemlos durchzuführen
• Flexibel – kann an Spektralphotometer-Küvetten oder Standardplattenleser mit 96-Well-Mikrotiterplatten angepasst werden
• Optionen – Ergebnisse können direkt von den Absorptionswerten ausgehend, basierend auf den Extinktionskoeffizienten mithilfe der in den Anweisungen beschriebenen Vorgehensweise berechnet werden
• Robust – wird mit einem HABA-Avidin-Komplex geliefert und kann über eine große Bandbreite von pH-Werten und Salzkonzentrationen vewrendet werden

HABA Farbstoff (4‘-Hydroxyazobenzol-2-Carbonsäure) ist ein Reagenz, das die schnelle Bestimmung des Mol-zu-Mol-Verhältnisses von Biotin zu Protein in einer Lösung erlaubt. Das Pierce Biotin Quantifizierungskit enthält eine Vormischung von HABA und Avidin und eine biotinylierte Meerrettich-Peroxidase (HRP) positive Kontrolle. Die HABA-Avidin-Vormischung wird in der praktischen Thermo Scientific wägefreien Mikroröhrchen-Verpackung geliefert, die die Schwierigkeiten des Wägens kleiner Mengen an Reagenz eliminiert.

Um die Biotinylisierung zu quantifizieren, wird eine Lösung mit dem biotinylisierten Protein zur Mischung von HABA und Avidin hinzugefügt. Aufgrund seiner höheren Affinität zu Avidin verdrängt Biotin die HABA und die Absorption bei 500 nm verringert sich proportional. Durch diese Methode kann eine unbekannte Menge an in der Lösung vorhandem Biotin mit einer einzelnen Küvette quantifiziert werden, indem die Absorption der HABA-Avidin-Lösung vor und nach dem Hinzufügen der Biotin-haltigen Probe gemessen wird. Die Veränderung der Absorption steht im gleichen Verhältnis zur Menge an Biotin in der Probe, wie der Extinktionskoeffizient des HABA-Avidin-Komplexes. Online-HABA-Rechner.