Das Dynabeads™ mRNA DIRECT™ Kit dient für die einfache und schnelle Trennung reiner, intakter polyadenylierter (polyA) mRNA direkt aus dem Rohlysat tierischer und pflanzlicher Zellen und Gewebe.Die isolierte mRNA eignet sich für alle Folgeanwendungen.Vorteile des Dynabeads™ mRNA DIRECT™ Kits:
•Schnelles—15-minütiges Verfahren liefert reine, intakte mRNA •Hochgradig reine mRNA-Isolation—beste Wahl vor der cDNA-Synthese •Sensitive mRNA-Isolatio—ermöglicht die cDNA-Synthese und die cDNA-Bibliothekskonstruktion aus ultrakleinen Startproben (ermöglicht den Aufbau einer cDNA-Bibliothek aus einer einzelnen Zelle)
Systemübersicht Das Isolationsprotokoll basiert auf der Basispaarung zwischen den PolyA-Rückständen am 3'-Ende der meisten mRNA und den Oligo (dT)25 Rückständen, die kovalent an die Oberfläche der Dynabeads™ gekoppelt sind.Andere RNA-Arten ohne polyA-Schwanz hybridisieren nicht an den Perlen und werden problemlos ausgewaschen.Ribosomale RNA, DNA, Proteine und kleine RNA-Moleküle (z. B. Transfer RNA, Mikro-RNA und kleine nukleoläre RNA) binden nicht an die Beads und werden verworfen.RNase-Hemmstoffe im Lyse-/Anbindungs-Puffer zusammen mit strengen Hybridisierungs- und Waschbedingungen gewährleisten die Trennung reiner, intakter mRNA aus RNase-reichen Rohproben ohne Verwendung stark chaotropischer Wirkstoffe.Die mRNA-Aufreinigungs-Beads erfassen spezifisch mRNA-Transkriptome aus einer Vielzahl an Rohausgangsproben (siehe Protokoll).1 mg Dynabeads™ Oligo (dT)25-Perlen (200 μl) bindet bis zu 2 μg mRNA.Eine typische Säugetierzelle enthält etwa 10–30 pg Gesamt-RNA; davon sind 1–5 % mRNA.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Spezifikationen
Isolation Technology
Magnetic Bead
Elutionsvolumen
10 to 100 μL
Probentyp
Flüssige Proben (z. B. Serum), Pflanzenproben, Virusproben, Zellen, Gewebe, FFPE- und Festproben, Hefe, RNA, Blut, Pflanzenproben, Virusproben, Zellen, Gewebe, FFPE- und Festproben, Blut
Endprodukttyp
mRNA
Hochdurchsatz-Kompatibilität
Kompatibel mit hohem Durchsatz, manuelle Protokolle, automatisierte Protokolle
Zur Verwendung mit (Geräte)
Automated Liquid Handling Systems
Zur Verwendung mit (Anwendung)
Quantitative Echtzeit-PCR (qPCR)
Umweltfreundliche Eigenschaften
Beads may be reused for multiple extractions
Menge
10 ml
Versandbedingung
Raumtemperatur
Ausgangsmaterialmenge
Cells: ≤106 Plant: ≤400 mg Tissue: ≤200 mg
Ertrag
2 μg mRNA per 200 μL of beads (Binding capacity)
Inhalt und Lagerung
Inhalt:
• 10 ml Dynabeads Oligo (dT)25
• 60 ml Lyse/Bindungspuffer
• 120 ml Waschpuffer A
• 60 ml Waschpuffer B
• 15 ml 10 mM Tris-HCl (Elutionspuffer)
Enthält genügend Reagenzien für 40 Standard-Isolierungen. Bei 2 °C bis 8 °C lagern.