Mitochondria Isolation Kit für Zellkulturen
Thermo Scientific™

Mitochondria Isolation Kit für Zellkulturen

Das Thermo Scientific Mitochondrienisolationskit für Zellkulturen bietet eine vielseitige Methode mit Mikrozentrifugenröhrchen zur Fraktionierung intakter Mitochondrien aus Proben mit SäugerzellkulturenWeitere Informationen
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KatalognummerMenge
89874115 mL
Katalognummer 89874
Preis (EUR)
359,65
Exklusiv online
400,00
Ersparnis 40,35 (10%)
Each
Menge:
115 mL
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Preis (EUR)
359,65
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Ersparnis 40,35 (10%)
Each
Das Thermo Scientific Mitochondrienisolationskit für Zellkulturen bietet eine vielseitige Methode mit Mikrozentrifugenröhrchen zur Fraktionierung intakter Mitochondrien aus Proben mit Säugerzellkulturen in nur 40 Minuten.

Merkmale des Mitochondrienisolationskits für Zellkulturen:

Schnell— Isoliert intakte Mitochondrien aus 20 Millionen Zellen in ca. 40 Minuten (nach der Zellernte)
Flexibel—Verarbeitet entweder mehrere Proben gleichzeitig mit der reagenzbasierten Methode oder erzielt die höchstmögliche Ausbeute mittels Dounce-Homogenisierung
Optimierbar—Im Lieferumfang sind Richtlinien für die Optimierung der Reinheit vs. Ausbeute mit der reagenzbasierten Methode enthalten
Einfaches Tischgerät—Isolation erfolgt in einem Mikrozentrifugenröhrchen
Kompatibel—Isolierte Mitochondrien können einer Lyse mittels Detergens unterzogen oder nahezu allen nachgeordneten Anwendungen zugeführt werden, einschließlich 2D-Elektrophorese

Die Isolierung von Mitochondrien ist in der Regel ein arbeitsaufwändiger Prozess, bei dem die Proben einzeln im Dounce-Homogenisator behandelt werden müssen. Das Mitochondria Isolation Kit beruht auf einer nichtmechanischen, reagenzbasierten Methode. Diese gestattet die gleichzeitige Verarbeitung mehrerer Proben (sechs) mit Zellkulturen in etwa 40 Minuten. Dabei werden die Säugerzellkultur-Pellets einer schonenden Lyse mit proprietärer Formulierung unterzogen. Das Ergebnis ist eine maximale Mitochondrienausbeute bei minimaler Beeinträchtigung ihrer Integrität.

In den Gebrauchsinformationen des Produkts sind Richtlinien zur Optimierung der Reinheit vs. Ertragsparameter enthalten. Für die Dounce-Homogenisierung bietet das Kit auch ein optimiertes Verfahren, bei dem die Mitochondrien-Ausbeute doppelt so hoch ist wie bei der reagenzbasierten Methode. Beide Methoden setzen differentielle Zentrifugation für die Trennung der Mitochondrien von den cytosolischen Fraktionen mittels Benchtop Mikrozentrifuge ein; dies nimmt etwa 40 Minuten in Anspruch (nach der Zellernte). Nach der Isolierung können die Mitochondrien für nachfolgende Anwendungen wie Apoptose, Signaltransduktion und Stoffwechselstudien oder zur Vereinfachung der Mitochondrien-Proteomik eingesetzt werden.

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Specifications
Menge115 mL
ReagenztypIsolierung von Organellen, subzelluläre Fraktionierung
Ausreichend für50 Isolierungen
FormFlüssig
ProdukttypKit für die Isolierung von Zellen
Unit SizeEach
Inhalt und Lagerung
Kit nach Erhalt bei 4 °C lagern. Das Produkt wird bei Umgebungstemperatur versendet.

Häufig gestellte Fragen (FAQ)

Can you provide the shelf-life for the Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells?

The Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells is covered under our general 1-year warranty and is guaranteed to be fully functional for 12 months from the date of shipment, if stored as recommended. Please see section 8.1 of our Terms & Conditions of Sale (https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/Documents/PDFs/Terms-and-Conditions-of-Sale.pdf) for more details.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

What is a typical yield from the Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells?

The typical yield is approximately 150 µg protein from 20 million starting cells after mitochondrial isolation and lysis, based on HeLa cells. This varies with cell type.

Can I use a Dounce homogenization procedure in conjunction with the Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells (Cat. No. 89874)?

Yes, the kit offers an optimized Dounce homogenization procedure, which results in two-fold greater mitochondri recovery compared to reagent-based method.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I further purify my crude mitochondrial fraction isolated using your Mitochondria Isolation Kit for Cultured Cells (Cat. No. 89874)?

To obtain a more purified fraction of heavy mitochondria, centrifuge the post-nuclear supernatant at 3000g rather than 12,000g. Western blot analysis of purified versus crude mitochondrial fractions prepared with this kit result in a > 50% reduction in cathepsin S (lysosomal protein) and PMP70 (peroxisomal protein) in the purified fraction.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

What kits do you offer for cell fractionation?

We offer the following kits for cell fractionation:

Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit, Cat. No. 89842
NE-PER Nuclear and Cytoplasmic Extraction Reagents, Cat. No. 78835
Subcellular Protein Fractionation Kit for Cultured Cells, Cat. No. 78840
Subcellular Protein Fractionation Kit for Tissues, Cat. No. 87790
Mitochondrial Isolation Kit for Cultured Cells, Cat. No. 89874
Mitochondrial Isolation kit for Tissue, Cat. No. 89801
Lysosome Enrichment Kit for Tissues and Cultured Cells, Cat. No. 89839

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Zitierungen und Referenzen (8)

Zitierungen und Referenzen
Abstract
Hypoxic Regulation of Mitochondrial Metabolism and Mitophagy in Nucleus Pulposus Cells Is Dependent on HIF-1α-BNIP3 Axis.
Authors:Madhu V,Boneski PK,Silagi E,Qiu Y,Kurland I,Guntur AR,Shapiro IM,Risbud MV
Journal:Journal of bone and mineral research : the official journal of the American Society for Bone and Mineral Research
PubMed ID:32251541
Nucleus pulposus (NP) cells reside in an avascular and hypoxic microenvironment of the intervertebral disc and are predominantly glycolytic due to robust HIF-1 activity. It is generally thought that NP cells contain few functional mitochondria compared with cells that rely on oxidative metabolism. Consequently, the contribution of mitochondria to NP ... More
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Authors:Miller CE,Xu F,Zhao Y,Luo W,Zhong W,Meyer K,Jayswal R,Weiss HL,St Clair WH,St Clair DK,Chaiswing L
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PubMed ID:36358489
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Hypoxic Regulation of Mitochondrial Metabolism and Mitophagy in Nucleus Pulposus Cells Is Dependent on HIF-1α-BNIP3 Axis
Authors:Madhu V, Boneski PK, Silagi E, Qiu Y, Kurland I, Guntur AR, Shapiro IM, Risbud MV.
Journal:J Bone Miner Res
PubMed ID:32251541
Nucleus pulposus (NP) cells reside in an avascular and hypoxic microenvironment of the intervertebral disc and are predominantly glycolytic due to robust HIF-1 activity. It is generally thought that NP cells contain few functional mitochondria compared with cells that rely on oxidative metabolism. Consequently, the contribution of mitochondria to NP ... More
Direct administration of mesenchymal stem cell-derived mitochondria improves cardiac function after infarction via ameliorating endothelial senescence.
Authors:Liang X,Zhang Y,Lin F,Li M,Li X,Chen Y,Liu J,Meng Q,Ma X,Wang E,Wei L,He Z,Fan H,Zhou X,Ding Y,Liu Z
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PubMed ID:36684073
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Authors:Xie Q,Zeng J,Zheng Y,Li T,Ren J,Chen K,Zhang Q,Xie R,Xu F,Zhu J
Journal:Oxidative medicine and cellular longevity
PubMed ID:34849186
BACKGROUND: Mitochondrial dysfunctions play a pivotal role in cerebral ischemia-reperfusion (I/R) injury. Although mitochondrial transplantation has been recently explored for the treatment of cerebral I/R injury, the underlying mechanisms and fate of transplanted mitochondria are still poorly understood. METHODS: Mitochondrial morphology and function were assessed by fluorescent staining, electron microscopy, ... More