Das Thermo Scientific Mitochondrienisolationskit für Zellkulturen bietet eine vielseitige Methode mit Mikrozentrifugenröhrchen zur Fraktionierung intakter Mitochondrien aus Proben mit Säugerzellkulturen in nur 40 Minuten.
Merkmale des Mitochondrienisolationskits für Zellkulturen:
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Schnell— Isoliert intakte Mitochondrien aus 20 Millionen Zellen in ca. 40 Minuten (nach der Zellernte)
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Flexibel—Verarbeitet entweder mehrere Proben gleichzeitig mit der reagenzbasierten Methode oder erzielt die höchstmögliche Ausbeute mittels Dounce-Homogenisierung
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Optimierbar—Im Lieferumfang sind Richtlinien für die Optimierung der Reinheit vs. Ausbeute mit der reagenzbasierten Methode enthalten
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Einfaches Tischgerät—Isolation erfolgt in einem Mikrozentrifugenröhrchen
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Kompatibel—Isolierte Mitochondrien können einer Lyse mittels Detergens unterzogen oder nahezu allen nachgeordneten Anwendungen zugeführt werden, einschließlich 2D-Elektrophorese
Die Isolierung von Mitochondrien ist in der Regel ein arbeitsaufwändiger Prozess, bei dem die Proben einzeln im Dounce-Homogenisator behandelt werden müssen. Das Mitochondria Isolation Kit beruht auf einer nichtmechanischen, reagenzbasierten Methode. Diese gestattet die gleichzeitige Verarbeitung mehrerer Proben (sechs) mit Zellkulturen in etwa 40 Minuten. Dabei werden die Säugerzellkultur-Pellets einer schonenden Lyse mit proprietärer Formulierung unterzogen. Das Ergebnis ist eine maximale Mitochondrienausbeute bei minimaler Beeinträchtigung ihrer Integrität.
In den Gebrauchsinformationen des Produkts sind Richtlinien zur Optimierung der Reinheit vs. Ertragsparameter enthalten. Für die Dounce-Homogenisierung bietet das Kit auch ein optimiertes Verfahren, bei dem die Mitochondrien-Ausbeute doppelt so hoch ist wie bei der reagenzbasierten Methode. Beide Methoden setzen differentielle Zentrifugation für die Trennung der Mitochondrien von den cytosolischen Fraktionen mittels Benchtop Mikrozentrifuge ein; dies nimmt etwa 40 Minuten in Anspruch (nach der Zellernte). Nach der Isolierung können die Mitochondrien für nachfolgende Anwendungen wie Apoptose, Signaltransduktion und Stoffwechselstudien oder zur Vereinfachung der Mitochondrien-Proteomik eingesetzt werden.
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