RecoverAll™ Multi-Sample RNA/DNA Isolation Workflow

Der RecoverAll™ Multi-Proben-RNA/DNA-Arbeitsablauf ist ein vollständiges Arbeitsablaufpaket für die sequenzielle Extraktion von RNA und DNA aus derselben Formaldehyd- oder Paraformaldehyd-fixierten, paraffineingebetteten (FFPE) Gewebeprobe. Die gewonnene RNA und DNA sind für den Einsatz in Downstream-Prozesse wie der quantitativen Echtzeit-RT-PCR und der gezielten Sequenzierung mit dem Oncomine™ Cancer Research Panel bereit. Dieses Arbeitsablaufpaket umfasst drei RecoverAll™ Gesamtnukleinsäure-Isolationskits, Elutionsröhrchen und nukleasefreies Wasser.

Zu den Merkmalen gehören:
• Gewinnt RNA und DNA in separaten Eluaten aus demselben FFPE-Abschnitt zurück
• Basiert auf bewährter Ambion™ RecoverAll-Technologie
• Verarbeitung von vier 20 µm-Abschnitten pro Reaktion
• Bietet genügend Reagenzien für 60 RNA- und 60 DNA-Isolierungen (insgesamt 120)

Der spezielle Arbeitsablauf liefert mehr Informationen aus weniger Probenmaterial
FFPE-Proben sind wertvoll, weshalb häufig eine Extraktionsmethode einer anderen vorgezogen werden muss, um Probenmaterial zu sparen. Mit dem RecoverAll Multi-Proben-RNA/DNA-Arbeitsablauf müssen Sie bei der Rückgewinnung von RNA und DNA aus derselben FFPE-Gewebeprobe in einem einzigen Arbeitsablauf nicht entscheiden, welche Nukleinsäure aus einem bestimmten FFPE-Abschnitt gewonnen werden soll.

Zuerst werden FFPE-Objektträger- oder Gewebeblock-Abschnitte entparaffiniert und mit Protease verdaut. Die Proben werden dann auf eine Filterkartusche geladen; DNA bleibt an die Filterkartusche gebunden, während RNA durchfließt. Zur RNA-Rückgewinnung wird der Durchfluss auf eine neue Filterpatrone angewendet, die mit DNase behandelt und dann aus dem Filter eluiert wird. Zur DNA-Rückgewinnung wird die an die Filterkartusche gebundene DNA mit RNase A behandelt und anschließend aus dem Filter eluiert.

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