Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin ermöglicht die einfache und effiziente Biotin-Markierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären aminhaltigen Makromolekülen. Die spezifische Markierung von Zelloberflächenproteinen ist eine weitere häufige Anwendung für diese einzigartigen wasserlöslichen und nicht membrangängigen Reagenzien.

Thermo Scientific No-Weigh Produkte sind Spezialreagenzien, die in einem voraliquotierten Format geliefert werden. Die vorgewogene Verpackung trägt dazu bei, den Verlust der Reagenzreaktivität und eine Kontamination im Laufe der Zeit zu verhindern, indem wiederholtes Öffnen und Schließen des Fläschchens eliminiert werden. Das Format ermöglicht die Verwendung frischer Reagenzfläschchen bei jedem Einsatz, wodurch das mühsame Abwiegen kleiner Reagenzienmengen vermieden und Bedenken hinsichtlich der Reagenzienstabilität reduziert werden.

Merkmale von EZ-Link Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin:

• Proteinmarkierung — Biotinyliert Antikörper zur Immobilisierung, Aufreinigung und Detektion mit Streptavidin-Harzen oder Sonden
• Zelloberflächenmarkierung — Biotinyliert nur Oberflächenproteine ganzer Zellen, da das negativ geladene Reagenz die Zellmembranen nicht durchdringt
• Amin-reaktiv — Reagiert mit primären Aminen (-NH2), z. B. der Seitenkette von Lysinen (K) oder den Amino-Termini von Polypeptiden
• Löslich — Die geladene Sulfo-NHS-Gruppe erhöht die Wasserlöslichkeit des Reagenz verglichen mit üblichen NHS-Ester-Verbindungen
• Irreversibel — Bildet dauerhafte Amid-Bindungen; der Spacerarm kann nicht gespalten werden
• Doppelte Länge — Der Spacerarm (die dem Ziel hinzugefügte Gesamtlänge) beträgt 22,4 Angström; dieser verlängerte Arm trägt dazu bei, die sterische Hinderung bei der Biotin-Bindung zu minimieren

Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin ist das längste von drei sehr ähnlichen wasserlöslichen und nicht spaltbaren EZ-Link-Reagenzien und ermöglicht die einfache und effiziente Biotinylierung von Antikörpern, Proteinen und anderen primären aminhaltigen Makromolekülen in Lösung. Die spezifische Markierung von Zelloberflächenproteinen ist eine weitere häufige Anwendung für diese einzigartig wasserlöslichen und nicht membrangängigen Reagenzien. Die drei Sulfo-NHS-Ester-Reagenzien unterscheiden sich nur in der Länge ihrer Spacerarme und bieten die Möglichkeit, Markierungs- und Nachweisexperimente zu optimieren, bei denen die sterische Hinderung der Biotin-Bindung ein wichtiger Faktor ist.

Unsere Biotin-Reagenzien gewährleisten die höchstmögliche Gesamtproduktintegrität, -konsistenz und -leistung für die vorgesehenen Forschungsanwendungen.

N-Hydroxysulfosuccinimid(NHS)-Ester von Biotin sind die beliebteste Art von Biotinylierungsreagenz. NHS-aktivierte Biotine reagieren effizient mit primären Aminogruppen (-NH2) in alkalischen Puffern und bilden stabile Amidbindungen. Proteine (z. B. Antikörper) haben in der Regel mehrere primäre Amine, die als Ziele für die Markierung zur Verfügung stehen, einschließlich der Seitenkette von Lysin-(K)-Resten und des N-Terminus jedes Polypeptids.

Verschiedene Biotin-NHS-Ester-Reagenzien unterscheiden sich in Länge, Löslichkeit, Zelldurchlässigkeit und Spaltbarkeit. Nicht sulfonierte NHS-Biotine sind zellgängig, müssen jedoch in einem organischen Lösungsmittel wie DMSO oder DMF gelöst werden. Sulfo-NHS-Biotine (und solche mit pegylierten Spacern) sind direkt wasserlöslich, können jedoch nicht die Zellmembran durchdringen. Varianten mit Disulfid-Bindungen können mithilfe von Reduktionsmitteln gespalten werden, sodass die Biotin-Gruppe vom markierten Protein getrennt werden kann.