Das Click-iT® AHA Alexa Fluor® 488 Proteinsynthese-HCS Assay bietet eine schnelle, empfindliche, ungiftige und nicht-radioaktive Methode zum Nachweis der Synthese von neu entstandenen Proteinen mittels Fluoreszenzmikroskopie und High-Content-Bildgebung. Click-iT® AHA ist eine Aminosäure mit einem Azido-Anteil analog zu Methionin. Ähnlich wie 35S-Methionin wird Click-iT® AHA Kulturzellen zugeführt und während der aktiven Proteinsynthese in Proteine integriert. Der Nachweis der enthaltenen Amin-Säure erfolgt mittels einer chemoselektiven Ligation oder “Klick”-Reaktion zwischen einem Azid und einem Alkin, bei der das azid-modifizierte Protein mit dem grün-fluoreszierenden Alexa Fluor® 488 Alkin nachgewiesen wird. Der Click-iT® AHA Alexa Fluor® Proteinsynthese-HCS Assay wurde erfolgreich in A549- und U-2 OS-Zellen mit einer Vielzahl von Reagenzien getestet, die die Proteinsynthese hemmen, einschließlich Cycloheximid, Anisomycin und Puromycin sowohl im Dosisreaktionsmodus als auch im Min⁄Max-Format.