Thermo Scientific Phusion U DNA-Polymerase ist ein neuartiges, speziell entwickeltes High-Fidelity-Enzym, das mithilfe der Fusionstechnologie entwickelt wurde. Durch eine urheberrechtlich geschützte Mutation in der sogenannten dUTP-Bindungstasche von Phusion überwindet Phusion U eine wichtige Einschränkung von Proofreading-Enzymen, denn es ist in der Lage, dUTP zu integrieren und Uracil in DNA-Templates durchzulesen.

Neben der Uracilanwendung bietet Phusion U selbstverständlich alle Eigenschaften anderer Phusion DNA-Polymerasen wie hohe Genauigkeit, Geschwindigkeit, Fähigkeit zur Amplifikation langer Amplikons bis zu 20 kb und eine hohe Spezifität mit auf Affibody basiertem Heißstart. Diese Merkmale machen die Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase zu einer hervorragenden Wahl für wichtige Anwendungen wie die Amplifikation von bisulfit-konvertierter oder beschädigter DNA sowie die Kontrolle der Verschleppungskontamination.

Die Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase ist auch in den Formaten Master Mix und Green erhältlich. Phusion U Hot-Start PCR Master Mix (F-533S und F-533L) ist eine praktische 2X Mischung, die die Anzahl der Pipettierschritte minimiert. Der Anwender muss lediglich das Template und die Primer zugeben. Das Phusion U Green-Format (F-556S und F-556L) ist eine Kombination aus Phusion U Hot-Start DNA-Polymerase und 5X Phusion Green-Puffer. Die Puffer enthalten ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe zum direkten Auftragen von PCR-Produkten auf ein Gel. Der Farbpuffer beeinträchtigt die Leistung von Phusion U nicht und ist mit Downstream-Prozessen wie DNA-Sequenzierung, Ligation und Restriktionsverdau kompatibel.

Besondere Merkmale

• Genauigkeit – DNA-Polymerase mit hoher Wiedergabetreue (25X Taq)
• Uracil-Toleranz – entwickelt zur Integration von dUTP und zur Amplifikation von Uracil-enthaltenen Templates
• Spezifität – Heißstart für weniger unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau
• Geschwindigkeit – kurze Extensionszeiten (15 bis 30 s/kb)

Anwendungen

• Amplifikation von bisulfit-konvertierter DNA
• Amplifikation von geschädigter oder gealterter DNA
• Kontrolle gegen Verschleppen von Kontaminationen
• Uracil-Exzision-basierte (USER) Klonierungsmethoden

Verwendung der Phusion DNA-Polymerasen
Annealing-Regeln für Phusion DNA-Polymerasen unterscheiden sich von vielen gängigen DNA-Polymerasen (z. B. Taq DNA-Polymerasen). Optimale Ergebnisse erzielen Sie mit unserem Tm-Rechner unter www.thermofisher.com/tmcalculator.